チューブリン重合阻害剤としてのキナゾリノン誘導体

专利摘要:
本発明は式（Ｉ）の化合物（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｎ、ｍおよびＸは定めた意味を有する）、それらのチューブリン重合の阻害剤としての使用、ならびに式（Ｉ）の該化合物を含んでなる製薬学的組成物を提供する。
公开号:JP2011515451A
申请号:JP2011501235
申请日:2009-03-26
公开日:2011-05-19
发明作者:アンジボ，パトリク・ルネ；パスキエ，エリザベート・テレーズ・ジヤンヌ；ビアラール，ジヨルジユ・エドウアルド；ブールドレ，ザビエ・マルク；フレヌ，エデイ・ジヤン・エドガール；マイエ，クリストフ；メベレク，ローレンス・アン
申请人:ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプＪａｎｓｓｅｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ Ｎａａｍｌｏｚｅ Ｖｅｎｎｏｏｔｓｃｈａｐ；
IPC主号:C07D239-80

专利说明:

[0001] 発明の分野
本発明はチューブリン重合の阻害剤に関し、そして化合物および開示される化合物を含有する組成物を提供する。さらに、本発明は、例えば医薬としての開示されるチューブリン重合阻害剤の使用方法を提供する。]
背景技術

[0002] 発明の背景
チューブリンは、αおよびβチューブリンと呼ばれる２つの関連タンパク質のヘテロ二量体からなる。チューブリンは、重合して微小管と呼ばれる構造物を形成する。微小管は高度に動的な細胞骨格要素であり、そして有糸分裂、細胞の運動性、細胞の形状、細胞内オルガネラ輸送および細胞−細胞相互作用を含む、真核生物細胞における多くのプロセスにおいて決定的役割を演じる。]
[0003] 適切な細胞分裂が起きるためには、微小管が重合および解重合できることが必須である。有糸分裂紡錘体における微小管は、非分裂細胞におけるそれよりも動的であり、したがって、微小管動力学に影響する作用物によって標的とすることができる。微小管の重合／解重合を改変することにより、これらの作用物は、有糸分裂紡錘体の形成に影響を与え、細胞周期のＧ２／Ｍ期における分裂細胞を休止し、そして最後には、アポトーシス細胞死をもたらす。新生物細胞は高い増殖速度を有するので、それらは、これらの抗有糸分裂作用物によって標的とすることができる。]
[0004] チューブリン結合性薬物の３つの主な種類、すなわちコルヒチン類似体、ビンカ（Ｖｉｎｃａ）（ツルニチニチソウ）アルカロイドおよびタキサン類が同定されており、これらの各々は、β−チューブリン分子上の特異的結合部位を保持する。パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）および関連タキサン類は、微小管の安定化、すなわちそれらが再構築できないように究極的に微小管構造のフリージング（ｆｒｅｅｚｉｎｇ）をもたらすプロセスに作用する薬物の種類を表す。有糸分裂におけるその後の休止は、細胞死を惹起するアポトーシスメカニズムを誘導する。第２の化合物類、コルヒチン類似体ならびにその他の数種の化合物は、コルヒチンと同じβ−チューブリン上の部位に結合し、そして重合と微小管形成を途絶させる。第３の化合物類、ビンブラスチンおよび他の数種のビンカ関連薬物は、ビンカ部位に結合し、微小管形成を阻害し、そして微小管を不安定化させる。]
[0005] またチューブリンは、癌性腫瘍のような血管の異常形成（新生血管形成）に依存するか、またはそれからもたらされる疾患状態を処置するための標的である。これらの場合には、血管内皮細胞の細胞骨格が微小管の解重合を通して破壊されるが、これは微小管を形成するためのチューブリンの重合を阻害することからもたらされる。微小管の長さは、解重合対重合の割合に依存する。重合の阻害による微小管の解重合は、内皮細胞の形態における変化をもたらし、これが血流の封鎖または閉鎖を引き起こす。癌性腫瘍の場合には、病的組織への血流が停止されて、腫瘍から酸素および栄養物を奪って壊死的細胞死をもたらす。新生血管系はこれらの作用物に対してより感受性である、何故ならば、それらは、アクチンに基づく細胞骨格構造によっても支持される正常で健全な血管内皮細胞よりも一層微小管細胞骨格に依存しているからである。チューブリンのコルヒチン結合部位を標的とする多数のチューブリン重合の阻害剤では、血管標的様相が抗増殖様相よりも低いインビボ濃度で達成され得る。このようにチューブリンのコルヒチン結合性ドメインを標的とする作用物は、潜在的に二重様式、すなわち抗有糸分裂と抗血管性の作用物となることができる。]
[0006] 現在処置できないか、または処置がうまくいかない腫瘍に対する効力、多剤耐性腫瘍に対する効力、および最少の副作用を含む有効かつ効能のある抗癌療法に対する必要性が継続して存在する。本発明は、癌を処置するために微小管形成を妨害し、かつチューブリンに結合する化合物、組成物、およびそのようにする方法を提供する。本発明の化合物は、チューブリン重合を阻害し、そして腫瘍血管の閉鎖に顕著な効力を有する。]
[0007] 背景となる先行技術
２００３年１２月１１日に公開された特許文献１は、細胞増殖関連障害の処置のための２−オキソ−１，３，４−トリヒドロキナゾリニル誘導体を開示する。]
[0008] ２００５年６月１６日に公開された特許文献２は、チューブリン阻害剤を開示する。]
[0009] ２００５年６月１６日に公開された特許文献３は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ阻害剤としての６−フェニルアルキル置換２−キノリノンおよび２−キノキサリノンを開示する。]
[0010] ２００５年１２月１５日に公開された特許文献４は、癌および血管形成の二重低分子阻害剤を開示する。]
[0011] ２００６年８月８日に公開された特許文献５は、チューブリン重合を阻害するためのイソザソール（ｉｓｏｚａｚｏｌｅ）コンブレスタチンの使用を開示する。]
[0012] ２００６年１１月９日に公開された特許文献６は、抗癌剤としての６−（３−ピラゾリルアミノ）ピリジン−３−カルボニトリルの調製を開示する。]
[0013] ２００６年１月１２日に公開された特許文献７は、ポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ阻害剤としてのキナゾリンジオン誘導体を開示する。]
[0014] ２００７年８月６日に公開された特許文献８は、置換ベンゾフラン、ベンズチオフェン、ベンゾセレノフェンおよびインドール、ならびにそれらのチューブリン重合阻害剤としての使用を開示する。]
[0015] ２００８年９月１２日に公開された特許文献９は、ＰＡＲＰおよびＴＡＮＫ阻害剤としてのキノリン誘導体を開示する。]
[0016] 非特許文献１は、新血管形成を減じるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）阻害またはＰＡＲＰ−１遺伝子欠失に関する。]
[0017] 国際公開第０３／１０１９８５号パンフレット
欧州特許第１６８９７１５号明細書
欧州特許第１７０９０１１号明細書
国際公開第２００５／１１７８７６号パンフレット
国際公開第２００６／０８９１７７号パンフレット
国際公開第２００６／１１８２３１号パンフレット
国際公開第２００６／００３１４８号パンフレット
国際公開第２００７／０８７６８４号パンフレット
国際公開第２００８／１０７４７８号パンフレット]
先行技術

[0018] Ｔｅｎｔｏｒｉ ｅｔ ａｌ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ，ｖｏｌ．４３、ｎｏ．１４，２００７]
[0019] 発明の説明
本発明は、立体化学的異性体を含む、式（Ｉ）：]
[0020] ]
[0021] ［式中、
ｍは０、１または２であり、そしてｍが０である場合、直接結合が意図され；
ｎは０、１または２であり、そしてｎが０である場合、直接結合が意図され；
Ｘは直接結合、ＣＲ１０Ｒ１１、ＮＲ８またはＯであり；
Ｒ１はアリールまたはＨｅｔであり；
ここでアリールはフェニルまたはナフタレニルであり；
ここでＨｅｔはチエニル、ピロリル、ピロリニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、フラニル、ピペリジニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、アザインドリジニル、インドリル、インドリニル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、クロマニル、プリニル、キノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサゾリニル、ナフチリジニルまたはプテリジニルであり；
アリールまたはＨｅｔ上の２個の炭素原子は
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ− （ａ−１）、
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ− （ａ−２）、
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２− （ａ−３）、
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ８− （ａ−４）、
−Ｏ−ＣＲ８２−Ｏ− （ａ−５）、
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２− （ａ−６）、
−ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２− （ａ−７）、
−（ＣＨ２）３− （ａ−８）、または
−（ＣＨ２）４− （ａ−９）；
から選択される二価の基で架橋されることができ（すなわち、二もしくは三環系部分を形成する）；
各アリール、Ｈｅｔ、架橋化アリールもしくは架橋化Ｈｅｔは、ハロ、シアノ、ニトロ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、アミノＣ３−６シクロアルキル、ハロＣ１−６アルキル、トリハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ２−６アルケニルカルボニル、オキシム、Ｃ１−６アルキルオキシム、アミド
キシム、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｏ−ＣＨ３、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ≡Ｃ−Ｓｉ（ＣＨ３）３、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ２−６アルケニル、ヒドロキシＣ２−６アルキニル、シアノＣ１−６アルキル、シアノＣ２−６アルケニル、アミノカルボニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ２−６アルキニル、−ＰＯ（ＯＣ１−６アルキル）２、−Ｂ（ＯＨ）２、−Ｓ−ＣＨ３、ＳＦ５、Ｃ１−６アルキルスルホニル、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｃ１−６アルキルＮＲ８Ｒ９、−ＯＲ８、−Ｃ１−６アルキルＯＲ８、−ＣＯＮＲ８Ｒ９、ピペリジニルＣ１−６アルキル、ピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、モルホリニルＣ１−６アルキル、ピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ１−６アルキルピペラジニル、モルホリニル、フェニル、チエニル、ピラゾリル、ピロリル、ピロリジニル、ピリジニル、ピリミジニル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、イミダゾリルＣ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルイミダゾリルＣ２−６アルキニル、シアノピリジニル、フェニルＣ１−６アルキル、フェニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルオキシフェニル、トリハロＣ１−６アルキルフェニル、メチルピラゾリル、ハロピリミジニルまたはジメチルアミノピロリジニルからそれぞれ独立して選択される１、２、３、４もしくは５個の置換基により置換されることができ；
Ｒ２は水素、メチル、エチル、プロピル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキルメチル、フルオロ、フェニル、シアノフェニルまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ハロ、トリフルオロメチル、メチルオキシまたはＣ１−６アルキルカルボニルであり；
各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は水素、ハロ、Ｃ１−６アルキルオキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９またはＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシから独立して選択され；
各Ｒ８およびＲ９は、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、カルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ジヒドロキシＣ１−６アルキル、シアノＣ１−６アルキル、トリハロＣ１−６アルキル、フェニルＣ１−６アルキル、（ジＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、モルホリニルＣ１−６アルキル、モルホリニルカルボニル、ピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ピペリジニルＣ１−６アルキル、チオモルホリニルＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルメチル、ピリジニル、ピリミジニル、フェニル、ハロフェニル、オキサニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキルカルボニルアミノＣ１−６アルキルから独立して選択され；
各Ｒ１０およびＲ１１は水素、メチル、ヒドロキシルから独立して選択され；あるいはＲ１０およびＲ１１はそれらに結合している炭素原子と共にシクロプロピル環または式Ｃ（＝Ｏ）の基を形成する］
の化合物、それらのＮ−オキシド形、それらの製薬学的に許容され得る付加塩、およびそれらの溶媒和物に関する。]
[0022] また本発明の式（Ｉ）の化合物および中間体は、それらの互変異性体形でも存在することができる。そのような形態は上記式で明白には示していなくても本発明の範囲に包含されることを意図する。式（Ｉ）の化合物の互変異性体形は、例えばエノール基がケト基に転換された（ケト−エノール互変異性体形）式（Ｉ）の化合物も含んでなることを意味する。]
[0023] Ｒ１中の複素環式環系が−ＣＨ２−、−ＣＨ＝または−ＮＨ−部分を含む場合はいつでも、置換基または分子の残りの部分は各炭素または窒素原子に結合することができ、この
場合１もしくは両方の水素原子を置き換えることができる。]
[0024] 前記定義および今後使用する多くの用語をこれから説明する。これらの用語は時には、そのままで、または合成用語でも使用される。]
[0025] 前記定義および今後使用するように、ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードに対する総称であり；Ｃ１−６アルキルは、１〜６個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖飽和炭化水素基、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、１−メチルエチル、２−メチルプロピル、２−メチル−ブチル、２−メチルペンチルなどと定義し；ハロＣ１−６アルキルは１個のハロ置換基を含有するＣ１−６アルキル、例えばフルオロメチル（−ＣＨ２Ｆ）と定義する；トリハロＣ１−６アルキルは３個の同一もしくは異なるハロ置換基を含有するＣ１−６アルキル、例えばトリフルオロメチルと定義する；Ｃ２−６アルケニルは、二重結合、特に１個の二重結合を含有し、そして２〜６個の炭素原子を有する例えばエテニル、２−プロペニル、３−ブテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、３−メチル−２−ブテニル等のような直鎖および分枝鎖炭化水素基と定義する；Ｃ２−６アルキニルは、三重結合、特に１個の三重結合を含有し、そして２〜６個の炭素原子を有する例えばエチニル、２−プロピニル、３−ブチニル、２−ブチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、３−ヘキシニル等のような直鎖および分枝鎖炭化水素基と定義する；Ｃ３−６シクロアルキルには３〜６個の炭素を有する環式炭化水素基、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。]
