 Ｒｏｎ抗体およびその使用
专利摘要:
本発明は、特に癌の診断および処置における、ＲＯＮ（ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄ’ｏｒｉｇｉｎｅ ｎａｎｔａｉｓ、ＭＳＴ１Ｒ）に結合する抗体およびその使用に関する。ＲＯＮが媒介する生存促進および腫瘍増殖経路を阻害する特異的抗体、ならびにその変異体、フラグメント、および誘導体を提供する。また、ＲＯＮに結合するリガンドであるＭＳＰの能力を遮断する特異的抗体、ならびにかかる抗体のフラグメント、変異体、および誘導体も提供する。また、本発明は、上記の抗体またはそのフラグメント、変異体、もしくは誘導体をコードするポリヌクレオチド、ならびにかかるポリヌクレオチドを含むベクターおよび宿主細胞を含む。本発明は、本発明の抗体を使用して癌を診断および処置する方法をさらに含む。 公开号:JP2011509687A 申请号:JP2010544322 申请日:2009-01-22 公开日:2011-03-31 发明作者:エレン ガーバー，；クリスティリン グラフ，；ヘザー ヒュー，；ベロニク ベイリー，；スティーブン ミクラズ， 申请人:バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド； IPC主号:C12N15-09
专利说明:
[0001] ＲＯＮ（ｒｅｃｅｐｔｅｕｒ ｄ’ｏｒｉｇｉｎｅ ｎａｎｔａｉｓ、ＭＳＴ１Ｒとしても知られる）は、胚発生に必須であり、炎症反応においても重要な役割を果たす、受容体型タンパク質チロシンキナーゼである（非特許文献１）。ＲＯＮはほとんどの場合、上皮由来の細胞型において発現され、ＲＯＮは、多くの他の受容体型チロシンキナーゼと同様、悪性上皮癌の進行において役割を果たし得ることが示唆されている（非特許文献２）。] [0002] 受容体型タンパク質チロシンキナーゼは、該して成長因子およびホルモン等の細胞外リガンドに結合する細胞外ドメイン、ならびにキナーゼ機能ドメインを有する細胞内ドメインからなる。受容体型タンパク質チロシンキナーゼは多くのクラスに細分化されており、ＲＯＮは、Ｓｔｋ、ｃ−Ｍｅｔ、およびｃ−Ｓｅａも同様に含む、受容体チロシンキナーゼのＭＥＴファミリーのメンバーである（非特許文献１）。ＲＯＮおよびｃ−Ｍｅｔのみが、ヒトに見られる該ファミリーのメンバーであり、これらは全体で約６５％の相同性を共有する。Ｃ−Ｍｅｔは肝細胞成長因子／散乱因子（ＨＧＦ／ＳＦ）の受容体であり、癌原遺伝子としてかなりよく特徴付けられている。] [0003] ＲＯＮのリガンドである、マクロファージ刺激タンパク質（ＭＳＰ）も同定されており、ｃ−ＭｅｔリガンドであるＨＧＦ／ＳＦと約４０％の相同性を共有する。ＭＳＰおよびＨＧＦは、クリングルドメインによって特徴付けられる、プラスミノーゲン−プロトロンビンファミリーに属する。興味深いことに、ＭＳＰも癌と関連があるとされている。例えば、ＷｅＩｍらは近年、ＭＳＰと乳癌の転移および予後不良との関連を認めた（非特許文献３）。] [0004] ＭＳＰは、セマフォリン（ｓｅｍａ）ドメインと称される、ＲＯＮの細胞外部分の特定のドメインに結合することが示されている。ＲＯＮおよびｃ−Ｍｅｔのみが、細胞外ｓｅｍａドメインを有する受容体チロシンキナーゼであり、ＲＯＮの同一ドメインが、そのリガンド結合部位を含むことが示されている。ＭＳＰのＲＯＮへの結合により、ＲＯＮのキナーゼドメイン内でリン酸化が生じ、ＲＯＮのキナーゼ活性の増加につながる。あるいは、β１インテグリンが、Ｓｒｃ依存性経路を通じてＲＯＮをリン酸化し、活性化することができる（非特許文献１）。ＲＯＮの活性化が、ＰＩ３−Ｋ、Ｒａｓ、ｓｒｃ、βカテニン、およびＦａｋシグナリングを含む多くの経路のシグナリングを開始する。ＲＯＮによって活性化されるシグナリング経路の多くが、増殖およびアポトーシスの阻害等の、癌に関連する過程と関係付けられる。] [0005] より近年では、多くの理由から、ＲＯＮ自体が癌の進行と関係付けられている。例えば、ＲＯＮは、乳癌、膀胱癌、結腸癌、卵巣癌、および膵臓癌を含む、多くのヒト腫瘍に発現する。加えて、ＲＯＮは、細胞増殖および運動性を増加させることが、生体外で示されている。さらに、ＲＯＮは、ＲＯＮ遺伝子導入マウスにおける腫瘍の成長および転移を誘発する。（非特許文献４）。故に、抗ＲＯＮ抗体を含む、ＲＯＮシグナリング経路を阻害し得る分子が必要である。] 先行技術 [0006] Ｃａｍｐ ｅｔ ａｌ．Ａｎｎ．Ｓｕｒｇ．Ｏｎｃｏｌ．７２：２７３−２８１（２００５） Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｓｉｓ ２３：１２９１−１２９７（２００３） ＰＮＡＳ １０４：７５０７−７５７５（２００７） Ｗａｌｔｚ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６６：１１９６７−１１９７４（２００６）] 課題を解決するための手段 [0007] 幾つかの実施形態では、本発明は、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体と同一のＲＯＮエピトープに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。] [0008] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供し、該抗体またはフラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体の、ＲＯＮへの結合を競合的に阻害する。] [0009] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択されるモノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体のものと同一である、抗原結合ドメインを含む。] [0010] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントの重鎖可変領域（ＶＨ）は、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む。] [0011] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントの軽鎖可変領域（ＶＬ）は、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む。] [0012] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。] [0013] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。] [0014] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。] [0015] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。] [0016] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む。] [0017] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨおよびＶＬは、それぞれ、２０個以下ずつの保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。] [0018] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。] [0019] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一である、Ｋａｂａｔの重鎖相補性決定領域−１（ＶＨ−ＣＤＲ１）のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される。] [0020] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一である、Ｋａｂａｔの重鎖相補性決定領域−２（ＶＨ−ＣＤＲ２）のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される。] [0021] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一である、Ｋａｂａｔの重鎖相補性決定領域−３（ＶＨ−ＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される。] [0022] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一である、Ｋａｂａｔの軽鎖相補性決定領域−１（ＶＬ−ＣＤＲ１）のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される。] [0023] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一である、Ｋａｂａｔの軽鎖相補性決定領域−２（ＶＬ−ＣＤＲ２）のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される。] [0024] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一である、Ｋａｂａｔの軽鎖相補性決定領域−３（ＶＬ−ＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む。さらなる実施形態では、ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される。] [0025] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むが、但し、該ＶＨ−ＣＤＲのうちの少なくとも１つにおいて、１、２、３、または４個のアミノ酸置換は除かれる。] [0026] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＨは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。] [0027] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、配列番号１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択される、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、およびＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むが、但し、該ＶＬ−ＣＤＲのうちの少なくとも１つにおいて、１、２、３、または４個のアミノ酸置換は除かれる。] [0028] 幾つかの実施形態では、本発明は、ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントを提供し、該抗体またはそのフラグメントのＶＬは、配列番号１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択される、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、およびＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。] [0029] 上記の抗体またはそのフラグメントの種々の実施形態において、ＶＨフレームワーク領域および／またはＶＬフレームワーク領域は、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである。] [0030] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、線状エピトープまたは非線状の立体構造エピトープに結合する。] [0031] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは多価であり、少なくとも２本の重鎖および少なくとも２本の軽鎖を含む。] [0032] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、多特異性である。さらなる実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、二重特異性である。] [0033] 上記の抗体またはそのフラグメントの種々の実施形態において、重鎖および軽鎖可変ドメインは、マウスである。さらなる実施形態では、重鎖および軽鎖可変ドメインは、１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される、モノクローナル抗体からのものである。] [0034] 上記の抗体またはそのフラグメントの種々の実施形態において、重鎖および軽鎖可変ドメインは、完全にヒトである。さらなる実施形態では、重鎖および軽鎖可変ドメインは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される、モノクローナルＦａｂ抗体フラグメントからのものである。] [0035] 種々の実施形態において、上記の抗体またはそのフラグメントは、ヒト化される。] [0036] 種々の実施形態において、上記の抗体またはそのフラグメントは、キメラである。] [0037] 種々の実施形態において、上記の抗体またはそのフラグメントは、霊長類化される。] [0038] 種々の実施形態において、上記の抗体またはそのフラグメントは、完全にヒトである。] [0039] 特定の実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、またはＦｖフラグメントである。] [0040] 特定の実施形態では、上記の抗体は、単鎖抗体である。] [0041] 特定の実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ヒトカッパ定常領域およびヒトラムダ定常領域からなる群から選択される、軽鎖定常領域を含む。] [0042] 特定の実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、重鎖定常領域またはそのフラグメントを含む。さらなる実施形態では、重鎖定常領域またはそのフラグメントは、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ４アグリ、ＩｇＧ１、およびＩｇＧ１アグリからなる群から選択される。] [0043] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、該参照モノクローナル抗体の解離定数（ＫＤ）より小さいＫＤによって特徴付けられる親和性で、ＲＯＮポリペプチドもしくはそのフラグメント、またはＲＯＮ変異体ポリペプチドに特異的に結合する。さらなる実施形態では、解離定数（ＫＤ）は、 ５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、 １０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、または１０−１５Ｍ以下である。] [0044] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、マウスＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントと比較して、ヒトＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントに優先的に結合する。] [0045] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、細胞の表面に発現したＲＯＮに結合する。さらなる実施形態では、該細胞は、悪性細胞、新生細胞、腫瘍細胞、転移性細胞、または腫瘍関連マクロファージ細胞である。] [0046] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ＭＳＰのＲＯＮへの結合を遮断する。] [0047] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮのＭＳＰ依存性活性化を阻害する] [0048] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮのＭＳＰ非依存性活性化を阻害する。] [0049] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮが媒介するＲａｓ／ＭＡＰＫシグナリング経路の活性化を阻害する。] [0050] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮが媒介するＥＲＫまたはＡＫＴのリン酸化を阻害する。] [0051] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮが媒介する細胞増殖、腫瘍細胞成長、腫瘍細胞遊走、腫瘍細胞浸潤、または腫瘍細胞転移を阻害する。] [0052] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、アポトーシスを誘発する。] [0053] さらなる実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、それらに融合される異種ポリペプチドをさらに含む。] [0054] 幾つかの実施形態では、上記の抗体またはそのフラグメントは、細胞傷害性薬剤、治療薬、細胞分裂阻害剤、生物毒素、プロドラッグ、ペプチド、タンパク質、酵素、ウイルス、脂質、生体応答修飾物質、医薬品、リンホカイン、異種抗体もしくはそのフラグメント、検出可能な標識、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびいずれかの前記薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、薬剤に共役される。さらなる実施形態では、細胞傷害性薬剤は、放射性核種、生体毒素、酵素的に活性な毒素、細胞分裂阻害治療薬もしくは細胞傷害性治療薬、プロドラッグ、免疫学的に活性なリガンド、生体応答修飾物質、またはいずれかの該細胞傷害性薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される。さらなる実施形態では、検出可能な標識は、酵素、蛍光標識、化学発光標識、生物発光標識、放射性標識、またはいずれかの該検出可能な標識のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される。] [0055] さらなる実施形態において、本発明は、上記の抗体またはそのフラグメント、および担体を含む組成物を含む。] [0056] 本発明の特定の実施形態は、抗体ＶＨポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを含み、該ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一であり、該ＶＨポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される。] [0057] 特定の実施形態では、該ＶＨポリペプチドをコードするヌクレオチド配列が、該ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列を変化させずに、発現を増加するために最適化される。さらなる実施形態では、最適化は、スプライス供与部位およびスプライス受容部位の同定および除去、ならびに／または該ポリヌクレオチドを発現する細胞に対するコドン使用頻度の最適化を含む。