ＴＮＦαに対する抗体

专利摘要:
本願では、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）に結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部位、および誘導体、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体をコードする核酸、ならびに相補的核酸、ベクターおよび核酸を含有する宿主細胞を提供する。
公开号:JP2011508597A
申请号:JP2010541029
申请日:2008-12-24
公开日:2011-03-17
发明作者:アンドレアス・シャイディヒ；ウヴェ・グリッツァン；ウェイン・エム・ココ；ウルリッヒ・ハウプツ；クラウス・ペレンガール；クリスティアン・ボッツマイヤー；ケルスティン・バラル；コルネリア・キルヒナー；ジモネ・ブリュックナー；ズザンネ・シュタイニヒ；ハンナ・プリッテルスドルフ；ペーター・ショルツ；ミヒャエル・シュトレラート；ヤン・テッベ
申请人:バイエル・シェーリング・ファルマ・アクチェンゲゼルシャフトＢａｙｅｒ Ｓｃｈｅｒｉｎｇ Ｐｈａｒｍａ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ；
IPC主号:C12N15-09

专利说明:

[0001] 本明細書において提供する技術は、抗体、それらの抗原結合部位、および誘導体、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体をコードする核酸、ならびに相補的核酸、ベクターおよび核酸を含有する宿主細胞に関する。]
背景技術

[0002] ＴＮＦαは、単球およびマクロファージを含む白血球細胞によって産生されるサイトカインである。サイトカインは、感染または癌のような病態に応答して、免疫系を刺激および活性化する。ＴＮＦαは、敗血症、感染、自己免疫疾患、移植拒絶および移植片対宿主病を含むヒトの多様な疾患および異常に関与すると考えられている。さらに加えて、ＴＮＦαが過剰に発現すると、関節リウマチまたは乾癬のような免疫学的異常が生じ得える。]
[0003] ヒトの疾患においてＴＮＦαが果たす役割を考慮すると、ＴＮＦαに結合する抗体は、ＴＮＦα活性を阻害するための治療に使用することが求められている。（例えば、Ｓａｌｆｅｌｄらの特許文献１、Ｃｒｅａらの特許文献２、および非特許文献１を参照のこと）。従って、高い親和性および／または遅い解離速度論でＴＮＦαに結合することが可能なヒト抗体、それらの抗原結合部分、および誘導体を開発することが重要である。]
[0004] US patent 6,090,382
WO2006/014477]
先行技術

[0005] Rajpal, et al., PNAS 102:8466-8471]
課題を解決するための手段

[0006] 本明細書では、ＴＮＦαに結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を提供する。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１および２の重鎖および軽鎖またはそれらの可変領域を含む基本抗体またはその抗原結合部分と比較して、ＴＮＦαに対する改善された特性（例えば、親和性）を有する。本明細書において提供する抗体ならびに抗原結合部分および誘導体の重鎖および軽鎖配列を、基本配列と比較した、１つ以上の改変を有する基本配列に関して説明する。アミノ酸配列の改変については、残基番号の前に野生型アミノ酸および後にその位置における変異体アミノ酸を提供することによって、指定する。例えば、野生型のアスパラギン酸の代わりに配列番号１の３１位または残基３１においてグリシンを有する重鎖では、アミノ酸の１文字命名コードを使用して、「Ｄ３１Ｇ」として指定される。]
[0007] ＴＮＦ−αに結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を提供する。いくつかの実施形態では、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖またはその可変領域を含む。]
[0008] いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。]
[0009] いくつかの実施形態では、抗体、その抗原結合部分または誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｖ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＶ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｖ１９６Ａ Ｔ１８０Ｉ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。]
[0010] いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−αに結合することが可能な抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、配列番号１のアミノ酸３１〜３５を含む重鎖ＣＤＲ１領域、配列番号１のアミノ酸５０〜６６を含む重鎖ＣＤＲ２領域ならびに配列番号１のアミノ酸９９〜１００を含む重鎖ＣＤＲ３領域を含み、そしてＤ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの変更を有し、そしてここで、抗体またはその抗原結合部分は、場合により、配列番号２のアミノ酸２４〜３４を含む軽鎖ＣＤＲ１領域、配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含む軽鎖ＣＤＲ２領域および配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含む軽鎖ＣＤＲ３領域をさらに含み、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する。]
[0011] 抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体の重鎖および軽鎖をコードする核酸配列もまた、本明細書において提供する。核酸配列によってコードされる基本重鎖アミノ酸配列を、配列番号１に示す。基本重鎖アミノ酸配列をコードするサンプル核酸配列を、配列番号３に示す。核酸配列によってコードされる基本軽鎖アミノ酸配列を、配列番号２に示す。基本軽鎖アミノ酸配列をコードするサンプル核酸配列を、配列番号４に示す。]
[0012] 抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、関節リウマチ、炎症性腸疾患、乾癬、およびクローン病のような疾患ならびにＴＮＦαに関係する他の疾患の治療のために、患者に投与しようとする組成物を調製するために使用することができる。抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体はまた、ＴＮＦαを検出するか、または生物学的サンプルにおけるＴＮＦαのレベルを測定するための診断アッセイのようなアッセイにも使用することができる。]
図面の簡単な説明

[0013] 基本Ｆａｂの重鎖（配列番号１）および軽鎖（配列番号２）のアミノ酸配列を示す；重鎖および軽鎖の両方のＣＤＲ１、２、および３に、示すような下線を付す。
野生型の軽鎖、または対応する基本Ｆａｂ配列（野生型）と比較して、示された改変を伴う軽鎖と共に、ＣＤＲ−１において示された改変を伴う重鎖を有する本明細書において提供するＦａｂ変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２由来の示されたＦａｂ変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ（homogenous time-resolved energy transfer assay）由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２由来の示されたＦａｂ変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２由来の示されたＦａｂ変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本重鎖配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−２において示された改変残基を有する本明細書において提供する重鎖変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図４由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図４由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本重鎖配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−３において示された改変残基を有する本明細書において提供する重鎖変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図６由来の示された変異体を含むＦａｂを使用するＥＬＩＳＡ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図６由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本軽鎖配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−１において示された改変残基を有する本明細書において提供する軽鎖変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
野生型の重鎖、または対応する基本配列（野生型）と比較して、示された改変を伴う重鎖と共に、ＣＤＲ−２において示された改変残基および他の改変残基を有する本明細書において提供する軽鎖変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−３において示された改変残基および他の改変残基を有する本明細書において提供する軽鎖変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＥＬＩＳＡアッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
それぞれ、配列番号１および２をコードするサンプル核酸配列（配列番号３および配列番号４）を示す。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図１９由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２９由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
ＦａｂＨＵＭと比較した、図２９由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
表面プラズモン共鳴解析によって決定された、ＦａｂＨｕｍと比較した、本明細書において提供する変異体の結合定数ｋａ、解離定数ｋｄおよび親和定数ＫＤを示す表である。
図３１Ｂは、ＦａｂＨｕｍの表面プラズモン共鳴解析由来のデータを示すグラフである。図３１Ｃは、ＵＲＳ＿４．２ａ＿５２の表面プラズモン共鳴解析由来のデータを示すグラフである。
ＦａｂＨＵＭと本発明の変異体とを比較した細胞ベースのＴＮＦ−α中和アッセイの結果を示すグラフである。
本発明のいくつかの変異体の配列を示す。
本発明のいくつかの変異体の全長抗体配列を示す（それぞれ、ＵＲＳ＿２．１ｂ＿９．０＿１−重鎖、ＵＲＳ＿２．１ｂ＿９．０＿１−軽鎖、ＵＲＳ＿２．１＿Ｈ２＿３＿７２−重鎖、ＵＲＳ＿２．１＿Ｈ２＿３＿７２−軽鎖、ＨＵＭＩＲＡ−重鎖、ＨＵＭＩＲＡ−軽鎖；配列番号４５７−４６２）。] 図１０ 図１２ 図１４ 図１７ 図１９ 図２ 図２１ 図２３ 図２５ 図２７