[0026] 用語「製薬学的に許容され得る付加塩」は、製薬学的に許容され得る酸または塩基付加塩を意味する。先に言及し、またはこれから述べる製薬学的に許容され得る酸または塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物が形成できる治療に活性のある無毒の酸および無毒の塩基付加塩形態を含んでなることを意味する。塩基性を有する式（Ｉ）の化合物は、適当な酸により該塩基形態を処理することによりそれらの製薬学的に許容され得る酸付加塩に変換できる。適当な酸は無機酸、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩化水素酸もしくは臭化水素酸；硫酸；硝酸；リン酸等；あるいは有機酸、例えば、酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸（すなわちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸等を含む。]
[0027] 酸性を有する式（Ｉ）の化合物は、適当な有機または無機塩基により該酸形態を処理することによりそれらの製薬学的に許容され得る塩基付加塩に変換できる。適当な塩基性の塩形態は、例えば、アンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ金属塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩など、有機塩基との塩、例えば、ベンザシン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、およびアミノ酸、例えばアルギニン、リジンなどとの塩を含む。]
[0028] 治療上の使用には、式（Ｉ）の化合物の塩は、対イオンが製薬学的に許容され得るものである。しかし製薬学的に許容されない酸および塩基の塩でも、例えば製薬学的に許容され得る化合物の調製または精製に用途を見いだすことができる。製薬学的に許容されてもされなくてもすべての塩が本発明の範囲に含まれる。]
[0029] 式（Ｉ）の化合物の四級アンモニウム塩は、式（Ｉ）の化合物の塩基性窒素と適切な四級化剤、例えば場合により置換されてもよいアルキルハライド、アリールハライドまたはアリールアルキルハライド、特にヨウ化メチルおよびヨウ化ベンジルとの反応により形成することができる該化合物と定義する。良い脱離基を持つ他の反応体を使用してもよく、それらは例えばアルキルトリフルオロメタンスルホン酸塩、アルキルメタンスルホン酸塩
およびアルキルｐ−トルエンスルホン酸塩である。四級アンモニウム塩は少なくとも１つの正に荷電した窒素を有する。製薬学的に許容され得る対イオンにはクロロ、ブロモ、ヨード、トリフルオロ酢酸塩および酢酸塩イオンを含む。式（Ｉ）の化合物の四級アンモニウム塩は、本発明の範囲内に含まれる。]
[0030] 用語、溶媒和物は水和物および式（Ｉ）の化合物が形成することができる溶媒付加形態、およびそれらの製薬学的に許容され得る付加塩を含んでなる。そのような形態の例は、例えば水和物、アルコラート等である。]
[0031] 先に使用されたような、またはこれから使用する用語、式（Ｉ）の化合物の立体化学的異性体は、同じ結合配列によって結合された同じ原子から作成されるが、相互交換不可能である異なる三次元構造を有する、式（Ｉ）の化合物が保持できるすべての可能な化合物と定義する。他に言及または示さない限り、化合物の化学的名称は、該化合物が保持できるすべての可能な立体化学的異性体の混合物を包含する。該混合物は、該化合物の基本分子構造のすべてのジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーを含んでもよい。式（Ｉ）の化合物のすべての立体化学的異性体は、純粋な形態または互いの混合物の両方で本発明の範囲に含まれるものとする。]
[0032] 特に興味深いのは立体化学的に純粋な式（Ｉ）の化合物である。]
[0033] 本明細書で言及する化合物および中間体の純粋な立体異性体形は、該化合物または中間体と同じ基礎分子構造の他のエナンチオマー形またはジアステレオマー形を実質的に含まない異性体と定義する。特に用語「立体化学的に純粋」とは、少なくとも８０％の立体異性体過剰率（ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｉｃ ｅｘｃｅｓｓ）（すなわち最少８０％の一異性体および最大２０％のもう一方の可能な異性体）から、最大１００％の立体異性体過剰率（すなわち１００％の一異性体およびもう一方の異性体はなし）を有する化合物または中間体に関し、より特別には９０％から最高１００％の立体異性体過剰率を有する化合物または中間体、さらにより特別には９４％から最高１００％の立体異性体過剰率を有し、そして最も特別には９７％から最大１００％の立体異性体過剰率を有するものである。用語「エナンチオマー的に純粋（ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃａｌｌｙ ｐｕｒｅ）」および「ジアステレオマー的に純粋（ｄｉａｓｔｅｒｅｏｍｅｒｉｃａｌｌｙ ｐｕｒｅ）」とは同様に理解されるべきであるが、その場合は問題の混合物中でそれぞれのエナンチオマー過剰率、ジアステレオマー過剰率に関する。]
[0034] 化合物が１つのキラル中心を有し、そしてこの化合物の２つのエナンチオマーが分離されている場合、図面中のアスタリスク“＊”は、エナンチオマーの絶対的立体化学は決定されなかったことを意味する。]
[0035] 式（Ｉ）の化合物のＮ−オキシド形は、１個または数個の３級窒素原子がいわゆるＮ−オキシドに酸化された式（Ｉ）の化合物、特に、１もしくは複数のピペリジンまたはピペラジン窒素がＮ−オキシド化されたそれらのＮ−オキシドを含むことを意味する。]
[0036] 式（Ｉ）の化合物は、三価の窒素をそのＮ−オキシド形に変換するための技術的に知られている手順に従い、対応するＮ−オキシド形に転換することができる。該Ｎ−酸化反応は一般に式（Ｉ）の出発材料を適切な有機もしくは無機ペルオキシドと反応させることにより行うことができる。適切な無機ペルオキシドには例えば過酸化水素、アルカリ金属もしくはアルカリ土類金属ペルオキシド、例えばナトリウムペルオキシド、カリウムペルオキシドを含んでなり；適切な有機ペルオキシドはペルオキソ酸、例えばベンゼンカルボペルオキソ酸もしくはハロ置換ベンゼンカルボペルオキソ酸、例えば３−クロロベンゼンカルボペルオキソ酸、ペルオキソアルカン酸、例えばペルオキソ酢酸、アルキルヒドロペル
オキシド、例えばｔ−ブチルヒドロ−ペルオキシドを含むことができる。適切な溶媒には例えば水、低級アルコール、例えばエタノール等、炭化水素、例えばトルエン、ケトン、例えば２−ブタノン、ハロゲン化炭化水素、例えばジクロロメタンおよびそのような溶媒の混合物である。]
[0037] 本発明は本発明の化合物に存在する原子の任意の同位体を含むことも意図する。例えば水素の同位体にはトリチウムおよびジューテリウムがあり、そして炭素の同位体にはＣ−１３およびＣ−１４がある。]
[0038] 今後使用する場合はいつでも、用語「式（Ｉ）の化合物」は、それらのＮ−オキシド形、製薬学的に許容され得る酸または塩基付加塩、溶媒和物、およびすべての立体異性体形を含むことを意味する。]
[0039] 第１群の興味深い化合物は、式中、
ｍが０、１、または２であり、そしてｍが０である場合、直接結合が意図され；
ｎが０、１または２であり、そしてｎが０である場合、直接結合が意図され；
Ｘが直接結合、ＣＲ１０Ｒ１１、ＮＲ８またはＯであり；
Ｒ１がアリールまたはＨｅｔであり；
ここでアリールがフェニルまたはナフタレニルであり；
ここでＨｅｔがチエニル、ピロリル、ピロリニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、フラニル、ピペリジニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、アザインドリジニル、インドリル、インドリニル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、クロマニル、プリニル、キノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサゾリニル、ナフチリジニルまたはプテリジニルであり；
アリールまたはＨｅｔ上の２個の炭素原子は
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ− （ａ−１）、
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ− （ａ−２）、
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２− （ａ−３）、
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ８− （ａ−４）、
−Ｏ−ＣＲ８２−Ｏ− （ａ−５）、
−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２− （ａ−６）、
−ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２− （ａ−７）、
−（ＣＨ２）３− （ａ−８）、または
−（ＣＨ２）４− （ａ−９）；
から選択される二価の基で架橋されることができ（すなわち、二もしくは三環系部分を形成する）；
各アリール、Ｈｅｔ、架橋化アリールもしくは架橋化Ｈｅｔが、ハロ、シアノ、ニトロ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、アミノＣ３−６シクロアルキル、ハロＣ１−６アルキル、トリハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ２−６アルケニルカルボニル、オキシム、Ｃ１−６アルキルオキシム、アミドキシム、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｏ−ＣＨ３、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ≡Ｃ−Ｓｉ（ＣＨ３）３、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ２−６アルケニル、ヒドロキシＣ２−６アルキニル、シアノＣ１−６アルキル、シアノＣ２−６アルケニル、アミノカルボニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ２−６アルキニル、−ＰＯ（ＯＣ１−６アルキル）２、−Ｂ（ＯＨ）２、−Ｓ−ＣＨ３、ＳＦ５、Ｃ１−
６アルキルスルホニル、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｃ１−６アルキルＮＲ８Ｒ９、−ＯＲ８、−Ｃ１−６アルキルＯＲ８、−ＣＯＮＲ８Ｒ９、ピペリジニルＣ１−６アルキル、ピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、モルホリニルＣ１−６アルキル、ピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ１−６アルキルピペラジニル、モルホリニル、フェニル、チエニル、ピラゾリル、ピロリル、ピロリジニル、ピリジニル、ピリミジニル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、イミダゾリルＣ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルイミダゾリルＣ２−６アルキニル、シアノピリジニル、フェニルＣ１−６アルキル、フェニルＣ２−６アルケニル、モルホリニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシフェニル、トリハロＣ１−６アルキルフェニル、メチルピラゾリル、ハロピリミジニルまたはジメチルアミノピロリジニルからそれぞれ独立して選択される１、２、３、４もしくは５個の置換基により置換されることができ；
Ｒ２が水素、メチル、エチル、プロピル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキルメチル、フルオロ、フェニル、シアノフェニルまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ３がメチル、エチル、プロピル、ヒドロキシメチル、ハロ、トリフルオロメチル、メチルオキシまたはＣ１−６アルキルカルボニルであり；
各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素、ハロ、Ｃ１−６アルキルオキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９またはＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシから独立して選択され；
各Ｒ８およびＲ９が、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、カルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ジヒドロキシＣ１−６アルキル、シアノＣ１−６アルキル、トリハロＣ１−６アルキル、フェニルＣ１−６アルキル、（ジＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、モルホリニルＣ１−６アルキル、モルホリニルカルボニル、ピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ピペリジニルＣ１−６アルキル、チオモルホリニルＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルメチル、ピリジニル、ピリミジニル、フェニル、ハロフェニル、オキサニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキルカルボニルアミノＣ１−６アルキルから独立して選択され；
各Ｒ１０およびＲ１１が水素、メチル、ヒドロキシルから独立して選択され；あるいはそれらに結合している炭素原子と共にシクロプロピル環または式Ｃ（＝Ｏ）の基を形成する、
化合物、それらのＮ−オキシド形、それらの製薬学的に許容され得る付加塩、それらの溶媒和物、およびそれらの立体化学的異性体形である式（Ｉ）の化合物である。]
[0040] 第２群の興味深い化合物は、１もしくは複数の以下の制限が適用される式（Ｉ）の化合物からなる：
ａ）ｍが０または１であり；
ｂ）Ｒ１がフェニルまたはＨｅｔであり：ここでＨｅｔはピリジニル、ピリミジニルまたはベンゾチアゾリルであり；
ｃ）Ｈｅｔ上の２個の炭素原子は二価の基（ａ−８）で架橋化され；
ｄ）Ｒ１の定義における各フェニルまたはＨｅｔまたは架橋化Ｈｅｔは、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルキニル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｏ−ＣＨ３、ヒドロキシＣ２−６アルキニルまたは−ＯＲ８からそれぞれ独立して選択される１もしくは２個の置換基により置換されることができ；
ｅ）Ｒ２がメチルまたはエチルであり；
ｆ）Ｒ３がメチル、エチルまたはヒドロキシエチルであり；
ｇ）各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素またはハロから独立して選択され；
ｈ）各Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであるか；または
ｉ）各Ｒ１０およびＲ１１が水素である。]
[0041] 第３群の興味深い化合物は、Ｈｅｔがピリジルまたはピリミジルである式（Ｉ）の化合物または上記の興味深い式（Ｉ）の化合物群からなる。]
[0042] 第４群の興味深い化合物は、１もしくは複数の以下の制限が適用される式（Ｉ）の化合物または上記の興味深い式（Ｉ）の化合物群の１つからなる：
ａ）ｍが０であり、そしてｎが０であり；
ｂ）Ｘが直接結合またはＣＨ２であり：
ｃ）Ｒ１がフェニル、ピリジニルまたはピリミジニルであり；
ｄ）Ｒ１がピリジニルである場合、ピリジニル上の２個の炭素原子は二価の基（ａ−８）で架橋化されることができ；
ｅ）Ｒ１の定義における各フェニル、ピリジニルまたはピリミジニルは、ハロ、シアノまたはＣ１−６アルキルオキシからそれぞれ独立して選択される１もしくは２個の置換基により置換されることができ；
ｆ）Ｒ２がメチルであり；
ｇ）Ｒ３がメチルまたはエチルであり；あるいは
ｈ）各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である。]
[0043] 第５群の興味深い化合物は、１もしくは複数の以下の制限が適用される式（Ｉ）の化合物または上記の興味深い式（Ｉ）の化合物群の１つからなる：
ａ）Ｘが直接結合であり、そしてアリールまたはＨｅｔ上の２個の炭素原子は、（ａ−８）から選択される二価の基で架橋化され；
ｂ）ＸがＣＲ１０Ｒ１１であり、そしてｍおよびｎが０であり：