さらなる実施形態では、該核酸は、配列番号３、配列番号１３、配列番号２３、配列番号３３、配列番号４３、配列番号５３、配列番号６３、配列番号７３、配列番号８３、配列番号９３、配列番号１１４、配列番号１２４、配列番号１３４、および配列番号１４４からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む。] [0058] 幾つかの実施形態では、本発明は、抗体ＶＬポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一であり、該ＶＬポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、該ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される。] [0059] 特定の実施形態では、該ＶＬポリペプチドをコードするヌクレオチド配列が、該ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列を変化させずに、発現を増加するために最適化される。さらなる実施形態では、最適化は、スプライス供与部位およびスプライス受容部位の同定および除去、ならびに／または該ポリヌクレオチドを発現する細胞に対するコドン使用頻度の最適化を含む。さらなる実施形態では、該核酸は、配列番号８、配列番号１８、配列番号２８、配列番号３８、配列番号４８、配列番号５８、配列番号６８、配列番号７８、配列番号８８、配列番号９８、配列番号１１９、配列番号１２９、配列番号１３９、および配列番号１４９からなる群から選択される、ヌクレオチド配列を含む。] [0060] 特定の他の実施形態では、本発明は、抗体ＶＨポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列は、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一であり、該ＶＨポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。] [0061] 幾つかの実施形態では、本発明は、抗体ＶＬポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列は、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一であり、該ＶＬポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。] [0062] 幾つかの実施形態では、本発明は、２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一である、ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、ＶＨ−ＣＤＲ１を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される。] [0063] 幾つかの実施形態では、本発明は、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一である、ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、ＶＨ−ＣＤＲ２を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される。] [0064] 幾つかの実施形態では、本発明は、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一である、ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、ＶＨ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される。] [0065] 幾つかの実施形態では、本発明は、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一である、ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、ＶＬ−ＣＤＲ１を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される。] [0066] 幾つかの実施形態では、本発明は、２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一である、ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＬ−ＣＤＲ２を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される。] [0067] 幾つかの実施形態では、本発明は、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一である、ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＬ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される。] [0068] 幾つかの実施形態では、本発明は、抗体ＶＨポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＨポリペプチドは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、ＶＨ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。] [0069] 幾つかの実施形態では、本発明は、抗体ＶＬポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドを提供し、該ＶＬポリペプチドは、配列番号１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、該ＶＬ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。] [0070] 幾つかの実施形態では、上記のポリヌクレオチドは、抗体ＶＨポリペプチドまたは抗体ＶＬポリペプチドに融合されるシグナルペプチドをコードする核酸をさらに含む。] [0071] 特定の他の実施形態では、上記のポリヌクレオチドは、該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖定常領域ＣＨ１ドメインをコードするか、該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖定常領域ＣＨ２ドメインをコードするか、該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖定常領域ＣＨ３ドメインをコードするか、または該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖ヒンジ領域をコードする、核酸をさらに含む。さらなる実施形態では、該重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ４アグリ、ＩｇＧ１、またはＩｇＧ１アグリからなる群から選択される。] [0072] 幾つかの実施形態では、上記のポリヌクレオチドは、該ＶＬポリペプチドに融合される軽鎖定常領域ドメインをコードする核酸を含む。さらなる実施形態では、該軽鎖定常領域は、ヒトカッパである。] [0073] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされるポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、およびＭ８０−Ｂ０３からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体と同一のＲＯＮエピトープに特異的に結合する。] [0074] 上記のポリヌクレオチドの種々の他の実施形態において、該核酸によってコードされるポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体を競合的に阻害する。] [0075] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該ＶＨポリペプチドまたはＶＬポリペプチドのフレームワーク領域は、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである。] [0076] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、本発明は、線状エピトープまたは非線状の立体構造エピトープに結合する、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントを提供する。] [0077] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは多価であり、少なくとも２本の重鎖および少なくとも２本の軽鎖を含む。] [0078] 上記のポリヌクレオチドの特定の実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、多特異性である。さらなる実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、二重特異性である。] [0079] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、完全にヒトである重鎖および軽鎖可変ドメインを含む。さらなる実施形態では、重鎖および軽鎖可変ドメインは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択されるモノクローナルＦａｂ抗体フラグメントのものと同一である。] [0080] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、マウスである重鎖および軽鎖可変ドメインを含む。さらなる実施形態では、該重鎖および軽鎖可変ドメインは、１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択されるモノクローナル抗体のものと同一である。] [0081] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ヒト化される。] [0082] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、霊長類化される。] [0083] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、キメラである。] [0084] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、完全にヒトである。] [0085] 上記のポリヌクレオチドの種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、またはＦｖフラグメントである。上記のポリヌクレオチドの特定の実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、単鎖抗体である。] [0086] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、または１０−１５Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）によって特徴付けられる親和性で、ＲＯＮポリペプチドもしくはそのフラグメント、またはＲＯＮ変異体ポリペプチドに特異的に結合する。] [0087] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、マウスＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントと比較して、ヒトＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントに優先的に結合する。] [0088] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、細胞の表面に発現したＲＯＮに結合する。さらなる実施形態では、該細胞は、悪性細胞、新生細胞、腫瘍細胞、または転移性細胞である。] [0089] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＭＳＰのＲＯＮへの結合を遮断する。] [0090] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＭＳＰ依存性のＲＯＮの活性化を阻害する。] [0091] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＭＳＰ非依存性のＲＯＮの活性化を阻害する。] [0092] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｒａｓ／ＭＡＰＫシグナリング経路の活性化を阻害する。] [0093] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮが媒介するＥＲＫのリン酸化を阻害する。] [0094] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮが媒介する細胞増殖または腫瘍細胞成長を阻害する。] [0095] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、アポトーシスを誘発する。] [0096] 幾つかの実施形態では、上記のポリヌクレオチドは、異種ポリペプチドをコードする核酸をさらに含む。] [0097] 上記のポリヌクレオチドの幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、細胞傷害性薬剤、治療薬、細胞分裂阻害剤、生物毒素、プロドラッグ、ペプチド、タンパク質、酵素、ウイルス、脂質、生体応答修飾物質、医薬品、リンホカイン、異種抗体もしくはそのフラグメント、検出可能な標識、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびいずれかの該薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、薬剤に共役される。さらなる実施形態では、細胞傷害性薬剤は、放射性核種、生体毒素、酵素的に活性な毒素、細胞分裂阻害治療薬もしくは細胞傷害性治療薬、プロドラッグ、免疫学的に活性なリガンド、生体応答修飾物質、またはいずれかの該細胞傷害性薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される。特定の他の実施形態では、検出可能な標識は、酵素、蛍光標識、化学発光標識、生物発光標識、放射性標識、またはいずれかの該検出可能な標識のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される。] [0098] 幾つかの実施形態では、本発明は、上記のポリヌクレオチドを含む組成物を提供する。] [0099] 特定の他の実施形態では、本発明は、上記のポリヌクレオチドを含むベクターを提供する。さらなる実施形態では、該ポリヌクレオチドは、プロモーターと操作可能に関連する。さらなる実施形態では、本発明は、かかるベクターを含む宿主細胞を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、該ポリヌクレオチドがプロモーターと操作可能に関連する、ベクターを提供する。] [0100] さらなる実施形態では、本発明は、上記のポリヌクレオチドを含むベクターを含有する宿主細胞を培養するステップと、該抗体、またはそのフラグメントを回収するステップと、を含む、ＲＯＮに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントを産生する方法を提供する。さらなる実施形態では、本発明は、上記の方法によって産生される、単離されたポリペプチドを提供する。] [0101] 幾つかの実施形態では、本発明は、上記のポリヌクレオチドによってコードされる、単離されたポリペプチドを提供する。] [0102] 上記のポリペプチドのさらなる実施形態では、該ポリペプチドを含む抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。他の実施形態は、上記のポリペプチドを含む、単離された抗体またはそのフラグメントを含む。] [0103] 幾つかの実施形態では、本発明は、単離されたＶＨコードポリヌクレオチドおよび単離されたＶＬコードポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドは、それぞれ、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列をコードする核酸を含み、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドは、それぞれ、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択されるアミノ酸配列をコードする、核酸を含む。] [0104] 特定の他の実施形態では、本発明は、単離されたＶＨコードポリヌクレオチドおよび単離されたＶＬコードポリヌクレオチドを含む組成物を提供し、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドは、それぞれ、２０個未満の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列をコードする核酸を含み、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。] [0105] さらなる実施形態では、該ＶＨコードポリヌクレオチドは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＨポリペプチドをコードし、該ＶＬコードポリヌクレオチドは、配列番号１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択される、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、およびＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＶＬポリペプチドをコードし、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する。] [0106] 上記の組成物の種々の実施形態において、該ＶＨコードポリヌクレオチドは、抗体ＶＨポリペプチドに融合されるシグナルペプチドをコードする、核酸をさらに含む。] [0107] 上記の組成物の種々の実施形態において、該ＶＬコードポリヌクレオチドは、抗体ＶＬポリペプチドに融合されるシグナルペプチドをコードする、核酸をさらに含む。] [0108] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨコードポリヌクレオチドは、該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖定常領域ＣＨ１ドメインをコードする核酸をさらに含むか、該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖定常領域ＣＨ２ドメインをコードする核酸をさらに含むか、該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖定常領域ＣＨ３ドメインをコードする核酸をさらに含むか、または該ＶＨポリペプチドに融合される重鎖ヒンジ領域をコードする核酸をさらに含む。