[0014] 本明細書では、ＴＮＦαに結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部分、および誘導体（本明細書では「抗体」とも称する）を開示する。抗体は、それぞれ、配列番号１および２の重鎖および／または軽鎖可変領域のアミノ酸配列において１つ以上の改変を含む。免疫グロブリンの軽鎖および重鎖の両方の領域が抗原結合部位を含有することは、当業者に周知である。抗原結合部位を含有する領域は、４つの比較的不変な「フレームワーク領域」（ＦＲ）および３つの高度に可変な「超可変領域」（ＨＶ）からなる。ＨＶは、抗原に対する表面相補性を形成することによって、抗原への結合部位を構成し、そして特異性を決定するため、それらは、「相補性決定領域」、またはＣＤＲと呼ばれ、そしてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３で示され、そして番号付けは、それぞれ、重鎖または軽鎖のＮ末端のＣＤＲ１から始まる。]
[0015] いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ１領域を含む。抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、およびＡ４０Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１を含む重鎖可変領域を含み得、そしてさらに、場合により、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、およびＴ１８０Ｉからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列の軽鎖可変領域を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、配列番号１または配列番号１の残基３０〜３５を含み得、ここで、残基３１はＨであり、そして残基３２はＦである；またはここで、残基３１はＧであり、そして残基３２はＦもしくはＱである；またはここで、残基３１はＮである；またはここで、残基３２はＳである；またはここで、残基３１はＴであり、そして残基３２はＦである；またはここで、残基３はＧであり、そして配列番号１の残基３２はＦである；またはここで、配列番号１の残基３１はＲである。他の実施形態では、残基３１はＱであり、そしてさらに、場合により、配列番号２を有する軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基１８０はＩである；またはここで、配列番号１の残基３２はＳもしくはＦであり、そして場合により、配列番号２を有する軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基１６６はＲである；またはここで、配列番号１の残基３１はＨであり、そしてさらに、場合により、配列番号２の配列を有する軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基４０はＶであり、そして配列番号２の残基１２９はＡである。]
[0016] 他の実施形態では、抗体は、重鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ２領域を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号１または配列番号１の残基５０〜６６を含み得、ここで、残基５０はＧである；またはここで、残基５８はＴもしくはＶである。]
[0017] 他の実施形態では、抗体は、重鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ３領域を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号１または配列番号１の残基９９〜１１０を含み得、ここで、残基１０３はＰである。]
[0018] 加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体の重鎖可変領域は、Ｄ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｓ、およびＳ１００Ｋからなる群から選択される配列番号１の少なくとも１つの改変をさらに含み得る。]
[0019] いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ１領域を含む。抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸２３〜３４を含み、そしてＲ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する軽鎖可変領域を含み得る。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２の残基２３〜３４を含み得、ここで、残基２４はＬであり、そして配列番号２の残基２５はＳもしくはＧであり、そして場合によりここで、配列番号２の残基２９はＬである；またはここで、残基２４はＡもしくはＴである；またはここで、残基２５はＳもしくはＴであり、そして場合によりここで、残基２７はＭである；またはここで、残基２７はＹ、Ｖ、もしくはＷであり、そして場合によりここで、残基２６はＴである；またはここで、残基２８はＳ、Ｐ、Ｒ、もしくはＬであり、そして場合によりここで、残基２９はＬもしくはＶである。]
[0020] いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ２領域を含む。抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含み、そしてＳ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する軽鎖可変領域を含み得、そしてさらに、場合により、配列番号１のアミノ酸配列を含み、そしてＥ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する重鎖を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含み得、ここで、残基５３はＷである；あるいはここで、残基５２は、Ｗ、Ｇ、もしくはＮである；またはここで、残基５３はＹ、Ｆ、もしくはＶであり、そして場合によりここで、残基５２はＮであるか、または場合によりここで残基５７はＳである；あるいはここで、残基５３はＳであり、そして残基２１４はＧであり、そしてさらに、場合により、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖を含み、ここで、残基６５はＲであり、そして残基６６はＮである；あるいはここで、配列番号２の残基５４はＳもしくはＴであり、そして場合により、ここで、残基５５はＩ、Ｋ、もしくはＬである；あるいはここで、残基５６はＲである。]
[0021] いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ３領域を含む。抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含み、そしてＶ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する軽鎖可変領域を含み得る。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含み得、ここで、残基９４はＰであり、そして残基９５はＭであり、そして場合により、ここで、残基１５はＭである；またはここで、残基９２はＩであり、そして場合によりここで、残基９３はＱであり、そして残基９４はＰである；またはここで、残基９２はＤであり、そして残基９３はＭである；またはここで、配列番号２の残基９３はＭであり、そして場合により、ここで、残基９４はＰである；またはここで、残基９３はＱであり、そして場合によりここで、残基９４はＰである；またはここで、残基９３はＫであり、そして残基９４はＳである；またはここで、残基９４はＰであり、そして残基９５は、Ｑ、Ａ、Ｓ、Ｍ、Ｅ、およびＶからなる群から選択される。]
[0022] 加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体の軽鎖可変領域は、Ｑ２７Ｌ、Ｑ２７Ｙ、Ｑ２７Ｋ、Ｉ２９Ｌ、Ｔ５３Ｓ、Ｑ５５Ｌ、Ｎ９２Ｄ、Ｒ９３ＫおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される配列番号２の少なくとも１つの改変をさらに含み得る。]
[0023] 本明細書に記載の様々な実施形態は相補的なものであり得、そして本明細書に含有される技術を鑑みて、当業者によって理解される様式で組み合わせるかまたは共に使用することができる。それ故、本明細書において提供する抗体、その抗原結合部分、および誘導体はまた、上記のバリエーションの組み合わせを含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｋ、Ｒ９３ＱおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２を含み得、そして場合により、配列番号２の配列を有し、そしてＤ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｆ、およびＹ３２Ｓからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する重鎖を含む。]
[0024] いくつかの実施形態では、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、それぞれ、配列番号１および２の重鎖および軽鎖の可変領域を含む抗体、その抗原結合部分、または誘導体と比較して、ＴＮＦαに対する改善された親和性を有する。改善された親和性は、改善された解離定数ＫＤまたは改善されたｋｏｆｆ速度定数の関数であり得る。いくつかの実施形態では、改善されたＫＤ解離定数または改善されたｋｏｆｆ速度定数は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖の可変領域および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いか、または２、３、もしくは４倍低い。]
[0025] 好適な実施形態では、改善されたＫＤ解離定数または改善されたｋｏｆｆ速度定数は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖の可変領域および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１０倍低いか、または１５、２０、３０倍低い。]
[0026] いくつかの実施形態では、抗体、その抗原結合部分、もしくは誘導体またはそれらをコードする核酸が単離される。単離された生物学的成分（例えば、核酸分子またはタンパク質、例えば、抗体）は、成分が天然に存在する生物体の細胞中の他の生物学的成分、例えば、他の染色体および染色体外ＤＮＡおよびＲＮＡ、タンパク質ならびにオルガネラから実質的に分離または精製されている成分である。「単離」されている核酸およびタンパク質として、標準的な精製方法によって精製された核酸およびタンパク質が挙げられる。この用語はまた、宿主細胞における組み換え発現によって調製された核酸およびタンパク質ならびに化学的に合成された核酸を包含する。]
[0027] 本明細書では、アミノ酸を、アミノ酸の名称、３文字略称または１文字略称を使用して言及する。以下の表は、標準的なアミノ酸のリストを、それらの略称と共に示す。]
[0028] ]