ｄ）ＸがＮＲ８であり、そしてｍが１であり、そしてｎが１であり；
ｅ）ＸがＯであり、そしてｍが０であり、そしてｎが２であり；
ｇ）Ｒ２がメチルであり；あるいは
ｈ）Ｒ３がエチルである。]
[0044] 第６群の興味深い化合物は、Ｒ３がヒドロキシエチルである式（Ｉ）の化合物または上記の興味深い式（Ｉ）の化合物群の１つからなる。]
[0045] 好適な化合物群は、ｍが０または１であり；Ｒ１がフェニルまたはＨｅｔであり；ここでＨｅｔがピリジニル、ピリミジニルまたはベンゾチアゾリルであり；Ｈｅｔ上の２個の炭素原子は、二価の基（ａ−８）で架橋化されることができ：各フェニルまたはＨｅｔまたは架橋化Ｈｅｔが、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルキニル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｏ−ＣＨ３、ヒドロキシＣ２−６アルキニルまたは−ＯＲ８からそれぞれ独立して選択される１もしくは２個の置換基により置換されることができ；Ｒ２がメチルまたはエチルであり；Ｒ３がメチル、エチルまたはヒドロキシエチルであり；各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が、水素またはハロから独立して選択され；各Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり；そして各Ｒ１０およびＲ１１が水素である式（Ｉ）の化合物からなる。]
[0046] より好適な化合物群は、ｍが０であり、そしてｎが０であり；Ｘが直接結合またはＣＨ２であり；Ｒ１がフェニル、ピリジニルまたはピリミジニルであり；Ｒ１がピリジニルである場合、ピリジニル上の２個の炭素原子は二価の基（ａ−８）で架橋化されることができ；各フェニル、ピリジニルまたはピリミジニルがハロ、シアノまたはＣ１−６アルキルオキシからそれぞれ独立して選択される１もしくは２個の置換基により置換されることができ；Ｒ２がメチルであり；Ｒ３がメチルまたはエチルであり；そして各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である式（Ｉ）の化合物からなる。]
[0047] 最も好適な化合物は、Ｃｏ．Ｎｏ．１、Ｃｏ．Ｎｏ．６、Ｃｏ．Ｎｏ．２７、Ｃｏ．Ｎｏ．１３およびＣｏ．Ｎｏ．４である。]
[0048] ]
[0049] およびそれらのＮ−オキシド形、それらの製薬学的に許容され得る付加塩、およびそれらの溶媒和物；特にそれらの製薬学的に許容され得る付加塩およびそれらの溶媒和物；さらに特別にはそれらの製薬学的に許容され得る付加塩。]
[0050] 式（Ｉ）の化合物は、以下に記載する一般法に従い調製することができる。出発材料および中間体の幾つかは既知の化合物であり、そして市販されているか、または当該技術分野で一般的に知られている通常の反応手順に従い調製することができる。]
[0051] 幾つかの調製法をこれからさらに詳細に記載する。式（Ｉ）の最終化合物を得るための他の方法は、実施例に記載する。]
[0052] 式（Ｉ）の化合物は過剰な塩基、例えば２−メチル−２−プロパノール、カリウム塩またはリチウムジイソプロピルアミドを、式（ＩＩ）の中間体に、式（ＩＩＩ）の中間体（式中、Ｗはクロロまたはブロモ、またはメシレートのような他の脱離基である）の存在下、テトラヒドロフラン、ジオキサンまたはジメチルホルムアミドのような適切な溶媒中で加えることにより調製できる。]
[0053] ]
[0054] 式（ＩＩ）の中間体（式中、Ｒ３はメチル、エチルまたはプロピルであるか、あるいはＲ３は−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ３）２ｔＢｕである）は、２−メチル−２−プロパノール、カリウム塩およびトシルメチルイソシアニドの混合物（ジメチルスルフォキシド：ＤＭＳＯ中）を、式（ＩＶ）の中間体にメタノールのような適切な溶媒中で加えることにより調製できる。]
[0055] ]
[0056] 式（ＩＶ）の中間体は、式（Ｖ）の中間体を、例えばｎ−ブチルリチウムのような有機リチウム試薬で、反応に不活性な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中にて処理し、続いて該中間体を式（ＶＩ）の中間体と反応させることにより調製できる。]
[0057] ]
[0058] また式（ＩＶ）の中間体は、式（ＶＩＩ）の中間体を二酸化マンガンのような適切な酸化剤の存在下でジオキサンのような適切な溶媒中にて転換することにより、あるいはトリス［２−（２−メトキシエトキシ）エチル］アミン中の四酸化マンガンカリウムの存在下で、ジクロロメタンのような適切な溶媒中にて転換することにより調製できる。]
[0059] ]
[0060] 式（ＶＩＩ）の中間体は、式（ＶＩＩＩ）の中間体を例えばｎ−ブチルリチウムのような有機リチウム試薬で、反応に不活性な溶媒、例えばテトラヒドロフラン中にて処理し、続いて該中間体を式（Ｖ）の中間体と反応させることにより調製できる。]
[0061] ]
[0062] 式（Ｖ）の中間体は、カルボニルジイミダゾールを式（ＩＸ）の中間体とテトラヒドロフランのような適切な溶媒中で反応させることにより調製できる。]
[0063] ]
[0064] 式（ＩＸ）の中間体は、式（Ｘ）の中間体のニトロ部分を、ＰｔＯ２のような白金触媒の存在下でメタノールのような適切な溶媒中での水素化による還元により調製できる。またそのような還元は、他の技術的に知られている手順、例えばテトラヒドロフランおよび水のような溶媒の混合物中で鉄および塩化アンモニウムを使用しても行うことができる。]
[0065] ]
[0066] 式（Ｘ）の中間体は、一級アミン（ＸＩＩ）を式（ＸＩ）の中間体と炭酸カリウムのような塩基の存在下、アセトニトリルのような適切な溶媒中で反応させることにより調製できる。またそのような反応は、例えば還流でメタノールを使用することにより他の既知の手順によっても行うことができる。]
[0067] ]
[0068] また式（Ｉ）の化合物またはそれらの中間体は、技術的に既知の反応または官能基変換を介して互いに転換することができる。幾つかのそのような変換は既に前述されている。他の例は、カルボン酸エステルの対応するカルボン酸またはアルコールへの加水分解；アミドの対応するカルボン酸またはアミンへの加水分解；ニトリルの対応するアミドへの加水分解であり；イミダゾールまたはフェニル上のアミノ基は、技術的に既知のジアゾ化反応と、続く水素によるジアゾ基の置換の結果水素により置換されてもよい；アルコールはエステルおよびエーテルに転化することができる：１級アミンは２級または３級アミンに転換されることができる；二重結合は対応する単結合に水素付加され得る；フェニル基上のヨード基は適当なパラジウム触媒の存在下で一酸化炭素の挿入によりエステル基に転化することができる；フェニル基上のヨード基はＣ２−６アルキニル基またはそれらの誘導体（例えば−Ｃ≡Ｃ−Ｓｉ（ＣＨ３）３もしくはヒドロキシＣ２−６アルキニル）に、適切なパラジウム触媒の存在下で適切なＣ２−６アルキニル化合物またはそれらの誘導体との反応により転換されることができる；フェニル基上の−Ｃ≡Ｃ−Ｓｉ（ＣＨ３）３基は、適切な塩基の存在下で−Ｃ≡ＣＨに転換されることができる。]
[0069] 本発明では幾つかの式（Ｉ）の化合物および幾つかの中間体は、不斉炭素原子を含むことができる。該化合物および該中間体の純粋な立体化学的異性体は、既知の手順を応用することにより得ることができる。例えばジアステレオ異性体は選択的結晶化またはクロマトグラフィー技術のような物理的方法、例えば向流分配、液体クロマトグラフィー等のような方法により分離することができる。エナンチオマーは、ラセミ混合物から最初に該ラセミ混合物を、例えばキラル酸のような適切な分割剤によりジアステレオマー塩または化合物の混合物に転換し；次いでジアステレオマー塩または化合物の該混合物を、例えば選択的結晶化、超臨界流体クロマトグラフィーまたはクロマトグラフィー技術、例えば液体クロマトグラフィー等の技術により物理的に分離し；そして最後に該分離したジアステレオマー塩または化合物を対応するエナンチオマーに転換することにより得ることができる
。純粋な立体化学的異性体も、介入する反応が立体特異的に起これば、適切な中間体および出発材料の純粋な立体化学的異性体形から得ることができる。]
[0070] また本発明は医薬として使用するための、特にチューブリン重合が媒介する障害の処置に使用するための、細胞の異常な増殖の抑制に使用するための、腫瘍の増殖の抑制に使用するための上記定義の式（Ｉ）の化合物に関する。]
[0071] 本発明の化合物は、以下の実験の部から分かるように、チューブリン重合阻害剤である。]
[0072] 用語「チューブリン重合阻害剤」は、
−微小管を安定化し、微小管の解重合を阻害し、微小管を安定化し、または微小管構造をフリーズ（ｆｒｅｅｚｅ）する
−微小管の重合を途絶し、そして微小管の形成を途絶する、または
−微小管を不安定化し、そして微小管の形成を防止する
化合物を同定するために使用される。]
[0073] チューブリンの重合阻害能の結果として、本発明の化合物は血管破壊能も有する。]
[0074] 薬物の薬物動態学的特性（吸収、分布、代謝、排出および毒性）は、最大の治療指数を達成するために重要である。低容量の分布（血管中の薬剤濃度）および短い半減期が、血管破壊剤には望ましい。低容量の分布は、薬剤の標的とする組織、血管内皮に対する暴露を最大とし、そして他の組織（血管の外側）に対する暴露を最少とする。また腫瘍血管は血管破壊剤に対する暴露で大変迅速に閉鎖するので、全身的に暴露し続けることがさらに腫瘍に影響を及ぼすことはなく、しかも副作用を生じる恐れがあるために望ましくない。]
[0075] また本発明は、動物、特にヒトの任意の疾患および障害を処置するための薬剤の調製において、本明細書に記載する化合物の使用を意図するものである。]
[0076] また本発明はチューブリン重合が媒介する障害を処置する薬剤の製造に、式（Ｉ）の化合物の使用を意図するものである。]
[0077] また本発明は、製薬学的に許容され得る担体および有効成分として治療に有効な量の本発明の化合物を含んでなる製薬学的組成物を含んでなる。]
[0078] 本発明の製薬学的組成物を調製するために、有効成分として有効量の、塩基または酸付加塩の形態特定化合物が、製薬学的に許容され得る担体と、完全な混合物として合わせられるが、この担体は、投与に望ましい調製物の形態に応じて、広範な種類の形態をとることができる。これらの製薬学的組成物は、好ましくは、経口的、直腸内、経皮的、または非経口的注射による投与に適当な単位剤形であることが望ましい。例えば、経口剤形の組成物の調製には任意の通常の製薬学的媒体を使用することができ、例えば、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤および溶液剤のような経口液状調製物の場合には、水、グリコール、油、アルコール等：あるいは散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合には、固形担体、例えば澱粉、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等である。投与が容易さから、錠剤およびカプセル剤が、最も有利な経口単位剤形を表し、この場合には、固形の製薬学的担体が使用されることは明らかである。非経口組成物では、他の成分が例えば溶解性を助けるために含まれてもよいが、担体は通常、少なくとも大部分は無菌水を含んでなるだろう。例えば、注射用溶液剤は、担体が生理食塩水、グルコース溶液もしくは生理食塩水とグルコース溶液の混合液を含んでなる状態で調製することができる。また注射用懸濁剤も調製することができ、この場合には適当な液状担体、沈殿防止剤等が使用されてもよい。経皮投与に適する組成物では、担体は場合により浸透促進剤および／または適当な湿潤剤を、場合によりわずかな比率の任意の性質の適切な添加物と組み合わせて含んでなり、この添加物は皮膚に対して重大な悪影響を及ぼさない。該添加物は、皮膚への投与を容易にし、かつ／または所望の組成物の調製に役立ち得る。これらの組成物は種々の方法、例えば経皮パッチ剤として、スポットオン剤として、軟膏剤として投与されてもよい。前述の製薬学的組成物を、投与の容易性および用量の均一性のために単位剤形に調合することが有利である。本明細書および請求の範囲において使用される単位剤形は、単位投薬用量として適当な物理的に分割された単位を指し、各単位は必要な製薬学的担体と一緒に所望の治療効果を生むように計算された有効成分を予め決定された量で含有している。そのような単位剤形の例は、錠剤（刻み目をつけたり、コーティングされた錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、粉末包装剤、ウェーファー剤、注射用溶液剤もしくは懸濁剤、ティースプーン量剤（ｔｅａｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）、テーブルスプーン量剤（ｔａｂｌｅｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）等、およびそれらの分割された集合物である。]
[0079] 本明細書で使用する用語「処置」は、動物、特にヒトにおける疾患および／または状態の任意の処置に関し、そして（ｉ）疾患および／または状態にかかり易いがまだそれを有すると診断されてない患者において、疾患および／または状態が発生することを防止する；（ｉｉ）疾患および／または状態を抑制する、すなわちその進行を止める；（ｉｉｉ）疾患および／または状態を軽減する、すなわち疾患および／または状態の退化を惹起することを含む。好ましくは用語「処置」は（ｉｉ）または（ｉｉｉ）を意味する。]
[0080] 本発明は、有効量の本発明の化合物をそのような処置が必要な個体、例えば哺乳動物（そしてさらに特別にはヒト）に投与することにより、形質転換した細胞を含む細胞の異常な成長を阻害する方法を提供する。細胞の異常な成長とは、正常な調節メカニズムに依存しない細胞の成長を指す（例えば接触阻害の喪失）。これには腫瘍細胞の成長を成長の静止、最終分化および／または癌細胞のアポトーシスを引き起こすことにより直接的に、そして腫瘍の新血管形成を阻害することにより間接的に両方で阻害することを含む。]
[0081] 本発明の化合物、組成物および方法は、壊死またはアポトーシスによる細胞死または傷害から生じる組織損傷を処置または防止するために特に有用である。]
[0082] 本発明の化合物は「抗癌剤」であることもでき、この用語は「抗腫瘍細胞増殖剤」および「抗新生物形成剤」も包含する。]
[0083] また本発明は、有効量の本発明の化合物を処置が必要な個体、例えば哺乳動物（そしてさらに特別にはヒト）に投与することにより、腫瘍の増殖を阻害する方法を提供する。]
[0084] また本発明は腫瘍の増殖を阻害するための薬剤の製造に、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。]
[0085] 本発明の化合物により抑制され得る腫瘍の例には、成人および小児の腫瘍を含み、限定するわけではないが小細胞肺癌および非小細胞肺癌を含む肺癌（例えば腺癌）、膵臓癌（例えば膵外分泌癌のような膵臓癌腫）、結腸癌（例えば結腸腺癌および結腸腺腫のような結腸直腸癌）、食道癌、口腔偏平上皮癌、舌癌、胃癌、肝臓癌、鼻咽腔癌、リンパ系統の造血系腫瘍（例えば急性リンパ性白血病、Ｂ−細胞白血病、バーキットリンパ腫）、非ホジキンリンパ腫（例えばマントル細胞リンパ腫）、ホジキン病、骨髄性白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ））、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性甲状腺癌、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、間葉系起源の癌、柔組織肉腫、脂肪肉腫、消化管間質肉腫、悪性末梢神経鞘腫瘍（ＭＰＮＳＴ）、ユーイング肉腫、平滑筋肉腫、間葉軟骨肉腫、リンパ肉腫、繊維肉腫、横紋筋肉
腫、メラノーマ、奇形癌腫、神経芽腫、脳腫瘍、髄芽腫、神経膠腫、皮膚の良性腫瘍（例えばケラトアカントーマ）、乳癌（例えば進行した乳癌）、腎臓癌、腎芽細胞腫、卵巣癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、膀胱癌、進行した疾患およびホルモン難治性前立腺癌を含む前立腺癌、精巣癌、骨肉腫、頭頸部癌、上皮癌、多発性骨髄腫（例えば難治性の多発性骨髄腫）、中皮腫がある。本発明の化合物で処置できる特定の癌は、乳癌、結腸直腸癌、非小細胞肺癌、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。]
[0086] 本発明の別の観点として、特に医薬、より具体的には癌または関連する疾患の処置に使用するための式（Ｉ）のチューブリン結合特性を有する化合物と、別の抗癌剤との組み合わせ物が想定される。]
[0087] 前記状態の処置には、本発明の化合物は１もしくは複数の他の医薬、より詳細には他の抗癌剤または癌治療における補助剤と組み合わせて有利に用いることができる。抗癌剤または補助剤（治療における支持剤：ｓｕｐｐｏｒｔｉｎｇ ａｇｅｎｔ）の例は、限定するわけではないが：