さらなる実施形態では、該重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ４アグリ、ＩｇＧ１、またはＩｇＧ１アグリからなる群から選択される。] [0109] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＬコードポリヌクレオチドは、該ＶＬポリペプチドに融合される軽鎖定常領域ドメインをコードする、核酸をさらに含む。さらなる実施形態では、該軽鎖定常領域は、ヒトカッパである。] [0110] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅｌ２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体と同一のＲＯＮエピトープに特異的に結合する。] [0111] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体の、ＲＯＮへの結合を競合的に阻害する。] [0112] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬポリペプチドのフレームワーク領域は、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである。] [0113] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、線状エピトープまたは非線状の立体構造エピトープに結合する。] [0114] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは多価であり、少なくとも２本の重鎖および少なくとも２本の軽鎖を含む。] [0115] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、多特異性である。さらなる実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、二重特異性である。] [0116] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、完全にヒトである重鎖および軽鎖可変ドメインを含む。さらなる実施形態では、該重鎖および軽鎖可変ドメインは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８Ｏ−ＢＯ３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される、モノクローナルＦａｂ抗体フラグメントのものと同一である。] [0117] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨおよびＶＬコードポリヌクレオチドによってコードされる抗体またはそのフラグメントは、マウスである重鎖および軽鎖可変ドメインを含む。さらなる実施形態では、該重鎖および軽鎖可変ドメインは、１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される、モノクローナル抗体のものと同一である。] [0118] 上記の組成物の種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ヒト化される。] [0119] 上記の組成物の種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、霊長類化される。] [0120] 上記の組成物の種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、キメラである。] [0121] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、完全にヒトである。] [0122] 上記の組成物の種々の実施形態において、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ）２フラグメント、またはＦｖフラグメントである。上記の組成物の特定の実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、単鎖抗体である。] [0123] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、または１０−１５−Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）によって特徴付けられる親和性で、ＲＯＮポリペプチドもしくはそのフラグメント、またはＲＯＮ変異体ポリペプチドに特異的に結合する。] [0124] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、マウスＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントと比較して、ヒトＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントに優先的に結合する。] [0125] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、細胞の表面に発現したＲＯＮに結合する。さらなる実施形態では、該細胞は、悪性細胞、新生細胞、腫瘍細胞、転移性細胞、または腫瘍関連マクロファージである。] [0126] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＭＳＰのＲＯＮへの結合を遮断する。] [0127] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＭＳＰ依存性のＲＯＮの活性化を阻害する。] [0128] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＭＳＰ非依存性のＲＯＮの活性化を阻害する。] [0129] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｒａｓ／ＭＡＰＫシグナリング経路の活性化を阻害する。] [0130] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮが媒介するＥＲＫまたはＡＫＴのリン酸化を阻害する。] [0131] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮが媒介する細胞増殖、腫瘍細胞成長、腫瘍細胞遊走、腫瘍細胞浸潤、または腫瘍細胞転移を阻害する。] [0132] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、アポトーシスを誘発する。] [0133] 幾つかの実施形態では、上記の組成物、該ＶＨコードポリヌクレオチド、該ＶＬコードポリヌクレオチド、または該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドの両方は、異種ポリペプチドをコードする核酸をさらに含む。] [0134] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該核酸によってコードされる該ポリペプチドを含む、抗体またはその抗原結合性フラグメントは、細胞傷害性薬剤、治療薬、細胞分裂阻害剤、生物毒素、プロドラッグ、ペプチド、タンパク質、酵素、ウイルス、脂質、生体応答修飾物質、医薬品、リンホカイン、異種抗体もしくはそのフラグメント、検出可能な標識、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびいずれかの該薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、薬剤に共役される。さらなる実施形態では、細胞傷害性薬剤は、放射性核種、生体毒素、酵素的に活性な毒素、細胞分裂阻害治療薬もしくは細胞傷害性治療薬、プロドラッグ、免疫学的に活性なリガンド、生体応答修飾物質、またはいずれかの該細胞傷害性薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される。特定の他の実施形態では、検出可能な標識は、酵素、蛍光標識、化学発光標識、生物発光標識、放射性標識、またはいずれかの該検出可能な標識のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される。] [0135] 上記の組成物の幾つかの実施形態では、該ＶＨコードポリヌクレオチドは第１のベクター上に含有され、該ＶＬコードポリヌクレオチドは第２のベクター上に含有される。さらなる実施形態では、該ＶＨコードポリヌクレオチドは第１のプロモーターと操作可能に関連し、該ＶＬコードポリヌクレオチドは第２のプロモーターと操作可能に関連する。特定の他の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同一プロモーターの複製物である。さらなる実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同一ではない。] [0136] 上記の組成物の種々の実施形態において、第１のベクターおよび第２のベクターは、単一宿主細胞に含有される。] [0137] 上記の組成物の特定の他の実施形態では、第１のベクターおよび第２のベクターは、別個の宿主細胞に含有される。] [0138] 幾つかの実施形態では、本発明は、上記の宿主細胞を培養するステップと、該抗体、またはそのフラグメントを回収するステップと、を含む、ＲＯＮに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントを産生する方法を提供する。] [0139] 他の実施形態では、本発明は、別個の宿主細胞を共培養するステップと、該抗体、またはそのフラグメントを回収するステップと、を含む、ＲＯＮに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントを産生する方法を提供する。上記の方法のさらなる実施形態では、本発明は、該ＶＨコードポリペプチドおよび該ＶＬコードポリペプチドを組み合わせるステップと、該抗体、またはそのフラグメントを回収するステップと、を提供する。] [0140] 幾つかの実施形態では、本発明は、上記の方法によって産生される、ＲＯＮに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントを提供する。] [0141] 幾つかの実施形態では、本発明は、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドが、同一ベクター上にある組成物とともに、その中にベクターを提供する。] [0142] 上記のベクターの種々の実施形態において、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドは、それぞれ、プロモーターと操作可能に関連する。] [0143] 上記のベクターの種々の実施形態において、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドは、インフレームで融合され、それらと操作可能に関連する単一プロモーターから共転写され、単鎖抗体またはその抗原結合性フラグメントに共翻訳される。] [0144] 上記のベクターの種々の実施形態において、該ＶＨコードポリヌクレオチドおよび該ＶＬコードポリヌクレオチドは、それらと操作可能に関連する単一プロモーターから共転写されるが、別個に翻訳される。さらなる実施形態では、該ベクターは、該ＶＨコードポリヌクレオチドと該ＶＬコードポリヌクレオチドとの間に配列される、ＩＲＥＳ配列をさらに含む。特定の他の実施形態では、ＶＨをコードするポリヌクレオチドおよびＶＬをコードするポリヌクレオチドは、別個に転写され、それぞれ別個のプロモーターと操作可能に関連する。さらなる実施形態では、該別個のプロモーターは、同一プロモーターの複製物であるか、あるいは該別個のプロモーターは、同一ではない。] [0145] 幾つかの実施形態では、本発明は、上記のベクターを含む宿主細胞を提供する。] [0146] 他の実施形態では、本発明は、上記の宿主細胞を培養するステップと、該抗体、またはそのフラグメントを回収するステップと、を含む、ＲＯＮに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントを産生する方法を提供する。] [0147] 幾つかの実施形態では、本発明は、上記の方法によって産生される、ＲＯＮに特異的に結合する抗体またはそのフラグメントを提供する。] [0148] 幾つかの実施形態では、本発明は、動物の過剰増殖性疾患を処置するための方法を提供し、該方法は、ａ）上記の単離された抗体またはフラグメントと、ｂ）薬剤として許容される担体と、を含む組成物を、処置を必要とする動物に投与するステップを含む。さらなる実施形態では、過剰増殖性疾病または疾患は、癌、新生物、腫瘍、悪性腫瘍、またはそれらの転移からなる群から選択される。] [0149] 上記の方法の種々の実施形態において、該抗体またはそのフラグメントは、悪性細胞の表面に発現したＲＯＮに特異的に結合する。さらなる実施形態では、該抗体またはそのフラグメントの悪性細胞への結合は、悪性細胞の成長阻害をもたらす。] [0150] 上記の方法の種々の実施形態において、該抗体またはそのフラグメントは、ＲＯＮのリン酸化を阻害するか、または腫瘍細胞増殖を阻害する。さらなる実施形態では、腫瘍細胞増殖は、転移成長の阻止または遅延を通じて阻害される。] [0151] 上記の方法の種々の実施形態において、該抗体またはそのフラグメントは、腫瘍細胞遊走を阻害する。さらなる実施形態では、腫瘍細胞増殖は、腫瘍の隣接組織への拡散の阻止または遅延を通じて阻害される。] [0152] 上記の方法の種々の実施形態において、過剰増殖性疾病または疾患は、前立腺、結腸、腹部、骨、乳房、消化器系、肝臓、膵臓、腹膜、副腎、副甲状腺、脳下垂体、精巣、卵巣、胸腺、甲状腺、眼、頭部、頸部、中枢神経系、末梢神経系、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸部、または尿生殖路に位置する新生物である。] [0153] 上記の方法の種々の実施形態において、過剰増殖性疾病は癌であり、該癌は、扁平上皮癌、黒色腫、白血病、骨髄腫、胃癌、脳癌、肺癌、膵臓癌、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、前立腺癌、精巣癌、甲状腺癌、および頭頸部癌からなる群から選択される。さらなる実施形態では、該癌は、胃癌、腎臓癌、脳癌、膀胱癌、結腸癌、肺癌、乳癌、膵臓癌、卵巣癌、および前立腺癌からなる群から選択される。] [0154] 上記の方法の種々の実施形態において、動物は、哺乳動物である。さらなる実施形態では、哺乳動物は、ヒトである。] 図面の簡単な説明 [0155] ＳＷ４８０細胞に結合された抗体の、代表的なＦＡＣＳ結合曲線を示す。] [0156] ＲＯＮに結合するＭＳＰに対する、モノクローナルマウス抗ＲＯＮ抗体およびヒトモノクローナル抗ＲＯＮＦａｂへの効果を示す。 ＲＯＮに結合するＭＳＰに対する、モノクローナルマウス抗ＲＯＮ抗体およびヒトモノクローナル抗ＲＯＮ Ｆａｂへの効果を示す。] [0157] ＭＢ−４５３乳癌細胞およびＢｘＰＣ−３膵臓癌細胞における、ＭＳＰが誘発するＲＯＮのリン酸化に対する抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。 ＭＢ−４５３乳癌細胞およびＢｘＰＣ−３膵臓癌細胞における、ＭＳＰが誘発するＲＯＮのリン酸化に対する抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。 ＭＢ−４５３乳癌細胞およびＢｘＰＣ−３膵臓癌細胞における、ＭＳＰが誘発するＲＯＮのリン酸化に対する抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。] [0158] 野生型ＲＯＮを過剰発現する２９３細胞、ＲＯＮの構成的に活性なキナーゼドメイン突然変異体を発現する細胞、およびＢｘＰＣ−３膵臓細胞における、ＭＳＰ非依存性のＲＯＮシグナリングに対する、抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。 野生型ＲＯＮを過剰発現する２９３細胞、ＲＯＮの構成的に活性なキナーゼドメイン突然変異体を発現する細胞、およびＢｘＰＣ−３膵臓細胞における、ＭＳＰ非依存性のＲＯＮシグナリングに対する、抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。 野生型ＲＯＮを過剰発現する２９３細胞、ＲＯＮの構成的に活性なキナーゼドメイン突然変異体を発現する細胞、およびＢｘＰＣ−３膵臓細胞における、ＭＳＰ非依存性のＲＯＮシグナリングに対する、抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。] [0159] ＢｘＰＣ３およびＭＤＡ−ＭＢ−４５３腫瘍細胞における、ｐＡＫＴのリン酸化に対する抗ＲＯＮ抗体の効果を示す。] [0160] ヒトＲＯＮスプライス変異体である、ＲＯＮｄｅｌｔａ１６０を発現する細胞に結合された抗体の、ＦＡＣＳ結合曲線を示す。] [0161] ＲＯＮ抗体の可溶性ＲＯＮへの結合を測定する、ＥＬＩＳＡ検定の結果を示す。] [0162] ＲＯＮを発現する２９３細胞に結合された抗体の、ＦＡＣＳ結合曲線を示す。] [0163] ＲＯＮを発現するＣＨＯ細胞に結合された抗体を測定する、ＦＡＣＳ検定の結果を表す棒グラフである。] [0164] ＲＯＮ抗体で処置した腫瘍細胞における、ＥＲＫおよびリン酸化ＥＲＫのウエスタンブロットを示す。棒グラフは、抗体１Ｐ３Ｂ２．２を使用して得られたウエスタンブロットの結果の定量化を示す。] [0165] ＲＯＮ抗体で処置した腫瘍細胞における、ＡＫＴおよびリン酸化ＡＫＴのウエスタンブロットを示す。 抗体１Ｐ３Ｂ２．２を使用して得られたウエスタンブロットの結果の定量化を示す、棒グラフを表す。] [0166] 無処置、対照抗体で処置、ＭＳＰで処置、またはＭＳＰおよび抗ＲＯＮ抗体で処置した種々の腫瘍細胞における、リン酸化ＡＫＴおよびリン酸化ＥＲＫのウエスタンブロットを示す。] [0167] 可溶性のヒトＲＯＮおよびＣｙｎｏＲＯＮへのＲＯＮ抗体の結合を測定する、ＥＬＩＳＡ検定の結果を示す。 可溶性のヒト（図１３Ｃ）ＲＯＮおよびｃｙｎｏ（図１３Ｂ）ＲＯＮへのヒトＭＳＰの結合を測定する、ＥＬＩＳＡの結果を示す。 可溶性のヒト（図１３Ｃ）ＲＯＮおよびｃｙｎｏ（図１３Ｂ）ＲＯＮへのヒトＭＳＰの結合を測定する、ＥＬＩＳＡの結果を示す。] 図１３Ｂ 図１３Ｃ [0168] ＨＴ１０８０およびＨＴ１０８０−ＲＯＮ（図１４Ａ）、ＡＧＳ（図１４Ｂ）、ならびにＭＤＡ−ＭＢ−２３１（図１４Ｃ）細胞株を使用した、腫瘍細胞浸潤検定の結果を示す。高い棒は、細胞浸潤の増加を示す。 ＨＴ１０８０およびＨＴ１０８０−ＲＯＮ（図１４Ａ）、ＡＧＳ（図１４Ｂ）、ならびにＭＤＡ−ＭＢ−２３１（図１４Ｃ）細胞株を使用した、腫瘍細胞浸潤検定の結果を示す。高い棒は、細胞浸潤の増加を示す。 ＨＴ１０８０およびＨＴ１０８０−ＲＯＮ（図１４Ａ）、ＡＧＳ（図１４Ｂ）、ならびにＭＤＡ−ＭＢ−２３１（図１４Ｃ）細胞株を使用した、腫瘍細胞浸潤検定の結果を示す。高い棒は、細胞浸潤の増加を示す。] 図１４Ａ 図１４Ｂ 図１４Ｃ [0169] 可溶性ヒトＲＯＮ（ＳｅｍａおよびＰＳＩドメイン）およびＲＯＮのＰＳＩドメインへの、ＲＯＮ抗体の結合を測定する、ＥＬＩＳＡ検定の結果を示す。] [0170] マウスＲＯＮを発現する２９３細胞へ結合する、抗マウスＲＯＮ抗体のＦＡＣＳ結合曲線を示す。] [0171] マウスＲＯＮを発現し、抗マウスＲＯＮ抗体で処置したＣＨＯ細胞における、ＡＫＴおよびリン酸化ＡＫＴのウエスタンブロットを示す。 その定量化を示す。] [0172] マウス（図１８Ａ）ＲＯＮタンパク質またはヒト（図１８Ｂ）ＲＯＮタンパク質のいずれかを発現する２９３細胞に結合する、抗マウスＲＯＮ抗体および抗ヒトＲＯＮ抗体のＦＡＣＳ結合曲線を示す。 