[0029] 特定のアミノ酸バリエーションおよびこのバリエーションをコードする核酸に加えて、バリエーションの保存的アミノ酸置換を本明細書において提供する。そのような置換は、保存的な置換であり、例えば、ここで、変異体アミノ酸は、同じ一般タイプのもう１つのアミノ酸によって置き換えられる。アミノ酸は、それらの側鎖に応じて、酸性、塩基性、中性および極性、または中性および非極性ならびに／あるいは芳香族性に分類することができる。変異体アミノ酸位置の好適な置換として、同じ位置に変異体アミノ酸と同じ１つ以上の分類を有する置換が挙げられる。それ故、一般に、アミノ酸、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、およびＨｉｓは塩基性であり；アミノ酸、アスパラギン酸およびグルタミン酸は酸性であり；アミノ酸、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、およびＡｓｎは中性極性であり；アミノ酸、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、およびＬｅｕは非極性脂肪族性であり、そしてアミノ酸、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、およびＴｙｒは芳香族性である。ＧｌｙおよびＡｌａは小さなアミノ酸であり、そしてＶａｌ、ＩｌｅおよびＬｅｕは脂肪族性アミノ酸である。]
[0030] 本明細書に記載のように、抗体の抗原結合フラグメントおよびその誘導体は、抗原に特異的に結合する抗体の任意の部分を含む。例えば、抗体の抗原−結合フラグメントは、１つ以上の免疫グロブリン鎖が、全長ではないが、抗原に特異的に結合することが可能である分子を含む。用語「その抗原結合フラグメント」内に包含される結合フラグメントの例として、例えば、（ｉ）Ｆａｂフラグメント、例えば、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価のフラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価のフラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ward et al., (1989) Nature 341:544-546）；ならびに（ｖｉ）抗原に特異的に結合することが可能な十分なフレームワーク、例えば、可変領域の抗原結合部分を有する単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。軽鎖可変領域の抗原結合部分および重鎖可変領域の抗原結合部分、例えば、Ｆｖフラグメント、ＶＬおよびＶＨの２つのドメインは、組み換え方法を使用して、それらを、ＶＬおよびＶＨ領域が対合して、一価の分子を形成する単一のタンパク質鎖にすることが可能な合成リンカーによって、接続することができる（単一鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として既知である；例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426；およびHuston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照のこと）。そのような一本鎖抗体もまた、用語「その抗原−結合フラグメント」内に含有されることが意図される。これらの抗体フラグメントは、当業者に公知の従来の技術を使用して作製され、そしてフラグメントは、結合能について、無傷（ｉｎｔａｃｔ）な抗体と同じ様式で、スクリーニングされる。上記の抗体、その抗原結合部分、または誘導体はまた、上記のＴＮＦ−α結合ドメインに加えて、ダイアボディ（Ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）、Ｂｉｓ−ｓｃＦｖｓ、二重特異性Ｆａｂ２または三重特異性Ｆａｂ３のような他のタンパク質および／またはエピトープのような結合親和性を伴う１つ以上のさらなるドメイン（P. Holliger and P. J. Hudson, Nature Biotechnology, 2005, Vol. 23, Number 9, page 1126-1136を参照のこと）を含む組み換え結合タンパク質を包含する。これらの結合タンパク質は、当業者に公知の従来の技術を使用して作製され、そしてフラグメントは、結合能について、無傷（ｉｎｔａｃｔ）な抗体と同じ様式で、スクリーニングされる。加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体は、ヒト抗体であり、例えば、ヒト起源であり得るか、またはヒト化され得る。ヒト抗体またはそのフラグメントもしくは誘導体が好適である一方、本発明の分子において用いることができる他の抗体は、マウス、キメラおよびヒト化抗体である。これらのキメラまたはヒト化抗体および抗体フラグメントは、当業者に公知の従来の技術を使用して作製される。ヒトモノクローナル抗体またはそのフラグメントおよび誘導体が好適である。]
[0031] 加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体を誘導体化して、例えば、その生化学的安定性を改善するか、またはそれを検出可能な標識物もしくは治療用薬剤にコンジュゲートすることができる。例えば、抗体、その抗原結合部分、または誘導体を、ポリエチレングリコール（「ＰＥＧ」）、セルロース、デキストラン、アガロース、またはアミノ酸コポリマーのようなポリマー骨格にコンジュゲートすることができる。誘導体化の他の例として、放射性同位元素、フルオロフォア、化学発光剤、細胞毒製剤および酵素による標識が挙げられる。これらの修飾は、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体がＴＮＦαに結合する能力が無傷（ｉｎｔａｃｔ）の状態を保つように、当業者によって、容易に行うことができる。]
[0032] 遺伝子コードが縮重しており、即ち、２つ以上のコドントリプレットが、同じアミノ酸をコードすることができることが、当業者に周知である。従って、本明細書において提供する核酸はまた、異なるコドンを使用して、同じアミノ酸配列をコードする代替的配列を含む。さらに加えて、本明細書において提供する核酸はまた、本明細書において提供する抗体、その抗原結合フラグメントおよびその誘導体をコードする核酸のコード配列および相補配列の両方を含む。]
[0033] 本明細書において提供する改変された重鎖および軽鎖またはその可変領域は、当該分野において標準的な方法によって作製することができる。例えば、改変された重鎖を作製するために、得られる変異誘発された配列が改変された重鎖をコードするように、当業者は、基本核酸配列を変異誘発することができる。一実施形態では、重鎖の基本配列を配列番号３に示す。同様に、改変された軽鎖を作製するために、得られる変異誘発された配列が改変された軽鎖をコードするように、当業者は、配列番号４を変異誘発することができる。本明細書に記載のように、遺伝子コードの縮重のため、基本ヌクレオチド配列は、配列番号３または４に示す配列とは異なり得、そしてなお、それぞれ、配列番号１または２のアミノ酸配列をコードすることが理解される。]
[0034] 当業者は、所望される重鎖または軽鎖をコードする配列を容易に変異誘発することができ、なおここで、核酸配列は、アミノ酸配列をコードするために、異なるコドンを使用する。変異誘発に使用すべき核酸は、例えば、当該技術分野において公知の化学合成方法を使用して、または例えば、基本配列を作製するためのオリゴヌクレオチドのＰＣＲアセンブリもしくはオリゴヌクレオチドのライゲーションによって、作製することができる。核酸配列における改変は、（例えば、オリゴヌクレオチド変異誘発によって）コード核酸内の予め決定された位置における特定の変化を組み入れるように設計されたオリゴヌクレオチドを使用して、作製することができる。Kunkle et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 82:488-492 (1985)に記載の変異誘発方法は、適切な方法である。当該技術分野において公知の他の適切な方法として、ＰＣＲ変異誘発が挙げられる。部位特異的変異誘発（Carter et al., Nucl. AcidsRes., 13:4331 (1986)；Zoller et al., Nucl. Acids Res., 10:6487 (1987))、カセット変異誘発Wells et al., Gene, 34:315 (1985)、制限選択変異誘発(Wells et al., Philos. Trans. R. Soc. London SerA, 317:415 (1986)）。改変された重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドはまた、例えば、改変されたアミノ酸配列をコードする核酸配列の直接合成によっても作製することができる。]
[0035] 本明細書において提供する抗体、その抗原結合部分、または誘導体は、宿主細胞における軽鎖および重鎖またはその部分をコードする核酸配列の組み換え発現によって調製することができる。抗体、その抗原結合部分、または誘導体を組み換え的に発現させるために、軽鎖および重鎖が宿主細胞において発現されるように、軽鎖および／または重鎖あるいはそれらの部分をコードするＤＮＡフラグメントを担持する１つ以上の組み換え発現ベクターで、宿主細胞をトランスフェクトすることができる。Sambrook, Fritsch and Maniatis (eds), Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N.Y., (1989), Ausubel, F. M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989)およびＢｏｓｓらによるU.S. Pat. No. 4,816,397に記載の方法論のような標準的な組み換えＤＮＡ方法論を使用して、重鎖および軽鎖をコードする核酸を調製および／または入手し、これらの核酸を組み換え発現ベクターに組み入れ、そしてベクターを宿主細胞に導入する。]
[0036] 加えて、重鎖および／または軽鎖の可変領域をコードする核酸配列を、例えば、全長抗体鎖、ＦａｂフラグメントまたはｓｃＦｖをコードする核酸配列に変換することができる。ＶＬまたはＶＨをコードするＤＮＡフラグメントは、（２つのＤＮＡフラグメントによってコードされるアミノ酸配列がインフレームであるように）例えば、抗体定常領域または可撓性リンカーをコードするもう１つのＤＮＡフラグメントに作動可能に連結することができる。ヒト重鎖および軽鎖の定常領域の配列は当該技術分野において公知であり（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）、そしてこれらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。]
[0037] ｓｃＦｖをコードするポリヌクレオチド配列を作製するために、ＶＬおよびＶＨ領域が可撓性リンカーで接続された連続する単一鎖のタンパク質として、ＶＨおよびＶＬ配列を発現させることができるように、ＶＨおよびＶＬをコードする核酸を、可撓性リンカーをコードするもう１つのフラグメントに作動可能に連結することができる（例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426；Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883；McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554を参照のこと）。]
[0038] 抗体、その抗原結合部分または誘導体を発現させるために、標準的な組み換えＤＮＡ発現方法を使用することができる（例えば、Goeddel; Gene Expression Technology. Methodsin Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. (1990)を参照のこと）。例えば、所望されるポリペプチドをコードするＤＮＡを、発現ベクターに挿入することができ、次いで、発現ベクターは、適切な宿主細胞にトランスフェクトされる。いくつかの実施形態では、重鎖および軽鎖をコードするＤＮＡは、個別のベクターに挿入される。他の実施形態では、重鎖および軽鎖をコードするＤＮＡは、同じベクターに挿入される。調節配列の選択を含む発現ベクターの設計は、宿主細胞の選択、所望されるタンパク質の発現のレベルおよび発現が構成性であるかまたは誘導性であるかのような因子の影響を受けることが理解される。]