−白金配位化合物、例えば場合によりアミホスチン（ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）、カルボプラチンまたはオキサリプラチン（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ）と組み合わせたシスプラチン；
−タキサン化合物、例えばパクリタキセル、パクリタキセルタンパク質結合粒子（Ａｂｒａｘａｎｅ（商品名））またはドセタキセル；
−トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えばカンプトテシン化合物、例えばイリノテカン、ＳＮ−３８、トポテカン、トポテカンｈｃｌ；
−トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば抗腫瘍性エピポドフィロトキシンまたはポドフィロトキシン誘導体、例えばエトポシド、リン酸エトポシドまたはテニポシド；
− 抗腫瘍性ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチンまたはビノレルビン；
− 抗腫瘍性ヌクレオシド誘導体、例えば５−フルオロウラシル、ロイコボリン、ゲムシタビン、ゲムシタビンｈｃｌ、カペシタビン、クラドリビン（ｃｌａｄｒｉｂｉｎｅ）、フルダラビン（ｆｌｕｄａｒａｂｉｎｅ）、ネララビン（ｎｅｌａｒａｂｉｎｅ）；
−アルキル化剤、例えばナイトロジェンマスタードまたはニトソロウレア、例えば場合によりメスナ（ｍｅｓｎａ）、ピポブロマン、プロカルバジン、ストレプトゾシン、テロゾロミド（ｔｅｌｏｚｏｌｏｍｉｄｅ）、ウラシルと組み合わせたシクロホスファミド、クロラムブシル、カルムスチン、チオテパ、メファラン（メルファラン）、ロムスチン、アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、ブスルファン、ダカルバジン、エストラムスチン、イフォスファミド（ｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）；
− 抗腫瘍性アントラサイクリン誘導体、例えば場合によりデクスラゾキサン（ｄｅｘｒａｚｏｘａｎｅ）、ドキシル（ｄｏｘｉｌ）、イダルビシン、ミトザントロン、エピルビシン（ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）、エピルビシンｈｃｌ、バルルビシン（ｖａｌｒｕｂｉｃｉｎ）と組み合わせたダウノルビシン、ドキソルビシン；
−ＩＧＦ−１受容体を標的とする分子、例えばピクロポドフィリン（ｐｉｃｒｏｐｏｄｏｐｈｉｌｉｎ）；
−テトラカルシン（ｔｅｔｒａｃａｒｃｉｎ）誘導体、例えばテトラカルシンＡ；
−グルココルチコイデン（ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄｅｎ）、例えばプレドニソン；−抗体、例えばトラスツズマブ（ＨＥＲ２抗体）、リタキシマブ（ＣＤ２０抗体）、ゲムツズマブ（ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ）、ゲムツズマブオゾガマイシン（ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ）、セツキシマブ（ｃｅｔｕｘｉｍａｂ）、ペルツズマブ（ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、ベバシズマブ（ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ）、アレムツズマブ（ａｌｅｍｔｕｚｕｍａｂ）、エクリズマブ（ｅｃｕｌｉｚｕｍａｂ）、イブリツモマブチウキセタン（ｉｂｒｉｔｕｍｏｍａｂ ｔｉｕｘｅｔａｎ）、ノフェツモマブ（ｎｏｆｅｔｕｍｏｍａｂ）、パニツムマブ（ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ）、トシツモマブ（ｔｏｓｉｔｕｍｏｍａｂ）、ＣＮ
ＴＯ３２８；
−エストロゲン受容体拮抗薬または選択的エストロゲン受容体モジュレーター、またはエストロゲン合成の阻害剤、例えばタモキシフェン、フルベストラント（ｆｕｌｖｅｓｔｒａｎｔ）、トレミフェン、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）、ファスロデックス（ｆａｓｌｏｄｅｘ）、ラロキシフェンまたはレトロゾール（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）；
−アロマターゼ阻害剤、例えばエキセメスタン、アナストロゾール、レトラゾール（ｌｅｔｒａｚｏｌｅ）、テストラクトンおよびボロゾール（ｖｏｒｏｚｏｌｅ）；
−分化誘導薬、例えばレチノイド、ビタミンＤまたはレチノイン酸およびレチノイン酸代謝遮断薬（ＲＡＭＢＡ）、例えばアキュタン（ａｃｃｕｔａｎｅ）；
−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばアザシチジンまたはデシタビン（ｄｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；
−葉酸拮抗薬、例えばプレメトレキセド（ｐｒｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）二ナトリウム；
−抗生物質、例えばアンチノマイシン（ａｎｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）Ｄ、ブレオマイシン、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシン、カルミノマイシン（ｃａｒｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、ダウノマイシン、レバミゾール、プリカマイシン（ｐｌｉｃａｍｙｃｉｎ）、ミトラマイシン；
−代謝拮抗物質、例えばクロファラビン（ｃｌｏｆａｒａｂｉｎｅ）、アミノプテリン、シトシンアラビノシドまたはメトトレキセート、アザシチジン、シタラビン、フロクスウリジン、ペントスタチン、チオグアニン；
−アポトーシス誘導剤および血管新生抑制剤、例えばＢｃｌ−２阻害剤、例えばＹＣ１３７、ＢＨ３１２、ＡＢＴ７３７、ゴシポール、ＨＡ１４−１、ＴＷ３７またはデカン酸；−チューブリン−結合剤、例えばコンブレスタチン（ｃｏｍｂｒｅｓｔａｔｉｎ）、コルヒチンまたはノコダゾール（ｎｏｃｏｄａｚｏｌｅ）；
−キナーゼ阻害剤（例えばＥＧＦＲ（上皮増殖因子受容体）阻害剤、ＭＴＫＩ（マルチターゲットキナーゼ阻害剤）、ｍＴＯＲ阻害剤）、例えばフラボペリドール（ｆｌａｖｏｐｅｒｉｄｏｌ）、イマチニブ（ｉｍａｔｉｎｉｂ）メシル酸、エルロチニブ（ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ）、ゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）、ダサチニブ（ｄａｓａｔｉｎｉｂ）、ラパチニブ（ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、二トシル酸ラパチニブ、ソラフェニブ（ｓｏｒａｆｅｎｉｂ）、スニチニブ（ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ）、リンゴ酸スニチニブ、テムシロリムス（ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ）；
−ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばチピファルニブ（ｔｉｐｉｆａｒｎｉｂ）；
−ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、例えば酪酸ナトリウム、サブエロイルアニリドヒドロキサミン酸（ＳＡＨＡ）、デプシペプチド（ＦＲ９０１２２８）、ＮＶＰ−ＬＡＱ８２４、Ｒ３０６４６５、ＪＮＪ−２６４８１５８５、トリコスタチン（ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ）Ａ、ボリノスタット；
−ユビキチン−プロテアソーム経路の阻害剤、例えばＰＳ−３４１、ＭＬＮ．４１またはボルテゾミブ；
− ヨンデリス（Ｙｏｎｄｅｌｉｓ）；
−テロメラーゼ阻害剤、例えばテロメスタチン（ｔｅｌｏｍｅｓｔａｔｉｎ）；
−マトリクスメタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばバチマスタット（ｂａｔｉｍａｓｔａｔ）、マリマスタット（ｍａｒｉｍａｓｔａｔ）、プリノスタット（ｐｒｉｎｏｓｔａｔ）またはメタスタット（ｍｅｔａｓｔａｔ）；
−組換えインターロイキン、例えばアルデスロイキン（ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）、デニロイキンディフィティトックス（ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ ｄｉｆｔｉｔｏｘ）、インターフェロンアルファ２ａ、インターフェロン アルファ２ｂ、ペグインターフェロンアルファ２ｂ；
−ＭＡＰＫ阻害剤；
−レチノイド、例えばアリトレチノイン（ａｌｉｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）、ベキサロテン（
ｂｅｘａｒｏｔｅｎｅ）、トレチノイン（ｔｒｅｔｉｎｏｉｎ）；
−三酸化ヒ素
−アスパラギナーゼ
−ステロイド、例えばプロピオン酸ドロモスタノロン、酢酸メゲストロール、ナンドドロン（デカノエート、フェンプロピオネート）、デキサメタゾン；
−性腺刺激ホルモン放出ホルモン作用薬または拮抗薬、例えばアバレリックス（ａｂａｒｅｌｉｘ）、酢酸ゴセレリン、酢酸ヒストレリン、酢酸ロイプロリド；
−サリドマイド、レナリドミド（ｌｅｎａｌｉｄｏｍｉｄｅ）；
−メルカプトプリン、ミトーテン、パミドロネート、ペガデマーゼ（ｐｅｇａｄｅｍａｓｅ）、ペガスパルガーゼ（ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ）、ラスブリカーゼ（ｒａｓｂｕｒｉｃａｓｅ）；
−ＢＨ３ミメティックス、例えばＡＢＴ−７３７；
−ＭＥＫ阻害剤、例えばＰＤ９８０５９、ＡＺＤ６２４４、ＣＩ−１０４０；
−コロニー刺激因子類似体、例えばフィルグラスチム（ｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、ペグフィルグラスチム（ｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、サルグラモスチム（ｓａｒｇｒａｍｏｓｔｉｍ）、エリスロポエチンまたはそれらの類似体（例えばダルベポエチン（ｄａｒｂｅｐｏｅｔｉｎ）アルファ）；インターロイキン１１；オプレルベキン（ｏｐｒｅｌｖｅｋｉｎ）；ゾレドロネート（ｚｏｌｅｄｒｏｎａｔｅ）、ゾレドロン酸（ｚｏｌｅｄｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）；フェンタニル；ビスホスホネート；パリフェルミン（ｐａｌｉｆｅｒｍｉｎ）である。]
[0088] 用語「白金配位化合物」は本明細書では、イオンの形態の白金を提供する任意の腫瘍細胞成長阻害白金配位化合物を表すために使用される。白金配位化合物は、処置の過程で１〜５００ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０〜４００ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特にシスプラチンに関しては約７５ｍｇ／ｍ２の投与用量で、そしてカルボプラチンに関しては約３００ｍｇ／ｍ２で有利に投与される。]
[0089] 用語［タキサン化合物］はタキサン環系を有し、特定の種のイチイの木（Ｔａｘｕｓ）からの抽出物に関連するか、またはそれから誘導される化合物の一クラスを示す。タキサン化合物は、処置の過程で５０〜４００ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば７５〜２５０ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特にパクリタキセルに関しては約１７５〜２５０ｍｇ／ｍ２の投与用量で、そしてドセタキセルに関しては約７５〜１５０ｍｇ／ｍ２で有利に投与される。]
[0090] 用語「トポイソメラーゼ阻害剤」は、真核細胞中のＤＮＡ位相を変えることができる酵素を示すために使用される。それらは重要な細胞機能および細胞増殖に必須である。真核細胞には２種のトポイソメラーゼ、すなわちＩ型およびＩＩ型がある。トポイソメラーゼＩは約１００，０００の分子量のモノマー酵素である。この酵素はＤＮＡに結合し、そして一時的な単鎖分解を誘発し、二重らせんを解き（または解かせ）、引き続いてＤＮＡ鎖から解離する前にその分解を再シールする。トポイソメラーゼＩＩはＤＮＡ鎖分解物の導入または遊離ラジカルの形成に関与する、同様な作用機序を有する。]
[0091] 用語「カンプトテシン化合物」は中国の木のカンプトテシンアクミナタ（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ ａｃｕｍｉｎａｔａ）およびインドの木のノタポヂテフェチダ（Ｎｏｔｈａｐｏｄｙｔｅｓ ｆｏｅｔｉｄａ）に由来する非水溶性アルカロイドである親カンプトテシン化合物に関連するか、またはそれから誘導される化合物を表すために使用される。カンプトテシン化合物は、処置の過程で０．１〜４００ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば１〜３００ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特にイリノテカンに関しては約１００〜３５０ｍｇ／ｍ２の投与用量で、そしてトポテカンに関しては約１〜２ｍｇ／ｍ２で有利に投与される。]
[0092] 用語［ポドフィロトキシン誘導体］はマンドレークの植物から抽出される、親ポドフィロトキシンに関連するか、またはそれから誘導される化合物を示すために使用される。抗腫瘍ポドフィロトキシン誘導体は、処置の過程で３０〜３００ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０〜２５０ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特にエトポシドに関しては約３５〜１００ｍｇ／ｍ２の投与用量で、そしてテニポシドに関しては約５０〜２５０ｍｇ／ｍ２で有利に投与される。]
[0093] 用語「抗腫瘍ビンカアルカロイド」はツルニチソウ（Ｖｉｎｃａ ｒｏｓｅａ）の抽出物に関連するか、またはそれから誘導される化合物を示すために使用される。抗腫瘍ビンカアルカロイドは、処置の過程で２〜３０ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）の投薬用量で有利に投与され、特にビンブラスチンに関しては約３〜１２ｍｇ／ｍ２の投与用量で、ビンクリスチンに関しては約１〜２ｍｇ／ｍ２の投薬用量で、そしてビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）に関しては約１０〜３０ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与される。]
[0094] 抗腫瘍ヌクレオシド誘導体は、処置の過程で２００〜２５００ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば７００〜１５００ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特に５−ＦＵに関しては２００〜５００ｍｇ／ｍ２の投与用量で、ゲムシタビンに関しては約８００〜１２００ｍｇ／ｍ２の投薬用量で、そしてカペシタビンに関しては約１０００〜２５００ｍｇ／ｍ２で有利に投与される。]
[0095] 用語「アルキル化剤」は生理学的条件下で、ＤＮＡのような生物学的に必須の高分子にアルキル基を与える能力を有するという共通の特徴をもつ広範な化学物質の群を包含する。大部分はナイトロジェンマスタードおよびニトロソ尿素のような、より重要な物質では、活性なアルキル化部分は、複雑な分解反応（その幾つかは酵素による）後にインビボで生成される。アルキル化剤の最も重要な薬理学的作用は、細胞増殖、とりわけＤＮＡ合成および細胞分裂に関与する基本的メカニズムを乱すものである。急速に増殖している組織中のＤＮＡ機能および完全性を阻害するアルキル化剤の能力が、それらの治療的応用および多数のそれらの毒性の基礎を提供する。ナイトロジェンマスタードまたニトロウレアのようなアルキル化剤は、処置の過程で１００〜５００ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば１２０〜２００ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特にシクロホスファミドに関しては約１００〜５００ｍｇ／ｍ２の投与用量で、クロラムブシルに関しては約０．１〜０．２ｍｇ／ｍ２の投薬用量で、カルムスチンに関しては約１５０〜２００ｍｇ／ｍ２の投薬用量で、そしてロムスチンに関しては約１００〜１５０ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与される。]