マウス（図１８Ａ）ＲＯＮタンパク質またはヒト（図１８Ｂ）ＲＯＮタンパク質のいずれかを発現する２９３細胞に結合する、抗マウスＲＯＮ抗体および抗ヒトＲＯＮ抗体のＦＡＣＳ結合曲線を示す。] 図１８Ａ 図１８Ｂ [0173] 種々の癌細胞型における、ＲＯＮの発現レベルならびにリン酸化ＥＲＫおよびリン酸化ＡＫＴの増加を示す表である。] [0174] 腫瘍細胞を投与し、抗ＲＯＮ抗体で処置したＳＣＩＤマウスにおける、腫瘍の大きさを表示するグラフを示す。矢印は、抗体が投与された時点を示す。] [0175] Ｉ．定義] [0176] 「ａ」または「ａｎ」要素という用語は、１つ以上のその要素を指すことに留意されたく、例えば、「ａｎＲＯＮ抗体」は、１つ以上のＲＯＮ抗体を表すことが理解される。したがって、「ａ」（または「ａｎ」）、「１つ以上」、および「少なくとも１つ」という用語は、本明細書で交換可能に使用することができる。] [0177] 本明細書で使用される、「ポリペプチド」という用語は、は、単数形の「ポリペプチド」、ならびに複数形の「ポリペプチド」を包含することが意図され、アミド結合（ペプチド結合としても知られる）によって線状に連結されるモノマー（アミノ酸）からなる分子を指す。「ポリペプチド」という用語は、２つ以上のアミノ酸の任意の１つまたは複数の鎖を指し、産物の具体的な長さを指さない。故に、ペプチド、ジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド、「タンパク質」、「アミノ酸鎖」、または２つ以上のアミノ酸の１つまたは複数の鎖を指すために使用されるいずれの他の用語も、「ポリペプチド」の定義内に含まれ、「ポリペプチド」という用語は、これらの用語のうちのいずれかの代わりに、あるいはそれと交換可能に使用することができる。また、「ポリペプチド」という用語は、制限されないが、グリコシル化、アセチル化、リン酸化、アミド化、既知の保護／封鎖基による誘導体化、タンパク質切断、または天然に存在しないアミノ酸による修飾を含む、該ポリペプチドの発現後の修飾の産物を指すことが意図される。ポリペプチドは、天然の生物学的源に由来するか、あるいは組換え技術によって産生されてもよいが、必ずしも指定された核酸配列から翻訳される必要はない。化学合成を含む、いずれの様態で生成されてもよい。] [0178] 本発明のポリペプチドは、アミノ酸約３個以上、５個以上、１０個以上、２０個以上、２５個以上、５０個以上、７５個以上、１００個以上、２００個以上、５００個以上、１，０００個以上、または２，０００個以上の大きさであり得る。ポリペプチドは、明確な３次元構造を有し得るが、必ずしもかかる構造を有する必要はない。明確な３次元構造を有するポリペプチドは、折り畳まれていると称され、明確な３次元構造を有さず、むしろ多数の異なる立体構造を取るポリペプチドは、折り畳まれていないと称される。本明細書で使用される、糖タンパク質という用語は、例えば、セリン残基またはアスパラギン残基等のアミノ酸残基の、酸素を含有する、または窒素を含有する側鎖を介してタンパク質に付着する少なくとも１個の炭水化物部分にカップリングされる、タンパク質を指す。] [0179] 「単離された」ポリペプチドまたはそのフラグメント、変異体、もしくは誘導体とは、その天然の環境にはないポリペプチドを意図する。特定の精製レベルは必要とされない。例えば、単離されたポリペプチドは、その未変性または天然の環境から取り出すことができる。宿主細胞中に発現した、組換えにより産生されたポリペプチドおよびタンパク質は、本発明の目的上、任意の好適な技法によって分離、分画、または部分的もしくは実質的に精製された、未変性のまたは組換えポリペプチドと同様、単離されたと見なされる。] [0180] また、本発明のポリペプチドとして、前述のポリペプチドのフラグメント、誘導体、類似体、もしくは変異体、およびこれらの任意の組み合わせが含まれる。本発明のＲＯＮ抗体または抗体ポリペプチドに言及する場合、「フラグメント」、「変異体」、「誘導体」、および「類似体」という用語には、対応する未変性の抗体またはポリペプチドの抗原結合性の少なくとも一部を保持する、いずれのポリペプチドも含まれる。本発明のポリペプチドのフラグメントには、本明細書の別の箇所で説明される特定の抗体フラグメントに加えて、タンパク質分解フラグメント、ならびに欠失フラグメントが含まれる。本発明のＲＯＮ抗体および抗体ポリペプチドの変異体には、上記のようなフラグメント、ならびにアミノ酸置換、欠失、または挿入によって改質されたアミノ酸配列を有する、ポリペプチドが含まれる。変異体は、天然に存在してもよく、または天然に存在しなくてもよい。天然に存在しない変異体は、当技術分野において既知の突然変異誘発技法を用いて、産生することができる。変異体ポリペプチドは、保存的または非保存的なアミノ酸置換、欠失、または付加を含み得る。本発明のＲＯＮ抗体および抗体ポリペプチドの誘導体は、未変性のポリペプチドにおいては認められない、さらなる特徴を示すように改質された、ポリペプチドである。例としては、融合タンパク質が挙げられる。変異体ポリペプチドは、本明細書において「ポリペプチド類似体」と称される場合もある。本明細書で使用される、ＲＯＮ抗体または抗体ポリペプチドの「誘導体」は、官能性側基の反応によって化学的に誘導される１個以上の残基を有する、主題のポリペプチドを指す。また、「誘導体」として、２０個の標準アミノ酸の、１個以上の天然に存在するアミノ酸誘導体を含有する、ペプチドが含まれる。例えば、４−ヒドロキシプロリンはプロリンと置換することができ、５−ヒドロキシリジンはリジンと置換することができ、３−メチルヒスチジンはヒスチジンと置換することができ、ホモセリンはセリンと置換することができ、オルニチンはリジンと置換することができる。] [0181] 「ポリヌクレオチド」という用語は、単数形の核酸、ならびに複数形の核酸を包含することが意図され、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）またはプラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）等の、単離された核酸分子またはコンストラクトを指す。ポリヌクレオチドは、従来のリン酸ジエステル結合、または従来にない結合（例えば、ペプチド核酸（ＰＮＡ）に認められるもの等のアミド結合）を含み得る。「核酸」という用語は、ポリヌクレオチド中に存在する、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡフラグメント等の、任意の１つ以上の核酸セグメントを指す。「単離された」核酸またはポリヌクレオチドとは、その天然の環境から取り出された核酸分子、ＤＮＡ、またはＲＮＡを意図する。例えば、ベクター中に含有されるＲＯＮ抗体をコードする組換えポリヌクレオチドは、本発明の目的上、単離されたと見なされる。単離されたポリヌクレオチドのさらなる例としては、異種の宿主細胞中に維持される組換えポリヌクレオチド、または溶液中の精製された（部分的にもしくは実質的に）ポリヌクレオチドが挙げられる。単離されたＲＮＡ分子には、本発明のポリヌクレオチドの生体内または生体外ＲＮＡ転写物が挙げられる。本発明による単離されたポリヌクレオチドまたは核酸には、合成的に産生された、かかる分子がさらに含まれる。加えて、ポリヌクレオチドまたは核酸は、プロモーター、リボソーム結合部位、または転写終結因子等の調節要素であり得るか、またはそれを含み得る。] [0182] 本明細書で使用される、「コード化領域」は、アミノ酸に翻訳されるコドンからなる核酸の部分である。「終止コドン」（ＴＡＧ、ＴＧＡ、またはＴＡＡ）はアミノ酸に翻訳されないが、コード化領域の一部と見なすことができ、しかし例えばプロモーター、リボソーム結合部位、転写終結因子、イントロン等のいずれかのフランキング配列は、コード化領域の一部ではない。本発明の２つ以上のコード化領域は、単一のポリヌクレオチドコンストラクト、例えば、単一ベクター上、または別個のポリヌクレオチドコンストラクト、例えば、別個の（異なる）ベクター上に存在することができる。さらに、いずれのベクターも、単一のコード化領域を含有することができ、あるいは２つ以上のコード化領域を含んでもよく、例えば、単一のベクターが、免疫グロブリン重鎖可変領域および免疫グロブリン軽鎖可変領域を、別個にコードすることができる。加えて、本発明のベクター、ポリヌクレオチド、または核酸は、ＲＯＮ抗体またはそのフラグメント、変異体、もしくは誘導体をコードする核酸に融合されるか、あるいは融合されないかのいずれかである、異種のコード化領域をコードすることができる。異種のコード化領域には、分泌シグナルペプチドまたは異種の機能ドメイン等の、特殊化された要素またはモチーフが含まれるが、これらに限定されない。] [0183] 特定の実施形態では、該ポリヌクレオチドまたは核酸はＤＮＡである。ＤＮＡである場合、ポリペプチドをコードする核酸を含むポリヌクレオチドは、通常、１つ以上のコード化領域と操作可能に関連する、プロモーターおよび／または他の転写もしくは翻訳制御要素を含み得る。操作可能な関連とは、遺伝子産物、例えば、ポリペプチドのコード化領域が、遺伝子産物の発現を、１つまたは複数の調節配列の影響または制御下に置くように、１つ以上の調節配列と関連する場合である。２つのＤＮＡフラグメント（ポリペプチドコード化領域、およびそれに関連するプロモーター等）は、プロモーター機能の誘発が、所望の遺伝子産物をコードするｍＲＮＡの転写をもたらす場合、ならびに、２つのＤＮＡフラグメント間の連結の性質が、遺伝子産物の発現を指示する発現調節配列の能力を妨げないか、あるいはＤＮＡ鋳型が転写される能力を妨げない場合、「操作可能に関連」する。したがって、プロモーター領域は、該プロモーターが、ポリペプチドをコードする核酸の転写を生じさせることができる場合、その核酸と操作可能に関連するであろう。該プロモーターは、所定の細胞においてのみＤＮＡの実質的な転写を指示する、細胞に特異的なプロモーターであり得る。プロモーターに加えて、例えばエンハンサー、オペレーター、抑制因子、および転写終結シグナル等の他の転写制御要素が、該ポリヌクレオチドと操作可能に関連して、細胞に特異的な転写を指示することができる。好適なプロモーターおよび他の転写制御領域を、本明細書で開示する。] [0184] 種々の転写制御領域が、当業者に既知である。これらには、限定されないが、サイトメガロウイルス（前初期プロモーター、イントロン−Ａと併用）、サルウイルス４０（初期プロモーター）、およびレトロウイルス（ラウス肉腫ウイルス等）からのプロモーターおよびエンハンサーセグメント等の脊椎動物細胞において機能する、転写制御領域が含まれるが、これらに限定されない。他の転写制御領域には、アクチン、熱ショックタンパク質、ウシ成長ホルモン、およびウサギβ−グロブリン等の脊椎動物遺伝子に由来するもの、ならびに真核細胞における遺伝子発現を制御することができる他の配列が含まれる。さらなる好適な転写制御領域には、組織に特異的なプロモーターおよびエンハンサー、ならびにリンホカイン誘発性プロモーター（例えば、インターフェロンまたはインターロイキンによって誘発可能なプロモーター）が含まれる。] [0185] 同様に、種々の翻訳制御要素が当業者に既知である。これらには、リボソーム結合部位、翻訳開始および終結コドン、ならびにピコルナウイルスに由来する要素（特に内部リボソーム侵入部位（即ちＩＲＥＳ）、ＣＩＴＥ配列とも称される）が含まれるが、これらに限定されない。] [0186] 他の実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の形態のＲＮＡである。] [0187] 本発明のポリヌクレオチドおよび核酸コード化領域は、本発明のポリヌクレオチドによってコードされるポリペプチドの分泌を指示する、分泌またはシグナルペプチドをコードするさらなるコード化領域と関連し得る。シグナル仮説によれば、哺乳動物細胞によって分泌されるタンパク質は、粗面小胞体を通る成長するタンパク質鎖の排出が開始されると、成熟タンパク質から切断される、シグナルペプチドまたは分泌リーダー配列を有する。当業者は、脊椎動物細胞によって分泌されるポリペプチドが、概して、ポリペプチドのＮ末端に融合されるシグナルペプチドを有し、これは、完全なまたは「全長」ポリペプチドから切断されて、分泌型または「成熟」形態のポリペプチドを産生することを認識する。特定の実施形態では、未変性のシグナルペプチド、例えば、免疫グロブリン重鎖もしくは軽鎖のシグナルペプチド、またはそれと操作可能に関連するポリペプチドの分泌を指示する能力を保持する配列の、機能的誘導体が使用される。代替として、異種の哺乳動物シグナルペプチド、またはその機能的誘導体を使用してもよい。例えば、野生型リーダー配列を、ヒト組織プラスミノーゲン活性化因子（ＴＰＡ）またはマウスβグルクロニダーゼのリーダー配列と置換することができる。] [0188] 本発明は、特定のＲＯＮ抗体、またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体を対象とする。天然に存在する抗体等の、完全な大きさの抗体を具体的に指していない限り、「ＲＯＮ抗体」という用語は、完全な大きさの抗体、ならびにかかる抗体の抗原結合性フラグメント、変異体、類似体、もしくは誘導体、例えば、天然に存在する抗体もしくは免疫グロブリン分子、または抗体分子と類似の様態で抗原に結合する、改変抗体分子もしくはフラグメントを包含する。] [0189] 「抗体」および「免疫グロブリン」という用語は、本明細書で交換可能に使用される。抗体または免疫グロブリンは、少なくとも重鎖の可変ドメインを含み、通常は少なくとも重鎖および軽鎖の可変ドメインを含む。脊椎動物系の基本的な免疫グロブリン構造は、比較的よく理解されている。例えば、ＨａｒｌｏｗらのＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）を参照されたい。] [0190] 以下でより詳細に説明するように、「免疫グロブリン」という用語は、生化学的に識別することができる、種々の広いクラスのポリペプチドを含む。当業者は、重鎖がガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、またはエプシロン、（γ、μ、α、δ、ε）として分類され、それらの中に幾つかのサブクラス（例えば、γ１〜γ４）を有することを理解するであろう。抗体の「クラス」をそれぞれＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ、またはＩｇＥと決定するのが、この鎖の性質である。免疫グロブリンのサブクラス（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１等は、よく特徴付けられており、機能的特殊化を付与することが知られている。本開示に照らして、当業者は、これらのクラスおよびアイソタイプの各々の修飾型を容易に識別可能であり、したがって、本発明の範囲内である。免疫グロブリンの全てのクラスが明らかに本発明の範囲内にあるが、以下の説明は、概してＩｇＧのクラスの免疫グロブリン分子を対象とする。ＩｇＧに関して、標準的な免疫グロブリン分子は、分子量約２３，０００ダルトンの２本の同一の軽鎖ポリペプチド、および分子量５３，０００〜７０，０００の２本の同一の重鎖ポリペプチドを含む。典型的には、４本の鎖がジスルフィド結合によって「Ｙ」字型に接合し、軽鎖が、「Ｙ」の口から始まって可変領域まで続く重鎖をひとまとめにしている。] [0191] 軽鎖はカッパまたはラムダ（κ、λ）のいずれかとして分類される。重鎖の各クラスは、カッパまたはラムダ軽鎖のいずれかと結合することができる。概して、軽鎖および重鎖は相互に共有結合し、２本の重鎖の「尾」の部分は、免疫グロブリンが、ハイブリドーマ、Ｂ細胞、または遺伝子改変宿主細胞によって生成されると、共有ジスルフィド結合または非共有結合によって相互に結合する。重鎖では、アミノ酸配列が、Ｙ字型の分岐した側のＮ末端から、各鎖の下部のＣ末端へと続く。] [0192] 軽鎖および重鎖の両方が、構造的および機能的相同性の領域に分けられる。「定常」および「可変」という用語は、機能的に使用される。この点に関して、軽鎖および重鎖の両方の部分の可変ドメイン（それぞれＶＬおよびＶＨ）が、抗原認識および特異性を決定することが、理解されるであろう。逆に、軽鎖および重鎖の定常ドメイン（それぞれＣＬならびにＣＨ１、ＣＨ２、もしくはＣＨ３）は、分泌、経胎盤移行、Ｆｃ受容体結合、補体結合等の重要な生物学的特性を付与する。慣例により、定常領域ドメインの付番は、抗体の抗原結合部位またはアミノ末端から遠位になるに従って増加する。Ｎ末端部は可変領域であり、Ｃ末端部には定常領域があり、ＣＨ３およびＣＬドメインは、実際にはそれぞれ重鎖および軽鎖のカルボキシ末端を含む。] [0193] 上述のように、可変領域によって、抗体は、抗原上のエピトープを選択的に認識し、特異的に結合することができる。つまり、抗体のＶＬドメインおよびＶＨドメイン、または相補性決定領域（ＣＤＲ）のサブセットが組み合わさって、３次元の抗原結合部位を定義する可変領域を形成する。この抗体の四次構造が、Ｙのそれぞれの腕の末端に存在する、抗原結合部位を形成する。より具体的には、抗原結合部位は、ＶＨおよびＶＬ鎖のそれぞれの上にある、３つのＣＤＲによって定義される。場合によっては、例えば、ラクダ種に由来するか、またはラクダ免疫グロブリンに基づいて改変された、特定の免疫グロブリン分子であるが、完全な免疫グロブリン分子が、軽鎖を伴わず、重鎖のみで構成され得る。例えば、Ｈａｍｅｒｓ−ＣａｓｔｅｒｍａｎらのＮａｔｕｒｅ ３６３：４４６−４４８（１９９３）を参照されたい。] [0194] 天然に存在する抗体では、各抗原結合ドメインに存在する、６つの「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、抗体が水性の環境でその３次元構成をとる時に、抗原結合ドメインを形成するように特定的に位置する、短い、非連続的な配列のアミノ酸である。抗原結合ドメイン内の残りのアミノ酸は、「フレームワーク」領域と称され、さほど分子間の多様性を示さない。フレームワーク領域は主としてβシート立体構造をとり、ＣＤＲは、βシート構造を接続し、場合によってはその一部を形成する、ループを形成する。したがって、フレームワーク領域は、鎖間の非共有結合性相互作用によって、正しい配向へのＣＤＲの位置付けを提供する、足場を形成する役割を果たす。位置付けられたＣＤＲによって形成された抗原結合ドメインは、免疫反応性抗原上のエピトープに相補的な表面を定義する。この相補的表面が、その同族エピトープへの抗体の非共有結合を促進する。ＣＤＲおよびフレームワーク領域を含むアミノ酸は、明確に定義されているため、それぞれ任意の所定の重鎖または軽鎖可変領域について、当業者によって容易に同定され得る（”Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，”Ｋａｂａｔ， Ｅ．，ｅｔ ａｌ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，（１９８３）、およびＣｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．ＭｏＩ Ｂｉｏｌ，７９６：９０１−９１７（１９８７）を参照されたく、これらは、参照することによりその全体が本明細書に組み込まれる）。] [0195] 当技術分野において使用および／または許容される用語に２つ以上の定義がある場合、本明細書で使用される用語の定義は、明示的にそうではない旨が記載されていない限り、かかる全ての意味を含むことが意図される。具体的な例は、重鎖および軽鎖の両方のポリペプチドの可変領域内に認められる、非連続的な抗原結合部位を説明するための、「相補性決定領域」（「ＣＤＲ」）という用語の使用である。この特定の領域は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９８３）およびＣｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．ＭｏＩ．Ｂｉｏｌ．７９５：９０１−９１７（１９８７）（参照することにより本明細書に組み込まれる）によって説明され、その定義は、相互に対して比較されると、アミノ酸残基の重複またはサブセットを含む。