[0039] 哺乳動物宿主細胞発現のための好適な調節配列として、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）から誘導されるプロモーターおよび／またはエンハンサー（例えば、ＣＭＶプロモーター／エンハンサー）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）（例えば、ＳＶ４０プロモーター／エンハンサー）、アデノウイルス、（例えば、アデノウイルス主要後期プロモーター（ＡｄＭＬＰ））およびポリオーマのような哺乳動物細胞において高レベルのタンパク質発現を指令するウイルスエレメントが挙げられる。ウイルス調節エレメント、およびそれらの配列のさらなる説明については、例えば、ＳｔｉｎｓｋｉによるU.S. 5,168,062、ＢｅｌｌらによるU.S. 4,510,245およびＳｃｈａｆｆｎｅｒらによるU.S. 4,968,615を参照のこと。組み換え発現ベクターはまた、複製開始点および選択マーカーを含むことができる(例えば、ＡｘｅｌらによるU.S. 4,399,216、4,634,665およびU.S. 5,179,017を参照のこと）。適切な選択マーカーとして、ベクターが導入されている宿主細胞にＧ４１８、ハイグロマイシンまたはメトトレキサートのような薬物に対する耐性を付与する遺伝子が挙げられる。例えば、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子は、メトトレキサートに対する耐性を付与し、そしてｎｅｏ遺伝子はＧ４１８に対する耐性を付与する。]
[0040] 発現ベクターの宿主細胞へのトランスフェクションは、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、およびＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクションのような標準的な技術を使用して、行うことができる。]
[0041] 本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を発現する適切な哺乳動物宿主細胞として、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220に記載のｄｈｆｒ− ＣＨＯ細胞を含む、例えば、R. J. Kaufman and P. A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621における記載のようにＤＨＦＲ選択マーカーと共に使用する)、ＮＳＯ骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞が挙げられる。いくつかの実施形態では、発現されたタンパク質が、宿主細胞が増殖する培養培地に分泌されるように、発現ベクターが設計される。抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、標準的なタンパク質精製方法を使用して、培養培地から回収することができる。]
[0042] 抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体はまた、例えば、ＲｏｂｉｎｓｏｎらのU.S. 6,204,023および（Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)に記載の適切なベクターを使用して、原核細胞においても産生させることができる。発現ベクターは、発現されたポリペプチドを、グラム陰性菌のペリプラズム空間、またはグラム陽性菌もしくは酵母の細胞外空間に分泌させるように設計することができるか、あるいはポリペプチドを、細胞内、例えば、封入体に保持させることができる。重鎖および軽鎖抗体ならびにそれらのフラグメントの本明細書において提供する配列は、発現をそれぞれの空間に指向する機能的エレメントに作動可能に連結させることができ、そのような機能的エレメントは、例えば、リーダー配列を含むことは、当業者に周知である。それぞれ、発現されたポリペプチドをペリプラズム空間から単離することができるか、または封入体を宿主細胞から単離することができる。例えば、Ｆａｂ’−ＳＨフラグメントを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）から直接回収し、そして化学的に結合させて、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを形成させることができる（Carter et al., (1992)）。別の実施形態では、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、例えば、U.S.5,204,244に記載のように、相同組み換えによって産生させてもよい。]
[0043] 本明細書に記載のベクターにおいてＤＮＡをクローニングまたは発現させるための適切な宿主細胞は、上記の原核細胞、酵母、または高等真核細胞である。原核細胞に加えて、糸状菌または酵母のような真核微生物は、本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体に適切なクローニングまたは発現宿主である。サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）は、適切な真核宿主微生物である。もう１つの適切な酵母宿主は、シゾサッカロマイセス・ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｐｏｍｂｅ）である。本明細書において提供するグリコシル化抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体の発現に適切な宿主細胞として、哺乳動物、植物、および昆虫細胞が挙げられる。抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、組み換えタグ精製（例えば、ＨＡ−タグ、Ｍｙｃ−タグ、Ｈｉｓ−タグ）およびアフィニティークロマトグラフィーを含むが、これらに限定されない標準的なタンパク質精製方法を使用して、培養培地から回収することができる。]
[0044] 宿主細胞を、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体産生のための上記の発現またはクローニングベクターで形質転換し、そしてプロモーターを含むか、形質転換体を選択するか、または所望される配列をコードする遺伝子を増幅するのに適切であるように改変された従来の栄養培地において培養する。Ｈａｍ’ｓ Ｆ１０、Ｍｉｎｉｍａｌ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｍｅｄｉｕｍ（（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ−１６４０、およびＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）のような市販の培地は、宿主細胞を培養するのに適切である。温度、ｐＨなどのような培養条件は、発現のために選択される宿主細胞によって先に使用された条件であり、そして当業者には明らかであろう。]
[0045] 組み換え技術を使用する場合、抗体を、細胞内、ペリプラズム空間に産生させるか、または培地に直接分泌させることができる。第１の工程として抗体を細胞内に産生させる場合、粒状破砕物（宿主細胞もしくは溶解されたフラグメントのいずれか）が、例えば、遠心分離または限外ろ過によって取り出される。Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ)のペリプラズム空間に分泌される抗体を単離するための手順について説明している。簡単に説明すると、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、およびフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）の存在下、約３０分間、融解する。細胞破砕物は、遠心分離によって取り出すことができる。抗体が培地に分泌される場合、そのような発現系由来の上清を、一般的に最初に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外ろ過ユニットを使用して、濃縮する。ＰＭＳＦのプロテアーゼ阻害剤を、タンパク質分解を阻害するための上記の工程のいずれかに含めてもよく、そして抗生物質を、外来性コンタミナントの増殖を防止するために含めてもよい。]
[0046] 細胞から調製される抗体組成物は、例えば、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、およびアフィニティークロマトグラフィーを使用して精製することができる。]
[0047] 抗体、それらの抗原結合フラグメントおよびそれらの誘導体は、ＥＬＩＳＡアッセイおよび／またはＨＴＲＦアッセイ（いずれの当業者にも公知である他のアッセイ形式を適用することもできる）によって、ＴＮＦ−αに結合することが認められている。本明細書において提供する抗体、その抗原結合フラグメントおよびその誘導体の多くは、抗ＴＮＦαモノクローナル抗体Ｄ２Ｅ７（配列番号１および配列番号２を含む）のＦａｂフラグメントと同様に、少なくともＴＮＦ−αに結合する。アッセイでは、Ｄ２Ｅ７の抗原結合フラグメントと比較して、変異体の多くが、減少したオフ速度（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）を有することが実証される。]
[0048] 本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、それを必要とする患者に投与することができる。抗体、その抗原結合部分または誘導体を投与するために、多様な経路を使用することができる。臨床的に許容されない有害作用を引き起こすことなく、有効なレベルの活性化合物を生じる任意の形態を意味する、医学的に許容できる任意の投与形態を使用して、抗体、その抗原結合部分または誘導体を投与することができる。そのような投与形態として、経口、舌下、局所、点鼻、経皮または非経口経路が挙げられる。用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、または輸注を含む。]
[0049] 抗体、その抗原結合部分または誘導体は、一回で、連続的に、例えば、連続ポンプによって、または定期的な間隔で、投与することができる。定期的間隔は、１週間に１回、１週間に２回、または１箇月に１回であってもよい。適切な体液性、細胞性免疫および／または臨床応答を誘発するために、投薬を、１箇月、２箇月、３箇月もしくはそれ以上の期間行うことができる。特定の組成物の複数回の投薬の所望される時間間隔は、当業者による過度の実験を伴うことなく、決定することができる。抗体またはその抗原結合フラグメントの投与のための他のプロトコルは、当業者に周知であり、投与量、投与スケジュール、投与部位、投与形態などは、前述と異なる。]
[0050] なおもう１つの実施形態では、本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を使用して、生物学的サンプルにおいて、インビボ、エクスビボまたはインビトロでＴＮＦαを検出することができる。適切な生物学的サンプルとして、例えば、ＴＮＦαを含有することが予想される組織サンプル、体液サンプルまたは細胞サンプルが挙げられる。これは、例えば、抗体とＴＮＦα（サンプル中に存在する場合）との間の複合体の形成を可能にする条件下で、試験しようとするサンプルを、場合により、コントロールサンプルを伴って、抗体、その抗原結合部分、または誘導体と接触させることによって、達成することができる。次いで、複合体形成を、例えば、酵素免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を使用して、検出することができる。]