[0096] 用語「抗腫瘍アントラサイクリン誘導体」は、グリコシド結合により結合された稀有な糖のダウノスアミンをもつテトラサイクリン環構造を有することを特徴とする、カビ真菌のＳｔｒｅｐ．ｐｅｕｔｉｃｕｓ ｖａｒ．ｃａｅｓｉｕｓから得られる抗生物質およびそれらの誘導体を含んでなる。抗腫瘍アントラサイクリン誘導体は、処置の過程で１０〜７５ｍｇ／体表面積の平方メートル（ｍｇ／ｍ２）、例えば１５〜６０ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与され、特にドキソルビシンに関しては約４０〜７５ｍｇ／ｍ２の投与用量で、ダウノルビシンに関しては約２５〜４５ｍｇ／ｍ２の投薬用量で、そしてイダルビシンに関しては約１０〜１５０ｍｇ／ｍ２の投薬用量で有利に投与される。]
[0097] 原発性乳癌におけるヒト上皮増殖因子受容体２タンパク質（ＨＥＲ２）の増幅は、特定の患者について良くない臨床予後と関連することが示された。トラストズマブはＨＥＲ２受容体の細胞外ドメインに高い親和性および特異性で結合する、高度に精製された組み換えＤＮＡ由来ヒト化モノクローナルＩｇＧ１カッパ抗体である。]
[0098] 多数の乳癌はエストロゲン受容体を有し、そしてこれらの腫瘍の成長はエストロゲンにより刺激され得る。用語「エストロゲン受容体アンタゴニスト」および「選択的エストロゲン受容体モジュレーター」は、エストロゲン受容体（ＥＲ）に結合するエストラジオールの競合的阻害剤を示すために使用される。選択的エストロゲン受容体モジュレーターはＥＲに結合すると、受容体の三次元形態に変化を誘発し、ＤＮＡ上のエストロゲン反応性要素（ＥＲＥ）に対するその結合をモジュレートする。]
[0099] 閉経後の女性においては、循環エストロゲンの主要な生成源は、末梢組織におけるアロマターゼ酵素による、副腎および卵巣のアンドロゲン（アンドロステンジオンおよびテストステロン）のエストロゲン（エストロンおよびエストラジオール）への転化からである。アロマターゼ阻害または不活性化を介するエストロゲンの剥奪はホルモン依存性乳癌をもつ何人かの閉経後患者に対して有効な選択的処置である。]
[0100] 用語「分化剤」は種々の方法で、細胞増殖を阻害し、そして分化を誘発することができる化合物を包含する。ビタミンＤおよびレチノイドは、広範な正常および悪性の細胞型の成長および分化の調節に重要な役割を果たすことが知られている。レチノイン酸代謝遮断剤（ＲＡＭＢＡ）は、レチノイン酸のチトクロームＰ４５０−媒介異化作用を阻害することにより内在レチノイン酸のレベルを増加する。]
[0101] ＤＮＡメチル化の変化はヒト新生物における最も一般的な異常の１つである。選択される遺伝子のプロモーター内のメチル化亢進（ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ）は通常、関与する遺伝子の不活性化を伴なう。用語「ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤」は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼの薬理学的阻害および腫瘍サプレッサーの遺伝子発現の再活性化を介して作用する化合物を示すために使用される。]
[0102] 用語「キナーゼ阻害剤」は細胞周期の進行およびプログラムされた細胞死（アポトーシス）に関与するキナーゼの強力な阻害剤を含んでなる。]
[0103] 用語「ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤」はＲａｓおよび他の細胞内タンパク質のファルネシル化を抑制するように設計された化合物を示すために使用される。それらは悪性細胞の増殖および生存に影響を及ぼすことが示されている。]
[0104] 用語「ヒストンデアセチラーゼ阻害剤」または「ヒストンデアセチラーゼの阻害剤」は、ヒストンデアセチラーゼと相互作用し、そしてその活性を阻害する、より詳細にはその酵素活性を阻害することができる化合物を同定するために使用する。ヒストンデアセチラーゼの酵素活性を阻害することとは、ヒストンデアセチラーゼがヒストンからアセチル基を除去する能力を減じることを意味する。]
[0105] 用語「ユビキチン−プロテアソーム経路の他の阻害剤」とは、細胞周期調節タンパク質を含むプロテアソーム中の細胞性タンパク質の標的化された破壊を阻害する化合物を同定するために使用する。]
[0106] 用語「テロメラーゼ阻害剤」とは、テロメラーゼの活性を標的とし、減少させ、または阻害する化合物、特にテロメラーゼ受容体を阻害する化合物を指す。]
[0107] 用語「マトリックスメタロプロテアーゼ阻害剤」とは、限定するわけではないが、コラーゲンペプチドミメティックおよび非ペプチドミメティック阻害剤を含む。]
[0108] また本発明は、例えば腫瘍細胞の増殖を阻害するために医学的治療で使用する本発明の
組み合わせ物に関する。]
[0109] また本発明は、腫瘍細胞の増殖を阻害するための本発明の組み合わせ物に関する。]
[0110] また本発明は、ヒト個体における腫瘍細胞の増殖を阻害する方法に関し、この方法は個体に有効量の本発明の組み合わせ物を投与することを含んでなる。]
[0111] さらに本発明は、有効量の本発明の組み合わせ物を投与することにより、形質転換した細胞を含む細胞の異常な増殖を阻害する方法を提供する。]
[0112] 他の医薬およびチューブリン結合特性を有する式（Ｉ）の化合物とを、同時に（例えば別個に、または単一の組成物で）、またはいずれかの順序で順次に投与してもよい。後者の場合、２つの化合物は有利なまたは相乗効果が確実に達成されるために十分な一定の期間内に、そして一定の量および様式で投与される。組み合わせ物の各化合物について、好適な投与の方法および順序、および個々の投薬用量および計画は、投与する特定の他の医薬およびチューブリン結合特性を有する式（Ｉ）の化合物、それらの投与経路、処置する特定の腫瘍および処置する特定の宿主に依存すると考えられる。投与の最適な方法および順序および投薬用量および計画は、常法を使用して、そして本明細書に説明する情報の観点から当業者が容易に決定できる。]
[0113] 当業者は、これ以降に提示される試験結果から有効量を容易に決定できるであろう。一般に、有効量は０．００１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、そして特に０．００５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であると考えられる。必要な用量は、１日を通して適当な間隔で２、３、４またはそれ以上の副用量として投与することが適当であるかもしれない。該副用量は、例えば単位剤形あたり０．０５〜５００ｍｇ、そして特に０．１ｍｇ〜２００ｍｇの有効成分を含有する単位剤形として調合することができる。]
[0114] 投与の正確な用量および頻度は、使用する特定の式（Ｉ）の化合物、処置する特定の状態、処置する状態の重篤度、特定患者の年齢、体重、性別、障害の程度および全般的な身体条件、ならびに当業者に周知であるような個体が摂取できる他の投薬法に依存する。さらにそのような毎日の有効量は、処置する個体の応答に依存して、かつ／または本発明の化合物を処方する医師の評価に依存して減少または増加させることができることは明白である。]
[0115] 投与様式に依存して、製薬学的組成物は好ましくは０．０５〜９９重量％、より好ましくは０．１〜７０重量％、さらにより好ましくは０．１〜５０重量％の有効成分、および１〜９９．９５重量％、より好ましくは３０〜９９．９重量％、さらにより好ましくは５０〜９９．９重量％の製薬学的に許容され得る担体を含んでなる（すべてのパーセンテージは組成物の総重量に基づく）。]
[0116] 以下の実施例は本発明を具体的に説明する。]
[0117] 実験の部
今後、“ＢｕＬｉ”はｎ−ブチル−リチウムと定義し、“ＤＣＭ”はジクロロメタンと定義し、“ＤＩＰＥ”はジイソプロピルエーテルと定義し、“Ｅｔ２Ｏ”はジエチルエーテルと定義し、“ＤＭＳＯ”はジメチルスルフォキシドと定義し、“ＥｔＯＡｃ”は酢酸エチルと定義し、“ＥｔＯＨ”はエタノールと定義し、“ＭｅＯＨ”はメタノールと定義し、“ＴＦＡ”はトリフルオロ酢酸と定義し、そして“ＴＨＦ”はテトラヒドロフランと定義する。]
[0118] １つのキラル中心を有する化合物の幾つかは、その中のステレオジェン炭素原子の絶対立体化学的配置を実験的に決定しなかった。このような場合、さらに実際の立体化学的配置を参照することなく最初に単離された立体化学的異性体を「エナンチオマーＡ」と、そして２番目に単離されたものを「エナンチオマーＢ」と命名した。しかし「エナンチオマーＡ」および「エナンチオマーＢ」形のその実際の立体化学的配置は、例えばＸ線回折のような技術的に周知な方法を使用して当業者により明白に特性決定されることができる。単離法を以下に詳細に記載する。]
[0119] ２個のキラル中心を有する化合物の幾つかは、その中のステレオジェン炭素原子の絶対立体化学的配置を実験的に決定しなかった。このような場合、実際の立体化学的配置を参照することなく最初に単離された２つのエナンチオマーの混合物（例えばＲ，Ｒ−エナンチオマーおよびＳ，Ｓ−エナンチオマーの混合物、またはＲ，Ｓ−エナンチオマーおよびＳ，Ｒ−エナンチオマーの混合物）を“ｄｉａＡ”と、そして２番目に単離されたものを“ｄｉａＢ”と命名した。しかし“ｄｉａＡ”および“ｄｉａＢ”形のその実際の立体化学的配置は、例えば最初に混合物を構成しているエナンチオマーに分離し、次いで例えばＸ線回折でのようなエナンチオマーの立体配置を定めることにより、技術的に周知な方法を使用して当業者により明白に特性決定されることができる。単離法を以下に詳細に記載する。]
[0120] Ａ．中間体化合物の調製
実施例Ａ１
ａ）中間体１の調製]
[0121] ]
[0122] ４−ブロモ−１−（ブロモメチル）−２−ニトロ−ベンゼン（０．２３１モル）の溶液（１８６ｍｌのＭｅＯＨ中）を、５℃で７０％エタンアミン（Ｈ２Ｏ中の１．１５５モル）溶液（９３ｍｌのＭｅＯＨ中）に滴下した。混合物を１時間還流し、溶媒を蒸発させ、そして残渣を水に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（６８ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９８／２）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて３０ｇ（５０％）の中間体１が得られた。ｂ）中間体２の調製]
[0123] ]
[0124] 酸化白金（０．００８モル）、次いで酢酸亜鉛水和物（０．１１０モル）を、室温で中間体１（０．０５７モル）の溶液（２００ｍｌのＭｅＯＨ中）にＮ２流下で加えた。混合物を一晩、２バールの圧下で水素化し、そしてセライトで濾過した。セライトをＭｅＯＨで洗浄した。濾液を蒸発乾固し、粗生成物をＥｔＯＡｃに溶解し、水に注ぎ、そして炭酸カリウムで塩基性とした。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒
を蒸発させて１３．２ｇ（１００％）の中間体２が得られた。
ｃ）中間体３の調製]
[0125] ]
[0126] 中間体２（０．０５７モル）およびジ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル−メタノン（０．０６９モル）の混合物（２００ｍｌのＴＨＦ中）を、撹拌そして３時間還流し、冷水に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＣＨ３ＣＮ／ＤＣＭで洗浄した。沈殿を濾過し、そして乾燥して１１．２０ｇ（７６％）の中間体３が得られた。
ｄ）中間体４の調製]
[0127] ]
[0128] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、７．６ｍｌ、０．０１２１モル）を、−７８℃で中間体３の溶液（０．００５５モル）（１５ｍｌのＴＨＦ中）にＮ２流下で滴下した。混合物を−７８℃で１時間撹拌した。Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−アセトアミド（０．００８２３モル）の溶液（４ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で１時間撹拌し、次いで室温で４時間撹拌し、水に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（２．４ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ ５０／５０）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＤＩＰＥから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥して０．３６０ｇ（３０％）の中間体４（融点１９０℃）が得られた。
ｅ）中間体５の調製]
[0129] ]
[0130] ２−メチル−２−プロパノール、カリウム塩（０．００７６モル）を、１５℃で１−［（イソシアノメチル）スルホニル］−４−メチル−ベンゼン（０．００１６モル）の溶液（４ｍｌのＤＭＳＯ中）に、Ｎ２流下で数部に分けて加えた。ＭｅＯＨ（０．４ｍｌ）を滴下した。混合物を１５分間撹拌した。中間体４（０．００１６モル）を滴下した。混合物を４５分間撹拌し、水に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌで洗浄した、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．７ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９８／２）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．３３３ｇ（８８％）の中間体５（融点１１９℃）が得られた。]
[0131] 実施例Ａ２
ａ）中間体６の調製]
[0132] ]
[0133] ４−ブロモ−１−（ブロモメチル）−２−ニトロ−ベンゼン（０．０３７モル）の溶液（２６ｍｌのＭｅＯＨ中）を、５℃で４０％メタンアミン（Ｈ２Ｏ中の０．１８６モル）溶液（１３ｍｌのＭｅＯＨ中）に滴下した。混合物を１時間還流し、溶媒を蒸発させ、そし残渣を水に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９６／４）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて３ｇ（３３％）の中間体６が得られた。
ｂ）中間体７の調製]
[0134] ]
[0135] 酸化白金（０．００２２モル）、次いで酢酸亜鉛水和物（０．０２８５モル）を、室温で中間体６（０．０１５モル）の溶液（６００ｍｌのＭｅＯＨ中）にＮ２流下で加えた。混合物を一晩、２バールの圧下で水素化し、次いでセライトで濾過した。セライトをＤＣＭで洗浄した。濾液を蒸発乾固し、粗生成物をＤＣＭに溶解し、水に注ぎ、そして炭酸カリウムで塩基性とした。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させて３ｇ（９５％）の中間体７が得られた。
ｃ）中間体８ａの調製]
[0136] ]
[0137] 中間体７（０．０１４モル）およびジ−１Ｈ−イミダゾール−１−イル−メタノン（０．０１７４モル）の混合物（４０ｍｌのＴＨＦ中）を、撹拌そして３時間還流し、冷水に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣を結晶化し、沈殿を濾過し、そして乾燥して３ｇ（７０％）の中間体８ａが得られた。
ｄ）中間体８ｂの調製]
[0138] ]
[0139] 水素化ナトリウム（油中の６０％、０．０１３６モル）を、５℃で中間体８ａの溶液（３０ｍｌのＴＨＦ中）にＮ２流下で数部に分けて加えた。混合物を５℃で１時間撹拌し、水に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＤＩＰＥで結晶化し、沈殿を濾過し、そして乾燥して１．２ｇ（５５％）の中間体８ｂが得られた。
ｅ）中間体８ｃの調製]
[0140] ]
[0141] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、６．８５ｍｌ、０．０１０９モル）を、−７８℃で中間体８ｂの溶液（０．００５０モル）（１５ｍｌのＴＨＦ中）にＮ２流下で滴下した。混合物を−７８℃で１時間撹拌した。Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−アセトアミド（０．００７５モル）の溶液を加えた。混合物を−７０℃で１時間撹拌し、次いで室温で１５時間撹拌し、水に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（２ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９６／４）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．２７４ｇ（２７％）の中間体８ｃが得られた。