それでもなお、抗体またはその変異体のＣＤＲを指すためのいずれかの定義の適用は、本明細書で定義され、使用される用語の範囲内にあることが意図される。前掲の参考文献のそれぞれによって定義されるＣＤＲを包含する、適切なアミノ酸残基を、比較として以下の表１に記載する。特定のＣＤＲを包含する正確な残基の数は、ＣＤＲの配列および大きさに依存して異なる。当業者は、抗体の可変領域のアミノ酸配列を考慮して、どの残基が特定のＣＤＲを含むのか、日常的に断定することができる。] [0196] また、Ｋａｂａｔらは、いずれの抗体にも適用可能である、可変ドメイン配列のための付番システムも定義している。当業者は、配列自体を超える、いかなる実験データにも依存することなく、任意の可変ドメイン配列にこの「Ｋａｂａｔの付番」システムを疑いなく割り当てることができる。本明細書で使用される、「Ｋａｂａｔの付番」とは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９８３）に記載される付番システムを指す。特に指定のない限り、本発明のＲＯＮ抗体またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体中の特定のアミノ酸残基位置の付番への言及は、Ｋａｂａｔの付番システムによる。] [0197] ラクダ種において、ＶＨＨと称される重鎖可変領域は、抗原結合ドメイン全体を形成する。ラクダＶＨＨ可変領域と従来の抗体（ＶＨ）に由来するものとの間の主要な差異には、（ａ）ＶＨＨ内の対応する領域と比較して、ＶＨ軽鎖接触面におけるより疎水性のアミノ酸、（ｂ）ＶＨＨ内におけるより長いＣＤＲ３、および（ｃ）ＶＨＨ内のＣＤＲｌとＣＤＲ３との間での、ジスルフィド結合の頻発が挙げられる。] [0198] 本発明の抗体またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体には、ポリクローナル、モノクローナル、多特異性、ヒト、ヒト化、霊長類化、もしくはキメラ抗体、単鎖抗体、エピトープ結合性フラグメント、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’およびＦ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、単鎖抗体、ジスルフィド連結されたＦｖ（ｓｄＦｖ）、ＶＬもしくはＶＨドメインのいずれかを含むフラグメント、Ｆａｂ発現ライブラリーによって産生されたフラグメント、ならびに抗イディオタイプ（抗Ｉｄ）抗体（例えば、本明細書で開示されるＲＯＮ抗体に対する抗Ｉｄ抗体を含む）が含まれるが、これらに限定されない。ＳｃＦｖ分子は当技術分野において既知であり、例えば米国特許第５，８９２，０１９号に記載される。本発明の免疫グロブリンまたは抗体は、いずれの型（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２）、またはサブクラスの免疫グロブリン分子であってもよい。] [0199] 単鎖抗体を含む抗体フラグメントは、１つまたは複数の可変領域を単独で、またはヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメインの全体または一部分と組み合わせて、含み得る。また、本発明には、１つまたは複数の可変領域のヒンジ領域、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメインとの任意の組み合わせを同様に含む、抗原結合性フラグメントが含まれる。本発明の抗体またはその免疫特異的フラグメントは、鳥類および哺乳類を含む、任意の動物起源のものであり得る。好ましくは、該抗体は、ヒト、マウス、ロバ、ウサギ、ヤギ、モルモット、ラクダ、ラマ、ウマ、またはニワトリ抗体である。別の実施形態では、可変領域は、コンドリクトイド（ｃｏｎｄｒｉｃｔｈｏｉｄ）（例えば、サメ）起源であってもよい。本明細書で使用される、「ヒト」抗体には、ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を有する抗体が含まれ、以下、および例えばＫｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉらによる米国特許第５，９３９，５９８号に記載されるような、ヒト免疫グロブリンライブラリーから、または１つ以上のヒト免疫グロブリンの遺伝子導入動物から単離され、内因性免疫グロブリンを発現しない、抗体が含まれる。ヒト抗体は、抗体内でアミノ酸置換が行われても、やはり「ヒト」である。] [0200] 本明細書で使用される、「重鎖部分」という用語には、免疫グロブリの重鎖に由来するアミノ酸配列が含まれる。重鎖部分を含むポリペプチドは、ＣＨ１ドメイン、ヒンジ（例えば、上部、中央、および／または下部ヒンジ領域）ドメイン、ＣＨ２ドメイン、ＣＨ３ドメイン、またはそれらの変異体もしくはフラグメントのうちの少なくとも１つを含む。例えば、本発明で使用する結合ポリペプチドは、ＣＨ１ドメインを含むポリペプチド鎖、ＣＨ１ドメイン、ヒンジドメインの少なくとも一部分、およびＣＨ２ドメインを含むポリペブチド鎖、ＣＨ１ドメインおよびＣＨ３ドメインを含むポリペブチド鎖、ＣＨ１ドメイン、ヒンジドメインの少なくとも一部分、およびＣＨ３ドメインを含むポリペブチド鎖、またはＣＨ１ドメイン、ヒンジドメインの少なくとも一部分、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメインを含むポリペブチド鎖を含み得る。別の実施形態では、本発明のポリペプチドは、ＣＨ３ドメインを含むポリペブチド鎖を含む。さらに、本発明で使用する結合ポリペプチドは、ＣＨ２ドメインの少なくとも一部分（例えば、ＣＨ２ドメインの全てまたは一部）を欠いてもよい。上述のように、当業者には、これらのドメイン（例えば、重鎖部分）が、天然に存在する免疫グロブリン分子とはアミノ酸配列が異なるように、修飾され得ることが理解されるであろう。] [0201] 本明細書で開示される、特定のＲＯＮ抗体、またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体では、多量体の１本のポリペブチド鎖の重鎖部分は、該多量体の第２のポリペブチド鎖上のものと同一である。あるいは、本発明の重鎖部分を含有する単量体は、同一ではない。例えば、それぞれの単量体が、例えば、二重特異性抗体を形成する、異なる標的結合部位を含み得る。] [0202] 本明細書で開示される診断方法および処置方法で使用するための、結合ポリペプチドの重鎖部分は、異なる免疫グロブリン分子に由来し得る。例えば、ポリペプチドの重鎖部分は、ＩｇＧ１分子に由来するＣＨ１ドメイン、およびＩｇＧ３分子に由来するヒンジ領域を含み得る。別の例では、重鎖部分は、一部がＩｇＧ１分子に由来し、一部がＩｇＧ３分子に由来する、ヒンジ領域を含み得る。別の例では、重鎖部分は、一部がＩｇＧ１分子に由来し、一部がＩｇＧ４分子に由来する、キメラヒンジを含み得る。] [0203] 本明細書で使用される、「軽鎖部分」という用語には、免疫グロブリン軽鎖に由来するアミノ酸配列が含まれる。好ましくは、軽鎖部分は、ＶＬまたはＣＬドメインのうちの少なくとも１つを含む。] [0204] 本明細書で開示される、ＲＯＮ抗体、またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体は、抗原の１つもしくは複数のエピトープまたは１つもしくは複数の部分、例えば、それらが認識するか、または特異的に結合する、標的ポリペプチド（ＲＯＮ）に関して、説明または特定することができる。抗体の抗原結合ドメインと特異的に相互作用する標的ポリペプチドの部分が、「エピトープ」、または「抗原決定基」である。標的ポリペプチドは単一のエピトープを含み得るが、典型的には少なくとも２つのエピトープを含み、抗原の大きさ、立体構造、および型に依存して、任意の数のエピトープを含み得る。さらに、標的ポリペプチド上の「エピトープ」は、非ポリペプチド要素であり得るか、またはそれを含むことができ、例えば、「エピトープ」は、炭化水素側鎖を含み得ることに留意されたい。] [0205] 抗体のペプチドまたはポリペプチドエピトープの最小の大きさは、約４〜５個のアミノ酸であると考えられる。ペプチドまたはポリペプチドエピトープは、好ましくは少なくとも７個、より好ましくは少なくとも９個、最も好ましくは少なくとも約１５〜約３０個のアミノ酸を含有する。ＣＤＲは、３次形態の抗原性ペプチドまたはポリペプチドを認識することができるため、エピトープを含むアミノ酸は、連続的である必要はなく、場合によっては、同一ペプチド鎖上にもなくともよい。本発明では、本発明のＲＯＮ抗体によって認識されるペプチドまたはポリペプチドエピトープは、ＲＯＮの少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、より好ましくは少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、または約１５〜約３０個の連続的または非連続的なアミノ酸の配列を含有する。] [0206] 「特異的に結合する」は、概して、抗体がその抗原結合ドメインを介してエピトープに結合し、その結合が、抗原結合ドメインとエピトープとの間に何らかの相補性を伴うことを意味する。この定義に従うと、抗体が、その抗原結合ドメインを介して、無作為の、関係のないエピトープに結合するであろうよりも容易にエピトープに結合する時、抗体は、そのエピトープに「特異的に結合する」と考えられる。「特異性」という用語は、本明細書において、特定の抗体が特定のエピトープに結合する相対的親和性を条件付けるために使用される。例えば、抗体「Ａ」は、抗体「Ｂ」よりも、あるエピトープに対してより高い特異性を有すると見なすことができ、あるいは、抗体「Ａ」は、関連するエピトープ「Ｄ」に対してそれが有するよりも高い特異性で、エピトープ「Ｃ」に結合すると考えることができる。] [0207] 「優先的に結合する」は、抗体が、関連する、同様な、相同的な、または類似のエピトープに結合するであろうよりも容易に、エピトープに特異的に結合することを意味する。したがって、あるエピトープに「優先的に結合する」抗体は、かかる抗体が関連するエピトープと交差反応し得るとしても、関連するエピトープよりもそのエピトープに結合する可能性が高いであろう。] [0208] 非限定的な例として、抗体は、第１のエピトープに、第２のエピトープに対する該抗体の解離定数（ＫＤ）より小さなＫＤで結合する場合、該第１のエピトープに優先的に結合すると見なすことができる。別の非限定的な例では、抗体は、第１のエピトープに、第２のエピトープに対する該抗体のＫＤより少なくとも１桁低い親和性で結合する場合、第１の抗原に優先的に結合すると見なすことができる。別の非限定的な例では、抗体は、第２のエピトープに対する該抗体のＫＤより、少なくとも２桁低い親和性で第１のエピトープに結合する場合、第１のエピトープに優先的に結合すると見なすことができる。] [0209] 別の非限定的な例では、抗体は、第１のエピトープに、第２のエピトープに対する抗体のｋ（ｏｆｆ）より低いオフ速度（ｋ（ｏｆｆ））で結合する場合、第１のエピトープに優先的に結合すると見なすことができる。別の非限定的な例では、抗体は、第２のエピトープに対する抗体のｋ（ｏｆｆ）より少なくとも１桁低い親和性で、第１のエピトープに結合する場合、第１のエピトープに優先的に結合すると見なすことができる。別の非限定的な例では、抗体は、第１のエピトープに、第２のエピトープに対する該抗体のｋ（ｏｆｆ）より少なくとも２桁低い親和性で結合する場合、第１のエピトープに優先的に結合すると見なすことができる。] [0210] 本明細書で開示される抗体または抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体は、５×１０−２秒−１、１０−２秒−１、５×１０−３秒−１または１０−３秒−１以下のオフ速度（ｋ（ｏｆｆ））で、本明細書で開示される標的ポリペプチドまたはそのフラグメントもしくは変異体に結合すると考えることができる。より好ましくは、本発明の抗体は、５×１０−４秒−１、１０−４秒−１、５×１０−５秒−１、１０−５秒−１、５×１０−６秒−１、１０−６秒−１、５×１０−７秒−１、または１０−７秒−１以下のオフ速度（ｋ（ｏｆｆ））で、本明細書で開示される標的ポリペプチドまたはそのフラグメントもしくは変異体に結合すると考えることができる。] [0211] 本明細書で開示される、抗体または抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体は、１０３Ｍ−１秒−１、５×１０３Ｍ−１秒−１、１０４Ｍ−１秒−１、または５×１０４Ｍ−１秒−１以上のオン速度（ｋ（ｏｎ））で、本明細書で開示される標的ポリペプチドまたはそのフラグメントもしくは変異体に結合すると考えることができる。より好ましくは、本発明の抗体は、１０５Ｍ−１秒−１、５×１０５Ｍ−１秒−１、１０６Ｍ−１秒−１、５×１０６Ｍ−１秒−１、または１０７Ｍ−１秒−１以下のオン速度（ｋ（ｏｎ））で、本明細書で開示される標的ポリペプチドまたはそのフラグメントもしくは変異体に結合すると考えることができる。] [0212] 抗体は、あるエピトープへの参照抗体の結合を幾分遮断する程度まで、そのエピトープに優先的に結合する場合、該エピトープへの参照抗体の結合を競合的に阻害すると考えられる。競合的阻害は、当技術分野において既知である任意の方法、例えば、競合的ＥＬＩＳＡ検定によって、断定することができる。抗体は、あるエピトープへの参照抗体の結合を、少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％、競合的に阻害すると考えることができる。] [0213] 本明細書で使用される、「親和性」という用語は、個々のエピトープの、免疫グロブリン分子のＣＤＲとの結合の強度の度合いを指す。例えば、ＨａｒｌｏｗらのＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ ｅｄ．１９８８）の２７〜２８ページを参照されたい。本明細書で使用される、「結合力」という用語は、免疫グロブリンの集合と抗原との間の、複合体の全体的な安定性、つまり、抗原との免疫グロブリン混合物の機能的結合強度を指す。例えば、Ｈａｒｌｏｗの２９〜３４ページを参照されたい。結合力は、該集合内の個々の免疫グロブリン分子の特定のエピトープとの親和性、ならびに免疫グロブリンおよび抗原の結合価の双方に関連する。例えば、二価のモノクローナル抗体と、ポリマー等の非常に繰り返しの多いエピトープ構造を有する抗原との相互作用が、高結合力の１つであろう。] [0214] また、本発明のＲＯＮ抗体またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体は、それらの交差反応性に関しても、説明または特定することができる。本明細書で使用される、「交差反応性」という用語は、１つの抗原に特異的である抗体が、第２の抗原と反応する能力、つまり２つの異なる抗原性物質の間の関連性の度合いを指す。したがって、抗体は、その形成を誘発したもの以外のエピトープに結合する場合、交差反応する。交差反応性エピトープは、概して誘発エピトープと同一の相補的な構造特徴の多くを含有し、場合によっては、実際、元のものより良好に適合する。] [0215] 例えば、特定の抗体は、関連するが、同一ではないエピトープ、例えば、参照エピトープと少なくとも９５％、少なくとも９０％、少なくとも８５％、少なくとも８０％、少なくとも７５％、少なくとも７０％、少なくとも６５％、少なくとも６０％、少なくとも５５％、および少なくとも５０％の同一性（当技術分野において既知であり、本明細書に記載する方法を用いて算出される）を有するエピトープに結合するという点において、ある程度の交差反応性を有する。抗体は、参照エピトープと９５％未満、９０％未満、８５％未満、８０％未満、７５％未満、７０％未満、６５％未満、６０％未満、５５％未満、および５０％未満の同一性（当技術分野において既知であり、本明細書に記載する方法を用いて算出される）を有するエピトープに結合しない場合、交差反応性がほとんどまたは全くないと考えることができる。抗体は、そのエピトープのいずれの他の類似体、オルソログ、または相同体にも結合しない場合、特定のエピトープに「高度に特異的」であると見なすことができる。] [0216] また、本発明のＲＯＮ抗体またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体は、本発明のポリペプチドへのそれらの結合親和性に関しても、説明または特定することができる。好ましい結合親和性には、５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、または１０−１５Ｍ未満の解離定数またはＫｄを有するものが含まれる。] [0217] 本発明のＲＯＮ抗体またはその抗原結合性フラグメント、変異体、もしくは誘導体は、「多特異性」、例えば、二重特異性、三重特異性、またはそれを超える多特異性であり得、つまり、それは、１つ以上の異なる抗原（例えば、タンパク質）上に存在する２つ以上の異なるエピトープを、同時に認識して結合する。したがって、ＲＯＮ抗体が「単一特異性」または「多特異性」、例えば、「二重特異性」であるかどうかは、結合するポリペプチドが反応する、異なるエピトープの数を指す。多特異性抗体は、本明細書に記載される標的ポリペプチドの異なるエピトープに特異的であり得るか、あるいは標的ポリペプチド、ならびに異種ポリペプチドまたは固体支持材等の異種エピトーに特異的であり得る。] [0218] 本明細書で使用される「結合価」という用語は、可能性のある結合ドメイン、例えば、ＲＯＮ抗体、結合ポリペプチド、または抗体内に存在する抗原結合ドメインの数を指す。それぞれの結合ドメインが、１つのエピトープに特異的に結合する。ＲＯＮ抗体、結合ポリペプチド、または抗体が、１つを超える結合ドメインを含む時には、各結合ドメインが、２つの結合ドメインを有する抗体について、同一エピトープに特異的に結合し（「二価の単一特異性」と称される）、または２つの結合ドメインを有する抗体について、異なるエピトープに特異的に結合する（「二価の二重特異性」と称される）ことができる。また、抗体は、それぞれの特異性について二重特異性および二価であり得る（「二重特異性の四価抗体」と称される）。別の実施形態では、四価のミニボディまたはドメイン欠失抗体を作製することができる。] [0219] 二重特異性の二価抗体、およびそれらの作製方法は、例えば、米国特許第５，７３１，１６８号、第５，８０７，７０６号、第５，８２１，３３３号、ならびに米国出願公開第２００３／０２０７３４号および第２００２／０１５５５３７号に記載され、それら全ての開示は、参照することにより本明細書に組み込まれる。二重特異性の四価抗体、およびそれらの作成方法は、例えばＷＯ第０２／０９６９４８号およびＷＯ第００／４４７８８号に記載され、これらの双方の開示は、参照することにより本明細書に組み込まれる。概して、ＰＣＴ公開ＷＯ第９３／１７７１５号、ＷＯ第９２／０８８０２号、ＷＯ第９１／００３６０号、ＷＯ第９２／０５７９３号、Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０−６９（１９９１）、米国特許第４，４７４，８９３号、第４，７１４，６８１号、第４，９２５，６４８号、第５，５７３，９２０号、第５，６０１，８１９号、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７４５：１５４７−１５５３（１９９２）を参照されたい。] [0220] 前述のように、種々の免疫グロブリンクラスの定常領域の、サブユニット構造および３次元構成は、周知である。本明細書で使用される、「ＶＨドメイン」という用語には、免疫グロブリン重鎖のアミノ末端の可変ドメインが含まれ、「ＣＨ１ドメイン」という用語には、免疫グロブリン重鎖の最初の（最もアミノ末端側の）定常領域ドメインが含まれる。