[0051] １つの実施形態では、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体、またはその抗原結合部分、もしくは誘導体であって、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。なおもう１つの実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であり、ここで、配列番号１における改変は、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、およびＡ４０Ｖからなる群から選択され、そしてＴ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、およびＴ１８０Ｉからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖をさらに含む。]
[0052] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＨであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。]
[0053] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＧであり、そして配列番号１の残基３２はＦまたはＱである。]
[0054] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３２はＳである。]
[0055] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＴであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。]
[0056] さらに加えて、もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＱであり、そして配列番号２を有する軽鎖をさらに含み、ここで、配列番号２の残基１８０はＩである。]
[0057] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＮである。]
[0058] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＮであり、そして配列番号１の残基３２はＳまたはＦである。さらなる実施形態は、配列番号２の配列を有する軽鎖をさらに含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であり、ここで、配列番号２の残基１６６はＲである。]
[0059] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＨであり、そして配列番号２の配列を有する軽鎖をさらに含み、ここで、配列番号２の残基４０はＶであり、そして配列番号２の残基１２９はＡである。]
[0060] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＴであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。]
[0061] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＧであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。]
[0062] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＲである。]
[0063] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基５０はＧである。]
[0064] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基５８はＴまたはＶである。]
[0065] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基１０３はＰである。]
[0066] もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、重鎖は、Ｄ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｓ、およびＳ１００Ｋからなる群から選択される少なくとも１つの改変をさらに含む。]
[0067] もう１つの実施形態は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いＫＤ解離定数またはＫｏｆｆ速度定数を有するＱ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体である。]
[0068] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体、またはその抗原結合部分、もしくは誘導体をコードする核酸であって、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。さらなる実施形態は、上記の核酸を含むベクターである。なおさらなる実施形態は、上記の核酸を含む宿主細胞である。]
[0069] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。さらに加えて、実施形態は、上記の単離された抗体または抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２における改変は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される。]
[0070] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２４はＬであり、そして配列番号２の残基２５はＳまたはＧである。さらなる実施形態は、上記の抗体であって、ここで、配列番号２の残基２５はＳであり、そしてここで、配列番号２の残基２９はＬである。]
[0071] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２４はＡまたはＴである。]
[0072] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２５はＳまたはＴである。なおさらなる実施形態は、上記の抗体であり、ここで、配列番号２の残基２７はＭである。]
[0073] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２７はＹ、Ｖ、またはＷである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基２６はＴである。]
[0074] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２８はＳ、Ｐ、Ｒ、またはＬである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基２９はＬまたはＶである。]
[0075] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体または抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基５３はＷである。]
[0076] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５２はＷ、Ｇ、またはＮである。]
[0077] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５２はＮであり、そして配列番号２の残基５３はＹ、Ｆ、またはＶである。]
[0078] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５３はＹ、Ｆ、またはＶであり、そして配列番号２の残基５７はＳである。]
[0079] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５３はＳであり、そして配列番号２の残基２１４はＧであり、そしてさらに、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖を含み、ここで、残基６５はＲであり、そして残基６６はＮである。]
[0080] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、配列番号２の残基５４はＳ、またはＴである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基５５はＩ、Ｋ、またはＬである。]
[0081] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５６はＲである。]
[0082] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される。なおさらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基１５はＭであり、配列番号２の残基９４はＰであり、そして配列番号２の残基９５はＭである。]
[0083] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９２はＩである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基９３はＱであり、そして配列番号２の残基９４はＰである。]
[0084] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９２はＤであり、そして配列番号２の残基９３はＭである。]
[0085] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９３はＭである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基９４はＰである。]
[0086] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９３はＱである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基９４はＰである。]
[0087] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、配列番号２の残基９３はＫであり、そして配列番号２の残基９４はＳである。]
[0088] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９４はＰであり、そして配列番号２の残基９５は、Ｑ、Ａ、Ｓ、Ｍ、Ｅ、およびＶからなる群から選択される。]
[0089] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、軽鎖は、Ｑ２７Ｌ、Ｑ２７Ｙ、Ｑ２７Ｋ、Ｉ２９Ｌ、Ｔ５３Ｓ、Ｑ５５Ｌ、Ｎ９２Ｄ、Ｒ９３ＫおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変をさらに含む。]
[0090] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いＫＤ解離定数またはＫｏｆｆ速度定数を有する。]