ｆ）中間体８ｄの調製]
[0142] ]
[0143] ２−メチル−２−プロパノール、カリウム塩（０．００６１モル）を、１５℃で１−［（イソシアノメチル）スルホニル］−４−メチル−ベンゼン（０．００３１モル）の溶液（３ｍｌのＤＭＳＯ中）に、Ｎ２流下で数部に分けて加えた。ＭｅＯＨ（０．３ｍｌ）を滴下した。混合物を１５分間撹拌した。中間体８ｃ（０．００１３４モル）を数部に分けて加えた。混合物を２０分間撹拌し、水に注ぎ、そしてＤＣＭで抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．７ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ ９６／４）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．１１７ｇ（４１％）の中間体８ｄが得られた。
ｇ）中間体９の調製]
[0144] ]
[0145] ＢｕＬｉ（０．０８０モル；５０ｍｌ、ヘキサン中１．６Ｍ）を、−７８℃で中間体３（０．０２０モル）の混合物（２４ｍｌの無水ＴＨＦ中）に窒素流下で滴下した。混合物を−７８℃で４５分間撹拌した。Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−プロパンアミド（０．１００モル）の溶液（１ｍｌの無水ＴＨＦ中）を滴下し、そして生じた反応混合物を−７０℃で２時間撹拌し、次いで室温に暖めた。混合物を室温で一晩撹拌した。水を加え、そして混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固させた。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：石油エーテル／ＥｔＯＡｃ ４：１）。生成物画分を集め、そして溶媒を蒸発させて１．１ｇ（２３％）の中間体９が得られた。
ｈ）中間体１０の調製]
[0146] ]
[0147] １−［（イソシアノメチル）スルホニル］−４−メチル−ベンゼン（０．０１１１４モル）の溶液（１２ｍｌのＤＭＳＯ中）に、窒素下１０℃で、２−メチル−２−プロパノール、カリウム塩（０．０２２３モル）およびＭｅＯＨ（１．２ｍｌ）を加えた。混合物を１０℃で１５分間撹拌し、次いで中間体９（０．００４７４モル）を数部に分けて加えた。反応混合物を１０℃で４５分間撹拌し、次いで氷水に注ぎ、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして濾液の溶媒を蒸発させた。残渣を調製用ＴＬＣにより精製した（溶出液：ＥｔＯＡｃ／石油＝１：１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．６ｇ（５２％）の中間体１０が得られた。]
[0148] 実施例Ａ３
ａ）中間体１１の調製]
[0149] ]
[0150] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、０．００４７９８モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００４７９８モル）の混合物（４ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、そして−７０℃に冷却した。中間体５（０．００２１８１モル）の溶液（８ｍｌのＴＨＦ中）を−７０℃で滴下し、そして１時間にわたり撹拌した。ジブロモメタン（０．００２８３５モル）の溶液を−７０℃で滴下し、そして１時間にわたり−７０℃で、そして１時間０℃で撹拌した。反応混合物を氷水に注ぎ、そ
してＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（１５／４０μｍ）のカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ１００からＤＣＭ９８／ＭｅＯＨ ２）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．５５６ｇ）をＥｔ２Ｏ／ＤＩＰＥから結晶化し、濾過し、そして真空下で乾燥して０．５００ｇ（７１％）の中間体１１（融点１６０℃）が得られた。
ｂ）中間体１２の調製]
[0151] ]
[0152] 中間体１１（０．００１２４１モル）、カリウムフタルイミド（０．００１８６２モル）の溶液（１０ｍｌのＮ−ジメチルホルムアミド中）を、電子レンジで１５０℃にて４５分間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、そして氷水に注いだ。ＥｔＯＡｃを加え、そして有機層を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＥｔ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮからトリチュレートし、濾過し、そして真空下で乾燥して０．３８０ｇ（５５％）の中間体１２（融点２０８℃）が得られた。
ｂ）中間体１３の調製]
[0153] ]
[0154] ヒドラジン一水和物（０．００９７８３モル）を、中間体１２（０．０００９７８モル）の溶液（２０ｍｌのＥｔＯＨ中）に室温で滴下した。混合物を４時間にわたり、８０℃に加熱した。反応混合物を室温に冷却し、そして沈殿を濾過し、そして濾液を氷水に注ぎ、次いでＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。生成物をＥｔ２Ｏから結晶化し、濾過し、そして真空下で乾燥して０．１８０ｇ（７１％）の中間体１３が得られた。]
[0155] 実施例Ａ４
中間体１４の調製]
[0156] ]
[0157] ジブロモトリフェニル−ホスホラン（０．００４モル）を、４−クロロ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｂ］ピリジン−７−オール（０．００２モル）の溶液（６ｍｌのアセトニトリル中）に加えた。混合物を３時間撹拌し、１０％炭酸カリウムでクエン
チし、そしてＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発乾固させた。残渣（１．６ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）のカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液ＤＣＭ１００）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発乾固させて０．３１ｇ（６７％）の中間体１４が得られた。]
[0158] Ｂ．最終化合物の調製
実施例Ｂ１
化合物１の調製]
[0159] ]
[0160] ＢｕＬｉ（０．００４８モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００４８モル）の混合物（６ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２流下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、−７０℃に冷却した。中間体５（０．００２２モル）の溶液（３ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で４５分間撹拌した。２−（クロロメチル）−４，６−ジメトキシ−ピリミジン（０．００３３モル）を加えた。混合物を−７０℃で２時間、そして１０℃で２時間撹拌した。水を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（１．２４ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）のカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：トルエン／イソプロパノール／ＮＨ４ＯＨ ９７／３／０．１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。ラセミ混合物（０．５ｇ、６０％）をキラル相のカラムクロマトグラフィーにより２つのエナンチオマーに分割した（溶出液：ＭｅＯＨ １００％）。２つの画分を集め、そして溶媒を蒸発させて、０．２６ｇのＦ１および０．２２ｇのＦ２が得られた。Ｆ２はＤＩＰＥから結晶化した。沈殿を濾過し、そして真空下で乾燥して、０．１ｇ（１２％）の化合物１（エナンチオマーＢ）、融点９５℃、［α］Ｄ２０＝＋２８．９７（ＤＭＦ；ｃ＝０．３２）が得られた。]
[0161] 実施例Ｂ２
化合物２の調製]
[0162] ]
[0163] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、０．００２９５モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００２９５モル）の混合物（２ｍｌのＴＨＦ中）に滴下し、窒素流下にて−２０℃で撹拌した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、そして−７０℃に冷却した。中間体１０（０．００１２３モル）の溶液（２ｍｌのＴＨＦ中）を滴下し、そして生じた混合物を−７０℃で４５分間撹拌した。３−（ブロモメチル）−ベンゾニトリル（０．００１８５モル）の溶液（１ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。生じた反応混合物を−７０℃で２時間撹拌し、
そして室温に暖めた。水を加え、そして混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして濾液の溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ））。純粋な画分を集め、そして１０ｍｌの１０％炭酸ナトリウム水溶液を加えた。生じた混合物をＤＣＭで抽出した。分離した有機層を水で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、そして濾過した。所望の生成物は凍結乾燥により白色粉末として得られ、０．０６ｇ（１５％）の化合物２が得られた。]
[0164] 実施例Ｂ３
化合物３および４の調製]
[0165] ]
[0166] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、０．０２４モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００２４モル）の溶液（２０ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２流下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、次いで−７０℃に冷却した。中間体５（０．０１モル）の溶液（１０ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で４５分間撹拌した。（ブロモメチル）−ベンゼン（０．０１６３モル）の溶液（５ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で２時間撹拌し、次いで１０℃で２時間撹拌した。水を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（４．２６ｇ）をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９９／１／０．１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。ラセミ混合物（２．６ｇ、７５％）をキラルクロマトグラフィーにより分割した（溶出液：ＭｅＯＨ １００）。２つの画分を集め、そして溶媒を蒸発させて、１．１ｇのＦ１および１．１ｇのＦ２が得られた。Ｆ１はＤＩＰＥから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥して、０．７８ｇ（２２％）の化合物３（エナンチオマーＡ）、融点１２４℃、［α］Ｄ２０＝＋８９．２（ＤＭＦ；ｃ＝０．２８）が得られた。Ｆ２はＤＩＰＥ／イソプロパノールから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥して０．７９８ｇ（２３％）の化合物４（エナンチオマーＢ）、融点１２４℃、［α］Ｄ２０＝−９６．０５（ＤＭＦ；ｃ＝０．２９）が得られた。]
[0167] 実施例Ｂ４
化合物５および６の調製]
[0168] ]
[0169] ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、０．０１９２モル）を、−２０℃でジイソプロピルアミン（０．０１９２モル）の溶液（２０ｍｌのＴＨＦ中）にＮ２流下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、次いで−７０℃に冷却した。中間体５（０．００８７モル）の溶液（１５ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で４５分間撹拌した。３−（ブロモメチル）−ベンゾニトリル（０．０１３モル）を加えた。混合物を−７０℃で２時間撹拌し、次いで１０℃で２時間撹拌した。水を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（４．２ｇ）をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９８／２／０．１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。ラセミ混合物（１．４ｇ、４７％）をキラル相のカラムクロマトグラフィーにより分割した（溶出液：ＭｅＯＨ １００）。２つの画分を集め、そして溶媒を蒸発させて、０．６５ｇのＦ１および０．６５ｇのＦ２が得られた。Ｆ１はジエチルエーテルから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥して、０．５６ｇ（１８．６％）の化合物５（エナンチオマーＡ）、融点１５２℃、［α］Ｄ２０＝＋８８．９２（ＤＭＦ；ｃ＝０．３２）が得られた。Ｆ２はジエチルエーテルから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥して０．５１ｇ（１７％）の化合物６（エナンチオマーＢ）、融点１５２℃、［α］Ｄ２０＝−９３．６２（ＤＭＦ；ｃ＝０．２８）が得られた。]
[0170] 実施例Ｂ５
化合物７の調製]
[0171] ]
[0172] ＢｕＬｉ（０．００１１９モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００１１９モル）の混合物（２ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２流下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、−７０℃に冷却した。中間体８ｄ（０．０００５４モル）の溶液（２ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で４５分間撹拌した。ブロモメチル−ベンゼン（０．０００８１５モル）を加えた。混合物を−７０℃で２時間撹拌し、次いで１０℃で２時間撹拌した。水を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．１７ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）のカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ ９９／１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣をＤＩＰＥから結晶化した。沈殿を濾過し、そして乾燥して０．００９ｇ（５％）の化合物７（融点２１０℃）が得られた。]
[0173] 実施例Ｂ６
ａ）化合物８の調製]
[0174] ]
[0175] ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、０．０００９モル）を、ジイソプロピルアミン（０．０００９モル）の溶液（１．５ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２流下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、次いで−７０℃に冷却した。中間体５（０．０００４モル）の溶液（１．５ｍｌのＴＨＦ中）を加えた。混合物を−７０℃で４５分間撹拌した。１−（ブロモメチル）−３−ヨード−ベンゼン（０．０００６モル）を加えた。混合物を−７０℃で２時間撹拌し、次いで１０℃で２時間撹拌した。水を加えた。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．２５ｇ）をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ ９９／１）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．１０４ｇ（５３％）の化合物８（融点８３℃）が得られた。