ＣＨ１ドメインはＶＨドメインに隣接し、免疫グロブリン重鎖分子のヒンジ領域に対してアミノ末端側に位置する。] [0221] 本明細書で使用される「ＣＨ２ドメイン」という用語には、例えば、従来の付番スキームを使用して、抗体の約残基２４４から残基３６０へと延びる、重鎖分子の部分が含まれる（Ｋａｂａｔの付番システムでは残基２４４〜３６０、およびＥＵの付番システムでは残基２３１〜３４０、Ｋａｂａｔ ＥＡらの前掲書を参照）。ＣＨ２ドメインは、別のドメインと密接に対をなさないという点において、独特である。そうなるのではなく、２つのＮ結合型分岐糖鎖が、無傷の未変性ＩｇＧ分子の２つのＣＨ２ドメインの間に入る。また、ＣＨ３ドメインが、ＩｇＧ分子のＣＨ２ドメインからＣ末端へと延び、約１０８個の残基を含むことが、十分に裏付けられている。] [0222] 本明細書で使用される、「ヒンジ領域」という用語には、ＣＨ１ドメインをＣＨ２ドメインに接合する、重鎖分子の部分が含まれる。このヒンジ領域は約２５個の残基を含み、柔軟であるため、２つのＮ末端の抗原結合領域は、独立して動くことができる。ヒンジ領域は、上部、中央、および下部ヒンジドメインの、３つのはっきりと異なるドメインにさらに分割することができる（Ｒｏｕｘ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．７６７：４０８３（１９９８））。] [0223] 本明細書で使用される「ジスルフィド結合」という用語には、２個の硫黄原子の間に形成される共有結合が含まれる。アミノ酸システインは、チオール基を含み、これは、第２のチオール基とジスルフィド結合または架橋を形成することができる。ほとんどの天然に存在するＩｇＧ分子では、ＣＨ１およびＣＬ領域がジスルフィド結合によって連結され、２本の重鎖は、Ｋａｂａｔの付番システムを使用すると２３９および２４２に相当する位置（位置２２６または２２９、ＥＵ付番システム）で、２つのジスルフィド結合によって連結される。] [0224] 本明細書で使用される、「キメラ抗体」という用語は、免疫反応領域または部位が第１の種から得られるか、またはそれに由来し、定常領域（無傷、部分であるか、または本発明にしたがって修飾され得る）が第２の種から得られる、任意の抗体を意味するとする。好ましい実施形態では、標的結合領域または部位は、非ヒト起源（例えばマウスまたは霊長類）のものであり、定常領域は、ヒトである。] [0225] 本明細書で使用される、「改変抗体」という用語は、重鎖および軽鎖または両方のいずれかの可変ドメインが、既知の特異性の抗体から１つ以上のＣＤＲを少なくとも部分的に置換することにより、また必要な場合は、部分的なフレームワーク領域の置換および配列の変更によって改質される、抗体を指す。ＣＤＲは、フレームワーク領域が由来する抗体と同じクラス、またはさらにはサブクラスの抗体に由来し得るが、ＣＤＲが異なるクラスの抗体、好ましくは異なる種からの抗体に由来することが想定される。既知の特異性の非ヒト抗体からの１つ以上の「供与体」ＣＤＲが、ヒト重鎖または軽鎖フレームワーク領域に移植される改変抗体を、本明細書では「ヒト化抗体」と称する。１つの可変ドメインの抗原結合能を別のものに移入するために、必ずしも、全てのＣＤＲを供与体の可変領域からの完全なＣＤＲと置換する必要があるとは限らない。むしろ、標的結合部位の活性を維持するために必要である残基を移入することのみが、必要であり得る。例えば、米国特許第５，５８５，０８９号、第５，６９３，７６１号、第５，６９３，７６２号、および第６，１８０，３７０号に記載される説明を考慮すると、日常的な実験または試行錯誤による試験のいずれかを行うことによって、機能的な改変抗体またはヒト化抗体を得ることは、十分に当業者の能力内であるだろう。] [0226] 本明細書で使用される「適切に折り畳まれたポリペプチド」という用語には、該ポリペプチドを成す機能ドメインの全てが明瞭に活性を有する、ポリペプチド（例えば、ＲＯＮ抗体）が含まれる。本明細書で使用される、「不適切に折り畳まれたポリペプチド」という用語には、該ポリペプチドの機能ドメインのうちの少なくとも１つが活性を有しない、ポリペプチドが含まれる。一実施形態において、適切に折り畳まれたポリペプチドは、少なくとも１つのジスルフィド結合によって連結されるポリペブチド鎖を含み、逆に、不適切に折り畳まれたポリペプチドは、少なくとも１つのジスルフィド結合によって連結されないポリペブチド鎖を含む。] [0227] 本明細書で使用される「改変された」という用語には、合成手段による（例えば、ペプチドの酵素もしくは化学的結合による、組換え技法、生体外ペプチド合成、またはこれらの技法の何らかの組み合わせによる）、核酸またはポリペプチド分子の操作が含まれる。] [0228] 本明細書で使用される、「連結された」、「融合された」、または「融合」という用語は、交換可能に使用される。これらの用語は、化学的共役または組換え手段を含む任意の手段によって、２つ以上の要素または構成成分を共に接合することを指す。「インフレーム融合」とは、２つ以上のポリヌクレオチドのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を接合して、元のＯＲＦの正しい翻訳読み枠を維持する様態で、連続的なより長いＯＲＦを形成することを指す。したがって、組換え融合タンパク質は、元のＯＲＦ（通常では、セグメントが本来そのように接合されていない）によってコードされるポリペプチドに対応する、２つ以上のセグメントを含有する、単一のタンパク質である。該読み枠は、このように融合されたセグメントを通じて連続的にされるが、該セグメントは、例えば、インフレームリンカー配列によって、物理的または空間的に分離することができる。例えば、免疫グロブリン可変領域のＣＤＲをコードするポリヌクレオチドを、インフレームで融合することができるが、「融合された」ＣＤＲが、連続的なポリペプチドの一部として共翻訳される限り、少なくとも１つの免疫グロブリンフレームワーク領域またはさらなるＣＤＲ領域をコードするポリヌクレオチドによって、分離することができる。] [0229] ポリペプチドの文脈において、「線状配列」または「配列」とは、配列内で相互に隣り合う残基が、ポリペプチドの一次構造中で連続的である、アミノからカルボキシル末端への方向の、ポリペプチド中のアミノ酸の順序である。] [0230] 本明細書で使用される「発現」という用語は、遺伝子が、生化学物質、例えば、ＲＮＡまたはポリペプチドを産生する過程を指す。該過程には、限定されないが、遺伝子ノックダウン、ならびに一過性発現および安定発現の両方を含む、細胞内の遺伝子の機能的存在の、任意の操作が含まれる。それには、遺伝子の、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、転移ＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、または任意の他のＲＮＡ産物の転写、ならびにかかるｍＲＮＡの１つまたは複数のポリペプチドへの翻訳が含まれるが、これらに限定されない。所望の最終産物が生化学物質である場合、発現には、該生化学物質およびいずれかの前駆体の生成が含まれる。遺伝子の発現が、「遺伝子産物」を産生する。本明細書で使用される、遺伝子産物とは、核酸、例えば、遺伝子の転写によって産生されるメッセンジャーＲＮＡ、または転写物から翻訳されるポリペプチドのいずれかであり得る。本明細書に記載される遺伝子産物には、転写後修飾、例えば、ポリアデニル化を伴う核酸、または翻訳後修飾、例えば、メチル化、グリコシル化、脂質の付加、他のタンパク質サブユニットとの関連付け、タンパク質切断等を伴うポリペプチドが、さらに含まれる。] [0231] 本明細書で使用される、「処置する」または「処置」という用語は、治療的処置および予防もしくは阻止措置を指し、目的は、癌の発生または拡散等の所望されない生理学的変化または疾患を、阻止または鈍化（軽減）することである。有益または所望の臨床結果には、検出可能であるか検出不能であるかにかかわらず、症状の緩和、疾病の程度の軽減、病状の安定化（即ち、悪化しない）、疾病の進行の遅延もしくは鈍化、病状の回復もしくは緩和、および緩解（部分的であるか完全であるかにかかわらず）が含まれるが、これらに限定されない。また、「処置」は、処置を受けない場合に予期される生存と比較した、生存の延長を意味することができる。処置を必要とするものには、すでに該病態または疾患を有するもの、ならびに該病態もしくは疾患を有する傾向があるもの、または該病態または疾患を阻止すべきであるものが含まれる。] [0232] 「対象」または「個人」または「動物」または「患者」または「哺乳動物」によって、診断、予後、または療法が所望される任意の対象、特に哺乳動物対象を意味する。哺乳動物対象には、ヒト、家畜、飼育動物、ならびにイヌ、ネコ、モルモット、ウサギ、ラット、マウス、ウマ、ウシ、雌ウシ等の動物園、スポーツ、もしくは愛玩動物が挙げられる。] [0233] 本明細書で使用される、「結合分子の投与から利益を得るであろう対象」および「処置を必要とする動物」等の語句には、例えば、結合分子によって認識される抗原の検出に（例えば、診断法として）使用される、結合分子の投与から、および／またはある標的タンパク質に特異的に結合する結合分子を用いた、処置、即ち、癌等の疾病の緩和もしくは阻止から、利益を受けるであろう、哺乳動物対象等の対象が含まれる。本明細書でより詳細に説明するように、該結合分子は、非共役型で使用することができ、あるいは、例えば、薬物、プロドラッグ、または同位体に共役することができる。] [0234] 「過剰増殖性疾病または疾患」は、悪性であるか良性であるかにかかわらず、全ての形質転換細胞および組織、ならびに全ての癌性細胞および組織を含む、全ての新生細胞の成長および増殖を意味する。過剰増殖性疾病または疾患には、前癌性病変、異常細胞成長、良性腫瘍、悪性腫瘍、および「癌」が含まれるが、これらに限定されない。本発明の特定の実施形態において、過剰増殖性疾病または疾患、例えば、前癌性病変、異常細胞成長、良性腫瘍、悪性腫瘍、または「癌」は、ＲＯＮを発現、過剰発現、または異常発現する、細胞を含む。] [0235] 過剰増殖性疾病、疾患、および／または病態のさらなる例には、良性であるか悪性であるかにはかかわらず、前立腺、結腸、腹部、骨、乳房、消化器系、肝臓、膵臓、腹膜、内分泌腺（副腎、副甲状腺、下垂体、精巣、卵巣、胸腺、甲状腺）、眼、頭頸部、神経（中枢および抹消）、リンパ系、骨盤、皮膚、軟組織、脾臓、胸部、および尿生殖路に位置する新生物が含まれるが、これに限定されない。かかる新生物は、特定の実施形態において、ＲＯＮを発現、過剰発現、または異常発現する。] [0236] 他の過剰増殖性疾患には、高ガンマグロブリン血症、リンパ球増殖性疾患、異常蛋白血症、紫斑病、サルコイドーシス、セザリー症候群、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、ゴーシェ病、組織球増殖症、および、新形成以外の、上に列記した器官系に位置する任意の他の過剰増殖性疾病が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の特定の実施形態において、該疾病は、ＲＯＮを発現、過剰発現、または異常発現する細胞を伴う。] [0237] 本明細書で使用される、「腫瘍」または「腫瘍組織」という用語は、過剰な細胞分裂に起因する組織、特定の場合においては、ＲＯＮを発現、過剰発現、または異常発現する細胞を含む組織の異常な集団を指す。腫瘍または腫瘍組織は、異常な成長特性を伴い、有用な生体機能を持たない新生細胞である、「腫瘍細胞」を含む。腫瘍、腫瘍組織、および腫瘍細胞は、良性または悪性であり得る。また、腫瘍または腫瘍組織は、「腫瘍に関連する非腫瘍細胞」、例えば、腫瘍または腫瘍組織に供給するための血管を形成する、血管細胞を含むことができる。非腫瘍細胞は、例えば、腫瘍または腫瘍組織における血管新生の誘発のように、腫瘍細胞によって複製または発生を誘発され得る。] [0238] 本明細書で使用される、「悪性腫瘍」という用語は、非良性腫瘍または癌を指す。本明細書で使用される、「癌」という用語は、無秩序な、または制御されない細胞成長によって特徴付けられる悪性腫瘍を含む、過剰増殖性疾病の種類を含意する。癌の例には、細胞腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、および白血病もしくはリンパ性悪性腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。かかる癌のより特定の例は、以下に記され、有棘細胞癌（例えば扁平上皮癌）、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、および肺の有棘細胞腫を含む肺癌、腹膜癌、肝細胞癌、胃腸癌を含む胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）もしくは胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、膵臓癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、へパトーマ、乳癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌もしくは子宮癌、唾液腺癌、腎癌もしくは腎臓癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝細胞癌、肛門癌、陰茎癌、ならびに頭頸部癌が挙げられる。「癌」という用語には、原発性悪性細胞または腫瘍（例えば、細胞が、対象体内の、元の悪性腫瘍または腫瘍の部位以外の部位に遊走していないもの）、ならびに続発性悪性細胞または腫瘍（例えば、転移、即ち悪性細胞または腫瘍細胞の、元の腫瘍の部位とは異なる二次的な部位への遊走から生じるもの）が含まれる。本発明の処置方法につながる癌は、ＲＯＮを発現、過剰発現、または異常発現する細胞を伴う。] [0239] 癌または悪性腫瘍の他の例には、急性小児リンパ芽球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、成人（原発性）肝細胞癌、成人（原発性）肝臓癌、成人急性リンパ性白血病、成人急性骨髄性白血病、成人ホジキン病、成人ホジキンリンパ腫、成人リンパ性白血病、成人非ホジキンリンパ腫、成人原発性肝臓癌、成人軟部組織肉腫、エイズ関連リンパ腫、エイズ関連悪性腫瘍、肛門癌、星状細胞腫、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳幹神経膠腫、脳腫瘍、乳癌、腎盂尿管癌、中枢神経系（原発性）リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、小脳星細胞腫、大脳星細胞腫、子宮頸癌、小児（原発性）肝細胞癌、小児（原発性）肝臓癌、小児急性リンパ芽球性白血病、小児急性骨髄性白血病、小児脳幹神経膠腫、小児小脳星細胞腫、小児大脳星細胞腫、小児頭蓋外胚細胞腫瘍、小児ホジキン病、小児ホジキンリンパ腫、小児視床下部および視経路グリオーマ、小児リンパ芽球性白血病、小児髄芽腫、小児非ホジキンリンパ腫、小児松果体およびテント上原始神経外胚葉性腫瘍、小児原発性肝臓癌、小児横紋筋肉腫、小児軟部組織肉腫、小児視経路および視床下部グリオーマ、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、結腸癌、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、内分泌性膵島細胞腫、子宮内膜癌、上衣腫、上皮性癌、食道癌、ユーイング肉腫および関連腫瘍、外分泌性膵臓癌、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、肝外胆管癌、眼癌、女性乳癌、ゴーシェ病、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、胃腸腫瘍、胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、ヘアリー細胞白血病、頭頸部癌、肝細胞癌、ホジキン病、ホジキンリンパ腫、高ガンマグロブリン血症、下咽頭癌、腸癌、眼球内黒色腫、膵島細胞種、膵島細胞膵臓癌、カポジ肉腫、腎癌、喉頭癌、口唇癌および口腔癌、肝臓癌、肺癌、リンパ球増殖性疾患、マクログロブリン血症、男性乳癌、悪性中皮腫、悪性胸腺腫、髄芽腫、黒色腫、中皮腫、転移性不明原発扁平上皮頸部癌、転移性原発扁平上皮頸部癌、転移性扁平上皮頸部癌、多発性骨髄腫、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、骨髄異形成症候群、骨髄性白血病、骨髄性白血病、骨髄増殖性疾患、鼻腔および副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽腫、妊娠中の非ホジキンリンパ腫、非黒色腫皮膚癌、非小細胞肺癌、転移性不明原発扁平上皮頸部癌、中咽頭癌、骨／悪性線維性肉腫、骨肉腫／悪性線維性組織球腫、骨肉腫／骨の悪性線維性組織球腫、上皮性卵巣癌、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、膵臓癌、異常蛋白血症、紫斑病、副甲状腺癌、陰茎癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、形質細胞腫瘍／多発性骨髄腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性肝臓癌、前立腺癌、直腸癌、腎細胞癌、腎盂尿管癌、網膜芽腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、サルコイドーシス肉腫、セザリー症候群、皮膚癌、小細胞肺癌、小腸癌、軟部組織肉腫、扁平上皮頸部癌、胃癌、テント上原始神経外胚葉性および松果体腫瘍、Ｔ細胞性リンパ腫、精巣癌、胸腺腫、甲状腺癌、腎盂尿管移行上皮癌、移行腎盂尿管癌、絨毛性腫瘍、尿管および腎盂細胞癌、尿道癌、子宮癌、子宮肉腫、膣癌、視経路および視床下部グリオーマ、外陰部癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、ウィルムス腫瘍、ならびに、新形成以外の、上に列記した器官系に位置する任意の他の過剰増殖性疾病が挙げられるが、これらに限定されない。] [0240] 本発明の方法を使用して、前悪性状態を処置し、上記の疾患を含むが、これらに限定されない、新生物または悪性の状態への進行を阻止することができる。かかる使用は、新形成もしくは癌への進行に先行すると知られるか、またはそれが疑われる状態、特に、過形成、化生、もしくは中でもとりわけ異形成からなる非新生細胞成長が生じた場合、望ましい（かかる異常成長状態の概説としては、Ｒｏｂｂｉｎｓ ａｎｄ Ａｎｇｅｌｌ，Ｂａｓｉｃ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２ｄ Ｅｄ．，Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ｐｐ．６８−７９（１９７６）を参照されたい）。細胞がＲＯＮを発現、過剰発現、または異常発現し始めるかかる状態は、本発明の方法によって特に処置可能である。] [0241] 過形成は、構造または機能を著しく変化させることなく、組織または器官中の細胞数の増加を伴う、制御された細胞増殖の形態である。本発明の方法によって処置され得る過形成疾患には、血管濾胞性縦隔リンパ節過形成、好酸球増多を伴う血管リンパ組織過形成、異型メラニン細胞過形成、基底細胞過形成、良性巨大リンパ節過形成、セメント質過形成、先天性副腎過形成、先天性皮脂腺過形成、嚢胞性過形成、乳房嚢胞性過形成、義歯性過形成、乳管過形成、子宮内膜過形成、線維筋性過形成、局所性上皮過形成、歯肉過形成、炎症性線維性過形成、炎症性乳頭過形成、血管内乳頭内皮過形成、前立腺結節性過形成、結節性再生性過形成、偽上皮腫性過形成、老年性皮脂腺過形成、および疣贅性過形成が挙げられるが、これらに限定されない。]