[0091] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｖ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＶ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｖ１９６Ａ Ｔ１８０Ｉ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。さらなる実施形態は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いＫＤ解離定数またはＫｏｆｆ速度定数を有する上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。]
[0092] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｖ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＶ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｖ１９６Ａ Ｔ１８０Ｉ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｋ、Ｒ９３ＱおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する。さらに実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重鎖は、Ｄ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｆ、およびＹ３２Ｓからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する。]
[0093] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、配列番号１のアミノ酸３１〜３５を含む重鎖ＣＤＲ１領域、配列番号１のアミノ酸５０〜６６を含む重鎖ＣＤＲ２領域ならびに配列番号１のアミノ酸９９〜１００を含む重鎖ＣＤＲ３領域を含み、そしてＤ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの変更を有し、そしてここで、抗体またはその抗原結合部分は、さらに場合により、配列番号２のアミノ酸２４〜３４を含む軽鎖ＣＤＲ１領域、配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含む軽鎖ＣＤＲ２領域および配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含む軽鎖ＣＤＲ３領域をさらに含み、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する。]
[0094] もう１つの実施形態は、Ｖｈ（可変重鎖）抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ（可変軽鎖）抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であるが、但し、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４６、４７、および４８によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号５２、５３および５４によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。さらに実施形態は、それぞれ、配列番号４６３および配列番号４６４によって同定される重鎖および軽鎖を有する抗体より少なくとも３倍低い親和定数ＫＤまたはｋｏｆｆ速度定数でＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。さらなる好適な実施形態は、３０ｐＭ未満、より好ましくは、１０ｐＭ以下の親和定数ＫＤでＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。]
[0095] もう１つの実施形態は、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であるが、但し、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４６、４７、および４８によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号５２、５３および５４によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。]
[0096] もう１つの実施形態は、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そして重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分である。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。]
[0097] もう１つの実施形態は、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含み、そして重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分である。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。]
[0098] もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含む。]
[0099] もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含み、そしてここで、重鎖Ｖｈ領域は３０位においてＧを有する。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。]
[0100] もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含み、そしてここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む。]
[0101] もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含み、そしてここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてここで、重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。]
[0102] もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が配列番号５６によって同定されるＶｌＣＤＲ３領域を含む。]
[0103] もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が配列番号５６によって同定されるＶｌＣＤＲ３領域を含む。]
[0104] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２０、２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、配列番号４０によって同定される配列を含まない。]
[0105] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0106] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２０によって同定される配列を含むが、但し、配列番号４０によって同定される配列を含まない。]
[0107] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２１によって同定される配列を含む。]
[0108] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２２によって同定される配列を含む。]
[0109] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２３によって同定される配列を含む。]
[0110] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２４によって同定される配列を含む。]
[0111] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２５によって同定される配列を含む。]
[0112] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２６によって同定される配列を含む。]
[0113] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号２７によって同定される配列を含むが、但し、配列番号４２によって同定される配列を含まない。]
[0114] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号２８によって同定される配列を含む。]
[0115] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号２９によって同定される配列を含む。]
[0116] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３０によって同定される配列を含む。]
[0117] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３１によって同定される配列を含む。]
[0118] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３２によって同定される配列を含む。]
[0119] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３３によって同定される配列を含む。]
[0120] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３４によって同定される配列を含む。]
[0121] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３７によって同定される配列を含む。]
[0122] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３８によって同定される配列を含む。]
[0123] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０、２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３７および３８からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖が、それぞれ、配列番号４０および配列番号４２によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。]
[0124] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号２７によって同定される配列を含むが、但し、ＶｈおよびＶｌ鎖が、それぞれ、配列番号４０および配列番号４２によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。]
[0125] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号２７によって同定される配列を含む。]
[0126] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号２７によって同定される配列を含む。]
[0127] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号２７によって同定される配列を含む。]