ｂ）化合物９の調製]
[0176] ]
[0177] 化合物８（０．００２モル）、エチニルトリメチル−シラン（０．００４モル）、ヨウ化銅（０．０００１モル）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（０．０００６モル）およびＮ−エチルエタンアミン（０．００８モル）の混合物（５０ｍｌのＴＨＦ中）を、６０℃で２時間撹拌した。水を加えた。有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製した。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．４５ｇ（５４％）の化合物９が得られた。
ｃ）化合物１０の調製]
[0178] ]
[0179] 炭酸カリウム（０．００３モル）を、化合物９（０．００１モル）の溶液（５０ｍｌの
ＭｅＯＨ中）に加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、そして溶媒を真空下で蒸発させた。残渣を調製用ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィーにより精製した。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．０３ｇ（１０％）の化合物１０（融点８４．４℃−１０２．４℃）が得られた。]
[0180] 実施例Ｂ７
化合物１１の調製]
[0181] ]
[0182] ヨウ化銅（０．０００１モル）を室温で、化合物８（０．０００６モル）、２−プロピン−１−オール（０．００３２モル）およびＮ−エチルエタンアミン（０．０１６モル）の混合物（８ｍｌの乾燥ジオキサン中）にＮ２流下で数部に分けて加えた。混合物を１０分間、Ｎ２流下で撹拌した。ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（０．０００１モル）を数部に分けて加えた。混合物を８０℃で５時間撹拌し、次いで室温に冷却し、そして氷水に注いだ。残渣（０．５９ｇ）をシリカゲル（１５〜４０μｍ）のカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ ９４／６／０．６）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．０９５ｇ（４０％）の化合物１１が得られた。]
[0183] 実施例Ｂ８
化合物１２の調製]
[0184] ]
[0185] 中間体１３（０．０００５０３モル）を、４−シアノベンズアルデヒド（０．０００６０４モル）、酢酸（０．２０ｍｌ）の溶液（４ｍｌの１，２−ジクロロエタン中）に室温でＮ２流下にて数部に分けて加えた。反応混合物を１時間にわたり撹拌し、次いでホウ水素化トリアセトキシナトリウム（０．０００６５４モル）を室温で数部に分けて加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。混合物を氷水に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃを加えた。溶液を炭酸カリウム粉末で塩基性とし、そして有機層を分離し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲル（１５／４０μｍ）のカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＤＣＭ ９７／ＭｅＯＨ ３／ＮＨ４ＯＨ ０．５）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて０．０４５ｇ（２４％）の化合物１２が得られた。]
[0186] 実施例Ｂ９
化合物１３および１４の調製]
[0187] ]
[0188] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、０．００２９８４モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００２９８４モル）の混合物（２ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、次いで−７０℃に冷却した。中間体５（０．００１３５６モル）の溶液（３ｍｌのＴＨＦ中）を−７０℃で滴下し、そして１時間にわたり撹拌した。中間体１４（０．００１７６３モル）の溶液（２ｍｌのＴＨＦ中）を−７０℃で滴下し、そして１時間にわたり−７０℃で、次いで０℃で１時間撹拌した。反応混合物を氷水に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣を超流動体クロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＣＯ２ ９０／ＭｅＯＨ １０／イソプロパノール０．５０）。２つの画分を集め、そして溶媒を蒸発させて、０．０４３ｇ（８％）の化合物１４（ｄｉａＡ）および０．１７０ｇ（３２％）の化合物１３（ｄｉａＢ）が得られた。化合物１３をＥｔ２Ｏから結晶化し、濾過し、真空下５０℃で乾燥して、０．１３５ｇ（２６％）の化合物１３（ｄｉａＢ）（融点２２６℃）が得られた。
＊相対配置]
[0189] 実施例Ｂ１０
化合物１５の調製]
[0190] ]
[0191] ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．６Ｍ、０．００１９１９モル）を、ジイソプロピルアミン（０．００１９１９モル）の混合物（３ｍｌのＴＨＦ中）に−２０℃でＮ２下にて滴下した。混合物を−２０℃で２０分間撹拌し、そして−７０℃に冷却した。中間体５（０．０００８７２モル）の溶液（２ｍｌのＴＨＦ中）を−７０℃で滴下し、そして１時間にわたり、−７０℃で撹拌した。４−（２−ブロモエトキシ）−ベンゾニトリル（０．００１１３４モル）の溶液（２ｍｌのＴＨＦ中）を−７０℃で滴下し、そして１時間にわたり−７０℃で、次いで０℃で１時間撹拌した。反応混合物を氷水に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃを加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣を超流動体クロマトグラフィーにより精製した（溶出液：ＣＯ２ ８８／ＭｅＯＨ １２／２−プロピルアミン０．５）。画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．１０１ｇ）をシリカゲルのカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶出液ＤＣＭ １００からＤＣＭ ９６／ＭｅＯＨ ４／ＮＨ４ＯＨ ０．４）。純粋な画分を集め、そして溶媒を蒸発させて、０．０７８ｇ（２３％）の化合物１５が得られた。]
[0192] 表Ｆ−１は上記実施例の１つに従い調製された化合物を列挙する。]
[0193] ]
[0194] ]
[0195] ]
[0196] 分析の部
ＬＣＭＳ
ＬＣＭＳの一般手順Ａ
ＨＰＬＣ測定は、脱気装置をもつ４台のポンプ（ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ｐｕｍｐ）、オートサンプラー、ダイオード−アレイ検出器（ＤＡＤ）および下記の各方法において指定されるカラムを含んでなる、ＡｌｌｉａｎｃｅＨＴ２７９５（Ｗａｔｅｒｓ）システムを使用して実施され、このカラムは温度３０℃に保持される。カラムからの流液はＭＳ分光計に分配された。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源（ｓｏｕｒｃｅ）を用いて構成された。キャピラリーニードル電圧は３ｋＶであり、そしてソース温度はＬＣＴ装置（Ｗａｔｅｒｓ製のＴｉｍｅ ｏｆ Ｆｌｉｇｈｔ Ｚｓｐｒａｙ（商標）質量分析計）において１００℃に維持された。窒素がネブグライザーガスとして使用された。データの取得は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ−ＯｐｅｎＬｙｎｘデータシステムにより実施された。]
[0197] ＬＣＭＳ一般手順Ｂ
ＬＣ測定は、脱気装置をもつ２台のポンプ、オートサンプラー、ダイオード−アレイ検出器（ＤＡＤ）および下記の各方法において指定されるカラムを含んでなる、ＵＰＬＣ（超性能液体クロマトグラフィー）Ａｃｑｕｉｔｙ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを使用して実
施され、このカラムは温度４０℃に保持される。カラムからの流液はＭＳ検出器にもたらされた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源を用いて構成された。キャピラリーニードル電圧は３ｋＶであり、そしてソース温度はＱｕａｔｔｒｏ（Ｗａｔｅｒｓ製の３連四重極質量分析計）において１３０℃に維持された。窒素がネブグライザーガスとして使用された。データの取得は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムにより実施された。]
[0198] ＬＣＭＳ一般手順Ｃ
ＨＰＬＣ測定は、ポンプ、ダイオード−アレイ検出器（ＤＡＤ）（波長は２２０ｎｍを使用した）、カラムヒーターおよび下記の各方法において指定されるカラムを含んでなる、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００モジュールを使用して実施された。カラムからの流液はＡｇｉｌｅｎｔ ＭＳＤシリーズＧ１９４６ＣおよびＧ１９５６Ａに分配された。ＭＳ検出器はＡＰＩ−ＥＳを用いて構成された（大気圧エレクトロスプレーイオン化）。マススペクトルは１００から１０００を走査することにより得た。キャピラリーニードル電圧は陽イオン化モードには２５００Ｖであり、そして陰イオン化モードには３０００Ｖであった。断片化電圧は５０Ｖであった。乾燥ガス温度は１０リットル／分の流速で３５０℃に維持された。]
[0199] ＬＣＭＳ−手順１
一般手順Ａに加えて：逆相ＨＰＬＣは、Ｘｔｅｒｒａ−ＭＳ Ｃ１８カラム（５μｍ、４．６ｘ１５０ｍｍ）において流速１．０ｍｌ／分により実施された。２つの移動相（移動相Ａ：１００％の７ｍＭ酢酸アンモニウム；移動相Ｂ；１００％アセトニトリル）が使用されて、８５％Ａ、１５％Ｂ（３分間保持）から５分で２０％Ａ、８０％Ｂまでの勾配状態を作動させ、２０％Ａおよび８０％Ｂで６分間保持し、そして３分間初期状態で再平衡化した。２０μｌの注入容量が使用された。コーン電圧は、陽イオン化モードでは２０Ｖ、そして陰イオン化モードでは２０Ｖであった。マススペクトルは、０．０８秒のインタースキャンディレイ（ｉｎｔｅｒｓｃａｎ ｄｅｌａｙ）を使用して、０．８秒で１００から９００までスキャンすることによって得られた。]
[0200] ＬＣＭＳ−手順２
一般手順Ｂに加えて：逆相ＵＰＬＣは、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＢＥＨ（架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド）Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ１００ｍｍ）において流速０．３５ｍｌ／分により実施された。２つの移動相（移動相Ａ：９５％の７ｍＭ酢酸アンモニウム／５％アセトニトリル；移動相Ｂ；１００％アセトニトリル）が使用されて、９０％Ａおよび１０％Ｂ（０．５分間保持）から３．５分で８％Ａおよび９２％Ｂまでの勾配状態を作動させ、２分間保持し、そして０．５分で初期状態に戻し、１．５分間保持した。２μｌの注入容量が使用された。コーン電圧は、陽および陰イオン化モードで２０Ｖであった。マススペクトルは、０．１秒のインタースキャンディレイを使用して、０．２秒で１００から１０００までスキャンすることによって得られた。]
[0201] ＬＣＭＳ−手順３
一般手順Ｃに加えて：逆相ＨＰＬＣは、ＹＭＣ−ＰａｃｋＯＤＳ−ＡＱ、５０ｘ２．０ｍｍ ５μｍカラムを０．８ｍｌ／分の流速で行った。２つの移動相（移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含む水；移動相Ｂ：０．０５％ＴＦＡを含むアセトニトリル）を使用した。最初に１００％Ａが１分間保持された。次いで勾配が４０％Ａおよび６０％Ｂで４分間適用され、２．５分間維持された。２μｌの典型的な注入容量を使用した。オーブン温度は５０℃であった（ＭＳ；極性：正）。]
[0202] ]
[0203] Ｃ．薬理学的実施例
実施例Ｃ．１：α−βチューブリン重合アッセイ
チューブリン重合アッセイは、Ｂｏｎｎｅ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９８５，２６０：２８１９−２５）により最初に記述されたアッセイの適応である。アッセイキットはＣｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ，Ｉｎｃ．（カタログ番号ＢＫ０１１）から購入し、そしてアッセイは次の改変をして供給元により記述されるように行った。アッセイは、３８４ウェルの黒色Ｐｒｏｘｉｐｌａｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｍｅｒ）で実施され、容量はそれに応じて適合された。反応は１０μｌの最終容量で実施された。化合物は、氷上９６ウェルＰＰプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）中の反応混合液の２５μｌに添加され、そしてこの混合液の１０μｌが、Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ Ａｓｃｅｎｔプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で３７℃に予備加温された３８４ウェルＰｒｏｘｉｐｌａｔｅの２並列中に分配された。蛍光測定値は１時間の間１分毎に採られた。各ウェルの最大傾斜が決定され（４連続点を通しての直線回帰）、そして重合が化合物の不在下で観察される重合のパーセンテージとして算出された。化合物は、化合物の不在下で観察される重合に比較して、２０μＭで５０％より高い阻害を示す化合物について、最初に２０μＭ、次いで５μＭの濃度で測定された。結果は、次のように定義されるスコアとして表Ｆ−２で報告される：２０μＭにおいて０〜５０％阻害を示す化合物はスコア１として報告され；５μＭにおいて５０％より高い阻害を示す化合物はスコア３として報告される。スコア２の化合物は、２０μＭにおいて５０％より高い阻害、そして５μＭにおいて５０％未満の阻害を示す化合物として定義される。]
[0204] 実施例Ｃ．２：Ｅｂ１細胞アッセイ
Ｅｂ１コメット（Ｃｏｍｅｔ）アッセイは、間接的な免疫蛍光を使用する、重合中の微小管のプラス末端におけるＥｂ１タンパク質の検出に依存する（Ｍｉｍｏｒｉ−Ｋｉｙｏｓｕｅ，２０００）。解重合または安定化を介する微小管動力学の破壊は、成長する微小管末端からのＥｂ１の非局在化（ｄｅ−ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ）をもたらし、そしてこれが細胞質のフォーカス（ｆｏｃｉ）を含有するＥｂ１の消失によって可視化される。]
[0205] 簡単に説明すると、アメリカンタイプカルチャーコレクションから得られたヒト前立腺癌ＰＣ３細胞が、供給者（ＡＴＣＣ）によって推奨されるＨＡＭ’ｓＦ１２培地で、９６ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ，ｃａｔ．ｎｏ．６５５０９０）にて増殖された。細胞はＤＭＳＯ中に溶解された化合物（０．６％の最終ＤＭＳＯ濃度）により３７℃で１時間処理された。次いで、培養基が吸引によって除去され、そして細胞は冷メタノール（−２０℃）の添加によって固定された。−２０℃で１５分のインキュベーション後、細胞は０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含有するＤＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ）により２回洗浄された。マウスＥｂ１抗体（ＢＤ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ｃａｔ．ｎｏ．６１０５３４）が細胞に添加（１％ＢＳＡを含有するＤＰＢＳ中１／２５０希釈）され、そして室温で一夜インキュベーションされた。続いて、抗体が除去され、そして細胞がＤＰＢＳ、０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００で２回洗浄された。Ａｌｅｘａ４８８蛍光染料（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）に結合された２次ヤギ抗マウス抗体が、ＤＰＢＳ，１％ＢＳＡ中、１／５００希釈で添加され、そして３７℃で１時間インキュベーションされた。細胞はＤＰＢＳ、０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００で２回、次いで０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含有するＤＰＢＳにより洗浄され、そして１／５０００Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ）が添加された。Ｅｂ１フォーカスの可視化に基づく顕微鏡法は、２０Ｘ対物レンズを使用してＩＮ Ｃｅｌｌ Ａｎａｌｙｓｅｒ １０００（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて実施された。化合物に依存する微小管破壊が、Ｅｂ１フォーカスの消失によって可視的に測定された。最低活性濃度（ＬＡＣ）は、Ｅｂ１フォーカスが処理細胞の少なくとも５０％において不在であった濃度として決定された。ここで試験した化合物の効果は、ｐＬＡＣとして表される（ＬＡＣ値の負のｌｏｇ値）（表３参照）。]