权利要求: 請求項1 Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体と同一のＲＯＮエピトープに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメント。 請求項2 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体が、ＲＯＮに結合するのを競合的に阻害する、抗体またはそのフラグメント。 請求項3 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはその抗原結合性フラグメントであって、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択されるモノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体のものと同一の抗原結合ドメインを含む、前記抗体またはそのフラグメント。 請求項4 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントの重鎖可変領域（ＶＨ）は、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項5 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントの軽鎖可変領域（ＶＬ）は、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項6 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項7 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＬは、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項8 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項9 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＬは、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択されるアミノ酸配列含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項10 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨおよびＶＬは、それぞれ、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項11 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨおよびＶＬは、それぞれ２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一のアミノ酸配列をそれぞれ含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項12 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨおよびＶＬは、配列番号４および配列番号９、配列番号１４および配列番号１９、配列番号２４および配列番号２９、配列番号３４および配列番号３９、配列番号４４および配列番号４９、配列番号５４および配列番号５９、配列番号６４および配列番号６９、配列番号７４および配列番号７９、配列番号８４および配列番号８９、配列番号９４および配列番号９９、配列番号１１５および配列番号１２０、配列番号１２５および配列番号１３０、配列番号１３５および配列番号１４０、ならびに配列番号１４５および配列番号１５０からなる群から選択されるアミノ酸配列をそれぞれ含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項13 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一の、Ｋａｂａｔの重鎖相補性決定領域−１（ＶＨ−ＣＤＲ１）のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項14 前記ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される、請求項１３に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項15 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一の、Ｋａｂａｔの重鎖相補性決定領域−２（ＶＨ−ＣＤＲ２）のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項16 前記ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される、請求項１５に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項17 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一の、Ｋａｂａｔの重鎖相補性決定領域−３（ＶＨ−ＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項18 前記ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される、請求項１７に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項19 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＬは、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一の、Ｋａｂａｔの軽鎖相補性決定領域−１（ＶＬ−ＣＤＲ１）のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項20 前記ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される、請求項１９に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項21 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＬは、２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一の、Ｋａｂａｔの軽鎖相補性決定領域−２（ＶＬ−ＣＤＲ２）のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項22 前記ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される、請求項２１に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項23 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一の、Ｋａｂａｔの軽鎖相補性決定領域−３（ＶＬ−ＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項24 前記ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される、請求項２３に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項25 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択されるＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むが、但し、前記ＶＨ−ＣＤＲのうちの少なくとも１つの１、２、３、または４個のアミノ酸置換は除かれる、抗体またはそのフラグメント。 請求項26 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＨは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項27 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントのＶＬは、配列番号１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択されるＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、およびＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むが、但し、前記ＶＬ−ＣＤＲのうちの少なくとも１つの１、２、３、または４個のアミノ酸置換は除かれる、抗体またはそのフラグメント。 請求項28 ＲＯＮに特異的に結合する、単離された抗体またはそのフラグメントであって、前記抗体またはそのフラグメントは、配列番号１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択される、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、およびＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、抗体またはそのフラグメント。 請求項29 ＶＨフレームワーク領域が、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである、請求項１〜２８のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項30 ＶＬフレームワーク領域が、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである、請求項１〜２９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項31 線状エピトープに結合する、請求項１〜３０のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項32 非線状の立体構造エピトープに結合する、請求項１〜３０のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項33 多価であり、少なくとも２本の重鎖および少なくとも２本の軽鎖を含む、請求項１〜３２のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項34 多特異性である、請求項１〜３３のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項35 二重特異性である、請求項３４に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項36 二重特異性である、請求項１〜３５のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項37 重鎖および軽鎖可変ドメインが、マウスである、請求項１〜３６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項38 前記重鎖および軽鎖可変ドメインは、１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択されるモノクローナル抗体からのものである、請求項３７に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項39 重鎖および軽鎖可変ドメインが完全にヒトである、請求項１〜３６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項40 前記重鎖および軽鎖可変ドメインは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択されるモノクローナルＦａｂ抗体フラグメントからのものである、請求項３９に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項41 ヒト化される、請求項１〜３６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項42 キメラである、請求項１〜３６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項43 霊長類化される、請求項１〜３６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項44 完全にヒトである、請求項１〜３６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項45 Ｆａｂフラグメントである、請求項１〜４４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項46 Ｆａｂ’フラグメントである、請求項１〜４４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項47 Ｆ（ａｂ）２フラグメントである、請求項１〜４４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項48 Ｆｖフラグメントである、請求項１〜４４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項49 単鎖抗体である、請求項１〜４４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項50 ヒトカッパ定常領域およびヒトラムダ定常領域からなる群から選択される、軽鎖定常領域を含む、請求項１〜４６および４９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項51 重鎖定常領域またはそのフラグメントを含む、請求項１〜４６および４９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項52 前記重鎖定常領域またはそのフラグメントは、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ４アグリ、ＩｇＧ１、およびＩｇＧ１アグリからなる群から選択される、請求項５１に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項53 前記参照モノクローナル抗体の解離定数（ＫＤ）より小さいＫＤによって特徴付けられる親和性で、ＲＯＮポリペプチドもしくはそのフラグメント、またはＲＯＮ変異体ポリペプチドに特異的に結合する、請求項１〜５２のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項54 ５×１０−２Ｍ、１０−２Ｍ、５×１０−３Ｍ、１０−３Ｍ、５×１０−４Ｍ、１０−４Ｍ、５×１０−５Ｍ、１０−５Ｍ、５×１０−６Ｍ、１０−６Ｍ、５×１０−７Ｍ、１０−７Ｍ、５×１０−８Ｍ、１０−８Ｍ、５×１０−９Ｍ、１０−９Ｍ、５×１０−１０Ｍ、１０−１０Ｍ、５×１０−１１Ｍ、１０−１１Ｍ、５×１０−１２Ｍ、１０−１２Ｍ、５×１０−１３Ｍ、１０−１３Ｍ、５×１０−１４Ｍ、１０−１４Ｍ、５×１０−１５Ｍ、または１０−１５Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）によって特徴付けられる親和性で、ＲＯＮポリペプチドもしくはそのフラグメント、またはＲＯＮ変異体ポリペプチドに特異的に結合する、請求項１〜５３のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項55 マウスＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントと比較して、ヒトＲＯＮポリペプチドまたはそのフラグメントに優先的に結合する、請求項１〜５４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項56 細胞の表面に発現したＲＯＮに結合する、請求項１〜５５のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項57 前記細胞は、悪性細胞、新生細胞、腫瘍細胞、転移性細胞、または腫瘍関連マクロファージである、請求項５６に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項58 ＭＳＰのＲＯＮへの結合を遮断する、請求項１〜５７のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項59 ＲＯＮのＭＳＰ依存性活性化を阻害する、請求項１〜５８のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項60 ＲＯＮのＭＳＰ非依存性活性化を阻害する、請求項１〜５９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項61 ＲＯＮが媒介するＲＡＳ／ＭＡＰＫシグナリング経路の活性化を阻害する、請求項１〜６０のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項62 ＲＯＮが媒介するＥＲＫまたはＡＫＴのリン酸化を阻害する、請求項１〜６１のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項63 ＲＯＮが媒介する細胞増殖を阻害する、請求項１〜６２のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項64 腫瘍細胞成長、腫瘍細胞浸潤、または腫瘍細胞転移を阻害する、請求項１〜６３のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項65 アポトーシスを誘発する、請求項１〜６４のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項66 融合される異種ポリペプチドをさらに含む、請求項１〜６５のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項67 前記抗体は、細胞傷害性薬剤、治療薬、細胞分裂阻害剤、生物毒素、プロドラッグ、ペプチド、タンパク質、酵素、ウイルス、脂質、生体応答修飾物質、医薬品、リンホカイン、異種抗体もしくはそのフラグメント、検出可能な標識、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびいずれかの前記薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される薬剤に共役される、請求項１〜６６のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項68 前記細胞傷害性薬剤は、放射性核種、生体毒素、酵素的に活性な毒素、細胞分裂阻害治療薬もしくは細胞傷害性治療薬、プロドラッグ、免疫学的に活性なリガンド、生体応答修飾物質、またはいずれかの前記細胞傷害性薬剤のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、請求項６７に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項69 前記検出可能な標識は、酵素、蛍光標識、化学発光標識、生物発光標識、放射性標識、またはいずれかの前記検出可能な標識のうちの２つ以上の組み合わせからなる群から選択される、請求項６８に記載の抗体またはそのフラグメント。 請求項70 請求項１〜６９のうちのいずれか１項に記載の抗体またはそのフラグメント、および担体を含む、組成物。 