[0128] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号２７によって同定される配列を含む。]
[0129] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２５および配列番号２７によって同定される配列を含む。]
[0130] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６および配列番号２７によって同定される配列を含む。]
[0131] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３７によって同定される配列を含む。]
[0132] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３７によって同定される配列を含む。]
[0133] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３８によって同定される配列を含む。]
[0134] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３８によって同定される配列を含む。]
[0135] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号３１によって同定される配列を含む。]
[0136] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３１によって同定される配列を含む。]
[0137] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３１によって同定される配列を含む。]
[0138] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３１によって同定される配列を含む。]
[0139] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３１によって同定される配列を含む。]
[0140] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号２８によって同定される配列を含む。]
[0141] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号２８によって同定される配列を含む。]
[0142] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号２８によって同定される配列を含む。]
[0143] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号２８によって同定される配列を含む。]
[0144] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号２８によって同定される配列を含む。]
[0145] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号２９によって同定される配列を含む。]
[0146] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号２９によって同定される配列を含む。]
[0147] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号２９によって同定される配列を含む。]
[0148] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号２９によって同定される配列を含む。]
[0149] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３０によって同定される配列を含む。]
[0150] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３０によって同定される配列を含む。]
[0151] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３０によって同定される配列を含む。]
[0152] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３０によって同定される配列を含む。]
[0153] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３２によって同定される配列を含む。]
[0154] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３２によって同定される配列を含む。]
[0155] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３２によって同定される配列を含む。]
[0156] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３２によって同定される配列を含む。]
[0157] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３３によって同定される配列を含む。]
[0158] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３３によって同定される配列を含む。]
[0159] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３３によって同定される配列を含む。]
[0160] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３３によって同定される配列を含む。]
[0161] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３４によって同定される配列を含む。]
[0162] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３４によって同定される配列を含む。]
[0163] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３４によって同定される配列を含む。]
[0164] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３４によって同定される配列を含む。]
[0165] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号５によって同定される配列を含むが、但し、配列番号３９によって同定される配列を含まない。]
[0166] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号６によって同定される配列を含む。]
[0167] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号７によって同定される配列を含む。]
[0168] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号８によって同定される配列を含む。]
[0169] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号９によって同定される配列を含む。]
[0170] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号１０によって同定される配列を含む。]
[0171] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号１１によって同定される配列を含む。]
[0172] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１２によって同定される配列を含むが、但し、配列番号４１によって同定される配列を含まない。]
[0173] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１３によって同定される配列を含む。]
[0174] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１４によって同定される配列を含む。]
[0175] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１５によって同定される配列を含む。]
[0176] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１６によって同定される配列を含む。]
[0177] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１７によって同定される配列を含む。]
[0178] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１８によって同定される配列を含む。]
[0179] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１９によって同定される配列を含む。]
[0180] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号３６によって同定される配列を含む。]
[0181] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号３５によって同定される配列を含む。]
[0182] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号５、６、７、８、９、１０および１１からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、３５および３６からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、重鎖および軽鎖が、それぞれ、配列番号３９および配列番号４１によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。]
[0183] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号５および配列番号１２によって同定される配列を含むが、但し、重鎖および軽鎖が、それぞれ、配列番号３９および配列番号４１によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。]
[0184] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１２によって同定される配列を含む。]
[0185] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１２によって同定される配列を含む。]
[0186] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１２によって同定される配列を含む。]
[0187] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１２によって同定される配列を含む。]
[0188] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１０および配列番号１２によって同定される配列を含む。]
[0189] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１１および配列番号１２によって同定される配列を含む。]
[0190] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号３５によって同定される配列を含む。]
[0191] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号３５によって同定される配列を含む。]