[0206] 実施例Ｃ．３：抗増殖活性の検出
ＡＴＣＣから得られたヒト結腸癌腫ＨＣＴ１１６細胞は、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシンおよび１０％の熱失活胎児ウシ血清が補足されたＭｃＣｏｙ’ｓ ５Ａ培地で培養された。]
[0207] ＡＴＣＣから得られたヒト前立腺癌ＰＣ−３細胞は、１ｍＭピルビン酸ナトリウム、１．５ｇ／Ｌ重炭酸ナトリウム、５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシン、非必須アミノ酸類および１０％胎児ウシ血清が補足されたＨＡＭ’Ｓ Ｆ１２培地で培養された。]
[0208] アラマーブルー（Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ）アッセイにおいて使用される試薬
レサズリンはＡｌｄｒｉｃｈ（Ｐｒｏｄ．Ｎｏ．１９９３０３）から購入した。フェロシアン化ナトリウム、フェリシアン化カリウム、ＫＨ２ＰＯ４およびＫ２ＨＰＯ４は、Ｓｉｇｍａ（それぞれ、Ｐｒｏｄ．Ｎｏ．Ｐ９３８７，Ｐ８１３１，Ｐ５６５５およびＰ８２８１）から購入した。]
[0209] リン酸カリウムバッファー０．１Ｍ（ＰＰＢ）は次のとおり作成された：２．７２ｇのＫＨ２ＰＯ４および１３．８６ｇのＫ２ＨＰＯ４を、５００ｍｌのｍｉｌｌｉ−Ｑ Ｈ２Ｏに溶解し、ｐＨをｐＨ７．４に調整し、そして容量はｍｉｌｌｉ−Ｑ Ｈ２Ｏにより１リットルとした；このバッファーは濾過滅菌され、そして室温で保存された。レサズリン保存液（ＰＰＢ−Ａ）は、１５ｍｌのＰＢＳ中に４５ｍｇのレサズリンを溶解することによって新たに調製した。３０ｍＭフェリシアン化カリウム（ＰＰＢ−Ｂ）は、１００ｍｌのＰＰＢ中に０．９８７ｇのフェリシアン化カリウムを溶解することにより調製した。３０ｍＭフェロシアン化カリウム（ＰＰＢ−Ｃ）は、１００ｍｌのＰＰＢ中に１．２６６ｇのフェロシアン化カリウムを溶解することにより調製した。]
[0210] ＰＰＢ−Ａ、ＰＰＢ−ＢおよびＰＰＢ−Ｃの混合液は、それぞれの溶液の等量を混合することにより調製した。レサズリン作業溶液（ここでは、「アラマーブルー（Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ）」液と呼ばれる）は、ＰＰＢ中に該混合液を２０ｘ（容量／容量）に希釈し、そして濾過滅菌することにより調製した；アラマーブルー液は４℃で最大２週間保存できるであろう。]
[0211] アラマーブルーのアッセイ手順
３８４ウェルプレートにおける実験には、細胞は、透明な底をもつ黒色のＦａｌｃｏｎ３８４ウェル培養プレート（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｍｅｒｅｌｂｅｋｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）中で、４５μｌ培養基中に４．５ｘ１０３細胞／ｍｌの密度で接種された。細胞は２４時間プラスチックに接着させられた。試験する化合物は、予備希釈（培養基中１／５０）され、そして５μｌの予備希釈化合物がこのウェルに添加された。４日間のインキュベーション後、１０μｌのアラマーブルー液が各ウェルに添加され、そして細胞は３７℃でさらに４時間（ＨＣＴ１１６）または２４時間（ＰＣ−３）インキュベーションされた。蛍光強度は、Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅプレートリーダー（Ｆｌｕｏｒｓｋａｎ，Ｌａｂｓｙｓｔｅｍ、５４０ｎｍ励起および５９０ｎｍ発光）で各ウェルについて測定された。]
[0212] 抗増殖活性は、処理 対対照（未処理細胞）条件下で、残存する生存細胞のパーセンテージとして計算された。実験において、各実験条件についての結果は３並行ウェルの平均である。適当であれば、実験は反復されて完全な濃度−応答曲線が確立された。適当な場合、ＩＣ５０値（細胞の増殖を対照の５０％まで下げるために必要な薬剤濃度）が、級別データに関するプロビット解析を用いて算定された（Ｆｉｎｎｅｙ，Ｄ．Ｊ．，Ｐｒｏｂｉｔ Ａｎａｌｙｓｅｓ，２ｎｄ Ｅｄ．Ｃｈａｐｔｅｒ １０，Ｇｒａｄｅｄ Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ １９６２）。ここでは、試験化合物の効果は、ｐＩＣ５０（ＩＣ５０値の負のｌｏｇ値）として表される（表３参照）。]
[0213] ]
[0214] Ｄ．組成物実施例：フィルムコート錠剤
錠剤芯の調製
１００ｇの式（Ｉ）の化合物、５７０ｇのラクトースおよび２００ｇの澱粉を十分に混合し、その後５ｇのドデシル硫酸ナトリウムおよび１０ｇのポリビニルピロリドンの溶液（約２００ｍｌの水中）を用いて加湿する。湿潤粉末混合物を篩にかけ、乾燥し、そして再度、篩にかける。次いで１００ｇの微晶質セルロースおよび１５ｇの水素化植物油を加える。全体を良く混合し、そして化合物を錠剤に圧縮して、それぞれが１０ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含んでなる１０，０００個の錠剤が得られる。]
[0215] コーティング
１０ｇのメチルセルロース溶液（７５ｍｌの変性エタノール中）に、５ｇのエチルセルロース溶液（１５０ｍｌのジクロロメタン中）を加える。次に７５ｍｌのジクロロメタンおよび２．５ｍｌの１，２，３−プロパントリオールを加える。１０ｇのポリエチレングリコールを溶融し、そして７５ｍｌのジクロロメタンに溶解する。後の溶液を前の溶液に加え、次いで２．５ｇのオクタデカン酸マグネシウム、５ｇのポリビニルピロリドンおよび３０ｍｌの濃色懸濁液を加え、そして全体を均一にする。このようにして得られた混合物を用いて錠剤の芯をコーティング装置にて被覆する。]

权利要求:

請求項1
式（Ｉ）：［式中、ｍは０、１または２であり、そしてｍが０である場合、直接結合が意図され；ｎは０、１または２であり、そしてｎが０である場合、直接結合が意図され；Ｘは直接結合、ＣＲ１０Ｒ１１、ＮＲ８またはＯであり；Ｒ１はアリールまたはＨｅｔであり；ここでアリールはフェニルまたはナフタレニルであり；ここでＨｅｔはチエニル、ピロリル、ピロリニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、フラニル、ピペリジニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリジニル、アザインドリジニル、インドリル、インドリニル、ベンゾチエニル、インダゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、クロマニル、プリニル、キノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサゾリニル、ナフチリジニルまたはプテリジニルであり；アリールまたはＨｅｔ上の２個の炭素原子は−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−（ａ−１）、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−（ａ−２）、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−（ａ−３）、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＲ８−（ａ−４）、−Ｏ−ＣＲ８２−Ｏ−（ａ−５）、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−（ａ−６）、−ＣＨ２−Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−（ａ−７）、−（ＣＨ２）３−（ａ−８）、または−（ＣＨ２）４−（ａ−９）；から選択される二価の基で架橋されることができ（すなわち、二もしくは三環系部分を形成する）；各アリール、Ｈｅｔ、架橋化アリールもしくは架橋化Ｈｅｔは、ハロ、シアノ、ニトロ、ヒドロキシカルボニル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、Ｃ３−６シクロアルキル、アミノＣ３−６シクロアルキル、ハロＣ１−６アルキル、トリハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ２−６アルケニルカルボニル、オキシム、Ｃ１−６アルキルオキシム、アミドキシム、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｏ−ＣＨ３、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ≡Ｃ−Ｓｉ（ＣＨ３）３、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ２−６アルケニル、ヒドロキシＣ２−６アルキニル、シアノＣ１−６アルキル、シアノＣ２−６アルケニル、アミノカルボニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ２−６アルキニル、−ＰＯ（ＯＣ１−６アルキル）２、−Ｂ（ＯＨ）２、−Ｓ−ＣＨ３、ＳＦ５、Ｃ１−６アルキルスルホニル、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｃ１−６アルキルＮＲ８Ｒ９、−ＯＲ８、−Ｃ１−６アルキルＯＲ８、−ＣＯＮＲ８Ｒ９、ピペリジニルＣ１−６アルキル、ピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、モルホリニルＣ１−６アルキル、ピペリジニル、ピペラジニル、Ｃ１−６アルキルピペラジニル、モルホリニル、フェニル、チエニル、ピラゾリル、ピロリル、ピロリジニル、ピリジニル、ピリミジニル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、イミダゾリルＣ２−６アルキニル、Ｃ１−６アルキルイミダゾリルＣ２−６アルキニル、シアノピリジニル、フェニルＣ１−６アルキル、フェニルＣ２−６アルケニル、Ｃ１−６アルキルオキシフェニル、トリハロＣ１−６アルキルフェニル、メチルピラゾリル、ハロピリミジニルまたはジメチルアミノピロリジニルからそれぞれ独立して選択される１、２、３、４もしくは５個の置換基により置換されることができ；Ｒ２は水素、メチル、エチル、プロピル、Ｃ３−６シクロアルキル、Ｃ３−６シクロアルキルメチル、フルオロ、フェニル、シアノフェニルまたはトリフルオロメチルであり；Ｒ３はメチル、エチル、プロピル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ハロ、トリフルオロメチル、メチルオキシまたはＣ１−６アルキルカルボニルであり；各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は水素、ハロ、Ｃ１−６アルキルオキシ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９、−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＲ８Ｒ９またはＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシから独立して選択され；各Ｒ８およびＲ９は、水素、ハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルケニル、Ｃ２−６アルキニル、カルボニル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ジヒドロキシＣ１−６アルキル、シアノＣ１−６アルキル、トリハロＣ１−６アルキル、フェニルＣ１−６アルキル、（ジＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、モルホリニルＣ１−６アルキル、モルホリニルカルボニル、ピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ピペリジニルＣ１−６アルキル、チオモルホリニルＣ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルメチル、ピリジニル、ピリミジニル、フェニル、ハロフェニル、オキサニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニルＣ１−６アルキルまたはＣ１−６アルキルカルボニルアミノＣ１−６アルキルから独立して選択され；各Ｒ１０およびＲ１１は水素、メチル、ヒドロキシルから独立して選択され；あるいはＲ１０およびＲ１１はそれらに結合している炭素原子と共にシクロプロピル環または式Ｃ（＝Ｏ）の基を形成する］の化合物であって、その立体化学的異性体形を含む化合物、それらのＮ−オキシド形、それらの製薬学的に許容され得る付加塩、またはそれらの溶媒和物。
請求項2
式中、ｍが０または１であり；Ｒ１がフェニルまたはＨｅｔであり；ここでＨｅｔがピリジニル、ピリミジニルまたはベンゾチアゾリルであり；Ｈｅｔ上の２個の炭素原子が二価の基（ａ−８）により架橋されることができ；各フェニルまたはＨｅｔまたは架橋化Ｈｅｔが、ハロ、シアノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ２−６アルキニル、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ２Ｏ−ＣＨ３、ヒドロキシＣ２−６アルキニルまたは−ＯＲ８からそれぞれ独立して選択される１もしくは２個の置換基により置換されることができ；Ｒ２がメチルまたはエチルであり；Ｒ３がメチル、エチルまたはヒドロキシエチルであり；各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素またはハロから独立して選択され；各Ｒ８が水素またはＣ１−６アルキルであり；そして各Ｒ１０およびＲ１１が水素である請求項１に記載の化合物。
請求項3
式中、ｍが０であり、そしてｎが０であり；Ｘが直接結合またはＣＨ２であり；Ｒ１がフェニル、ピリジニルまたはピリミジニルであり；Ｒ１がピリジニルである場合、ピリジニル上の２個の炭素原子は二価の基（ａ−８）により架橋されることができ；各フェニル、ピリジニル、またはピリミジニルがハロ、シアノまたはＣ１−６アルキルオキシからそれぞれ独立して選択される１もしくは２個の置換基により置換されることができ；Ｒ２がメチルであり；Ｒ３がメチルまたはエチルであり；そして各Ｒ４、Ｒ５およびＲ６が水素である請求項１または２に記載の化合物。
請求項4
Ｒ３がメチル、エチル、プロピル、ヒドロキシメチル、ハロ、トリフルオロメチル、メチルオキシまたはＣ１−６アルキルカルボニルである請求項１に記載の化合物。
請求項5
化合物が以下の化合物：それらの製薬学的に許容され得る付加塩またはそれらの溶媒和物から選択される請求項１ないし４のいずれか１項に記載の化合物。
請求項6
医薬として使用するための請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物。
請求項7
製薬学的に許容され得る担体および有効成分として治療に有効な量の請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物を含んでなる製薬学的組成物。
請求項8
製薬学的に許容され得る担体および請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物が完全に混合される請求項７に記載の製薬学的組成物の調製法。
請求項9
チューブリン重合が媒介する障害を処置する医薬を製造するための請求項１ないし５のいずれかに記載の化合物の使用。
請求項10
請求項１ないし５のいずれか１項に記載の化合物と別の抗癌剤との組み合わせ物。
請求項11
請求項１に記載の化合物の調製法であって、過剰の塩基を式（ＩＩ）の中間体に、式（ＩＩＩ）の中間体（式中、Ｗはクロロまたはブロモまたは他の脱離基である）の存在下にて適切な溶媒中で加えるか、［請求項１に定めた定義を有する］、あるいは、所望により式（Ｉ）の化合物を技術的に知られている変換に従い互いに転換し、そしてさらに所望により式（Ｉ）の化合物を酸での処理により製薬学的に許容され得る酸付加塩に、または塩基での処理により製薬学的に許容され得る塩基付加塩に転換するか、あるいは逆に酸付加塩形をアルカリでの処理により遊離塩基に転換するか、または塩基付加塩を酸での処理により遊離酸に転換し；そして所望によりそれらの立体化学的異性体形またはＮ−オキシド形を調製することを特徴とする上記調製法。