請求項71 抗体ＶＨポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一であり、前記ＶＨポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項72 前記ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される、請求項７１に記載のポリヌクレオチド。 請求項73 前記ＶＨポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、前記ＶＨポリペプチドの前記アミノ酸配列を変化させずに、発現を増加するために最適化される、請求項７１または７２に記載のポリヌクレオチド。 請求項74 前記最適化は、スプライス供与部位およびスプライス受容部位の同定および除去を含む、請求項７３に記載のポリヌクレオチド。 請求項75 前記最適化は、前記ポリヌクレオチドを発現する細胞に対するコドン使用頻度の最適化を含む、請求項７３または７４に記載のポリヌクレオチド。 請求項76 前記核酸は、配列番号３、配列番号１３、配列番号２３、配列番号３３、配列番号４３、配列番号５３、配列番号６３、配列番号７３、配列番号８３、配列番号９３、配列番号１１４、配列番号１２４、配列番号１３４、および配列番号１４４からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項７１〜７５のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項77 抗体ＶＬポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と、少なくとも９０％同一であり、前記ＶＬポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項78 前記ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列は、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される、請求項７７に記載のポリヌクレオチド。 請求項79 前記ＶＬポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、前記ＶＬポリペプチドの前記アミノ酸配列を変化させずに、発現を増加するために最適化される、請求項７７または７８に記載のポリヌクレオチド。 請求項80 前記最適化は、スプライス供与部位およびスプライス受容部位の同定および除去を含む、請求項７９に記載のポリヌクレオチド。 請求項81 前記最適化は、前記ポリヌクレオチドを発現する細胞に対するコドン使用頻度の最適化を含む、請求項７９または８０に記載のポリヌクレオチド。 請求項82 前記核酸は、配列番号８、配列番号１８、配列番号２８、配列番号３８、配列番号４８、配列番号５８、配列番号６８、配列番号７８、配列番号８８、配列番号９８、配列番号１１９、配列番号１２９、配列番号１３９、および配列番号１４９からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項７７〜８１のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項83 抗体ＶＨポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＨポリペプチドのアミノ酸配列は、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号４、配列番号１４、配列番号２４、配列番号３４、配列番号４４、配列番号５４、配列番号６４、配列番号７４、配列番号８４、配列番号９４、配列番号１１５、配列番号１２５、配列番号１３５、および配列番号１４５からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一であり、前記ＶＨポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項84 抗体ＶＬポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＬポリペプチドのアミノ酸配列は、２０個以下の保存的アミノ酸置換を除いて、配列番号９、配列番号１９、配列番号２９、配列番号３９、配列番号４９、配列番号５９、配列番号６９、配列番号７９、配列番号８９、配列番号９９、配列番号１２０、配列番号１３０、配列番号１４０、および配列番号１５０からなる群から選択される参照アミノ酸配列と同一であり、前記ＶＬポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項85 ２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一である、ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＨ−ＣＤＲ１を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項86 前記ＶＨ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号５、配列番号１５、配列番号２５、配列番号３５、配列番号４５、配列番号５５、配列番号６５、配列番号７５、配列番号８５、配列番号９５、配列番号１１６、配列番号１２６、配列番号１３６、および配列番号１４６からなる群から選択される、請求項８５に記載のポリヌクレオチドまたはそのフラグメント。 請求項87 ４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一である、ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＨ−ＣＤＲ２を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項88 前記ＶＨ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号６、配列番号１６、配列番号２６、配列番号３６、配列番号４６、配列番号５６、配列番号６６、配列番号７６、配列番号８６、配列番号９６、配列番号１１７、配列番号１２７、配列番号１３７、および配列番号１４７からなる群から選択される、請求項８７に記載のポリヌクレオチドまたはそのフラグメント。 請求項89 ４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される参照ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一である、ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＨ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項90 前記ＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号７、配列番号１７、配列番号２７、配列番号３７、配列番号４７、配列番号５７、配列番号６７、配列番号７７、配列番号８７、配列番号９７、配列番号１１８、配列番号１２８、配列番号１３８、および配列番号１４８からなる群から選択される、請求項８９に記載のポリヌクレオチドまたはそのフラグメント。 請求項91 ４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列と同一である、ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＬ−ＣＤＲ１を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項92 前記ＶＬ−ＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号１０、配列番号２０、配列番号３０、配列番号４０、配列番号５０、配列番号６０、配列番号７０、配列番号８０、配列番号９０、配列番号１００、配列番号１２１、配列番号１３１、配列番号１４１、および配列番号１５１からなる群から選択される、請求項９１に記載のポリヌクレオチドまたはそのフラグメント。 請求項93 ２個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列と同一である、ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＬ−ＣＤＲ２を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項94 前記ＶＬ−ＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号１１、配列番号２１、配列番号３１、配列番号４１、配列番号５１、配列番号６１、配列番号７１、配列番号８１、配列番号９１、配列番号１０１、配列番号１２２、配列番号１３２、配列番号１４２、および配列番号１５２からなる群から選択される、請求項９３に記載のポリヌクレオチドまたはそのフラグメント。 請求項95 ４個以下のアミノ酸置換を除いて、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される参照ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列と同一である、ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列をコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＬ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項96 前記ＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号１２、配列番号２２、配列番号３２、配列番号４２、配列番号５２、配列番号６２、配列番号７２、配列番号８２、配列番号９２、配列番号１０２、配列番号１２３、配列番号１３３、配列番号１４３、および配列番号１５３からなる群から選択される、請求項９５に記載のポリヌクレオチドまたはそのフラグメント。 請求項97 抗体ＶＨポリペプチドをコードする核酸を含む、単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＨポリペプチドは、配列番号５、６、および７、配列番号１５、１６、および１７、配列番号２５、２６、および２７、配列番号３５、３６、および３７、配列番号４５、４６、および４７、配列番号５５、５６、および５７、配列番号６５、６６、および６７、配列番号７５、７６、および７７、配列番号８５、８６、および８７、配列番号９５、９６、および９７、配列番号１１６、１１７、および１１８、配列番号１２６、１２７、および１２８、配列番号１３６、１３７、および１３８、ならびに配列番号１４６、１４７、および１４８からなる群から選択される、ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、およびＶＨ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、前記ＶＨ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項98 抗体ＶＬポリペプチドをコードする核酸を含む単離されたポリヌクレオチドであって、前記ＶＬポリペプチドは、１０、１１、および１２、配列番号２０、２１、および２２、配列番号３０、３１、および３２、配列番号４０、４１、および４２、配列番号５０、５１、および５２、配列番号６０、６１、および６２、配列番号７０、７１、および７２、配列番号８０、８１、および８２、配列番号９０、９１、および９２、配列番号１００、１０１、および１０２、配列番号１２１、１２２、および１２３、配列番号１３１、１３２、および１３３、配列番号１４１、１４２、および１４３、ならびに配列番号１５１、１５２、および１５３からなる群から選択される、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、およびＶＬ−ＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、前記ＶＬ−ＣＤＲ３を含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ＲＯＮに特異的に結合する、ポリヌクレオチド。 請求項99 前記抗体ＶＨポリペプチドに融合されたシグナルペプチドをコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜９８のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項100 前記抗体ＶＬポリペプチドに融合されたシグナルペプチドをコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜９８のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項101 前記ＶＨポリペプチドに融合された重鎖定常領域ＣＨ１ドメインをコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜１００のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項102 前記ＶＨポリペプチドに融合された重鎖定常領域ＣＨ２ドメインをコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜１０１のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項103 前記ＶＨポリペプチドに融合された重鎖定常領域ＣＨ３ドメインをコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜１０２のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項104 前記ＶＨポリペプチドに融合された重鎖ヒンジ領域をコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜１０３のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項105 前記重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ４、ＩｇＧ４アグリ、ＩｇＧ１、およびＩｇＧ１アグリからなる群から選択される、請求項１０１〜１０４のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項106 前記ＶＬポリペプチドに融合された軽鎖定常領域ドメインをコードする核酸をさらに含む、請求項７１〜１０５のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項107 前記軽鎖定常領域は、ヒトカッパである、請求項１０６に記載のポリヌクレオチド。 請求項108 前記核酸によってコードされるポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体と同一のＲＯＮエピトープに特異的に結合する、請求項７１〜１０７のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項109 前記核酸によってコードされるポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８Ｏ−ＢＯ３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択される参照モノクローナルＦａｂ抗体フラグメント、または１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択される参照モノクローナル抗体を競合的に阻害する、請求項７１〜１０８のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項110 前記ＶＨポリペプチドのフレームワーク領域が、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである、請求項７１〜１０９のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項111 前記ＶＬポリペプチドのフレームワーク領域が、５個以下のアミノ酸置換を除いてヒトである、請求項７１〜１１０のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項112 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、線状エピトープに結合する、請求項７１〜１１１のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項113 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、非線状の立体構造エピトープに結合する、請求項７１〜１１２のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項114 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、多価であり、少なくとも２本の重鎖および少なくとも２本の軽鎖を含む、請求項７１〜１１３のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項115 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、多特異性である、請求項７１〜１１４のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項116 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、二重特異性である、請求項７１〜１１５のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項117 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、完全にヒトである重鎖および軽鎖可変ドメインを含む、請求項７１〜１１６のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項118 前記重鎖および軽鎖可変ドメインは、Ｍ１４−Ｈ０６、Ｍ１５−Ｅ１０、Ｍ１６−Ｃ０７、Ｍ２３−Ｆ１０、Ｍ８０−Ｂ０３、Ｍ９３−Ｄ０２、Ｍ９６−Ｃ０５、Ｍ９７−Ｄ０３、およびＭ９８−Ｅ１２からなる群から選択されるモノクローナルＦａｂ抗体フラグメントのものと同一である、請求項１１７に記載のポリヌクレオチド。 請求項119 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、マウスである重鎖および軽鎖可変ドメインを含む、請求項７１〜１１６のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項120 前記重鎖および軽鎖可変ドメインは、１Ｐ２Ｅ７、１Ｐ３Ｂ２、１Ｐ４Ａ３、１Ｐ４Ａ１２、および１Ｐ５Ｂ１０からなる群から選択されるモノクローナル抗体のものと同一である、請求項１１９に記載のポリヌクレオチド。 請求項121 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、ヒト化される、請求項７１〜１１６のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項122 前記核酸によってコードされる前記ポリペプチドを含む抗体またはその抗原結合性フラグメントは、キメラである、請求項７１〜１１６のうちのいずれか１項に記載のポリヌクレオチド。 請求項123 |