[0192] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号３６によって同定される配列を含む。]
[0193] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号３６によって同定される配列を含む。]
[0194] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号５および配列番号１６によって同定される配列を含む。]
[0195] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１６によって同定される配列を含む。]
[0196] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１６によって同定される配列を含む。]
[0197] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１６によって同定される配列を含む。]
[0198] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１６によって同定される配列を含む。]
[0199] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号５および配列番号１３によって同定される配列を含む。]
[0200] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１３によって同定される配列を含む。]
[0201] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１３によって同定される配列を含む。]
[0202] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１３によって同定される配列を含む。]
[0203] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１３によって同定される配列を含む。]
[0204] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１４によって同定される配列を含む。]
[0205] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１４によって同定される配列を含む。]
[0206] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１４によって同定される配列を含む。]
[0207] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１４によって同定される配列を含む。]
[0208] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１５によって同定される配列を含む。]
[0209] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１５によって同定される配列を含む。]
[0210] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１５によって同定される配列を含む。]
[0211] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１５によって同定される配列を含む。]
[0212] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１７によって同定される配列を含む。]
[0213] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１７によって同定される配列を含む。]
[0214] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１７によって同定される配列を含む。]
[0215] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１７によって同定される配列を含む。]
[0216] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１８によって同定される配列を含む。]
[0217] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１８によって同定される配列を含む。]
[0218] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１８によって同定される配列を含む。]
[0219] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１８によって同定される配列を含む。]
[0220] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１９によって同定される配列を含む。]
[0221] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１９によって同定される配列を含む。]
[0222] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１９によって同定される配列を含む。]
[0223] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１９によって同定される配列を含む。]
[0224] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号１４９、２６５、２７１、２９１、２９５、３０３、３０９、３１３、３２１、３５９、４０１、４０２および４５３からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0225] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号１５０、２６６、２７２、２９２、２９６、３０４、３１０、３１４、３２２、３６０および４５４からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0226] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４９、２６５、２７１、２９１、２９５、３０３、３０９、３１３、３２１、３５９、４０１、４０２および４５３からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号１５０、２６６、２７２、２９２、２９６、３０４、３１０、３１４、３２２、３６０および４５４からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0227] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号１４７、２６３、２６９、２８９、２９３、３０１、３０７、３１１、３１９、３５７、３７３および３９９からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0228] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１４８、２６４、２７０、２９０、２９４、３０２、３０８、３１２、３２０、３５８、３７４および４００からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0229] もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１４７、２６３、２６９、２８９、２９３、３０１、３０７、３１１、３１９、３５７、３７３および３９９からなる配列の群、ならびに配列番号１４８、２６４、２７０、２９０、２９４、３０２、３０８、３１２、３２０、３５８、３７４および４００からなる配列の群に含まれる配列を含む。]
[0230] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４９および配列番号１５０によって同定される配列を含む。]
[0231] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４７および配列番号１４８によって同定される配列を含む。]
[0232] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６５および配列番号２６６によって同定される配列を含む。]
[0233] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６３および配列番号２６４によって同定される配列を含む。]
[0234] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２７１および配列番号２７２によって同定される配列を含む。]
[0235] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６９および配列番号２７０によって同定される配列を含む。]
[0236] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２９１および配列番号２９２によって同定される配列を含む。]
[0237] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２８９および配列番号２９０によって同定される配列を含む。]
[0238] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２９５および配列番号２９６によって同定される配列を含む。]
[0239] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２９３および配列番号２９４によって同定される配列を含む。]
[0240] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０３および配列番号３０４によって同定される配列を含む。]
[0241] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０１および配列番号３０２によって同定される配列を含む。]
[0242] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０９および配列番号３１０によって同定される配列を含む。]
[0243] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０７および配列番号３０８によって同定される配列を含む。]
[0244] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３１３および配列番号３１４によって同定される配列を含む。]
[0245] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３１１および配列番号３１２によって同定される配列を含む。]
[0246] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３２１および配列番号３２２によって同定される配列を含む。]
[0247] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３１９および配列番号３２０によって同定される配列を含む。]
[0248] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３５９および配列番号３６０によって同定される配列を含む。]
[0249] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３５７および配列番号３５８によって同定される配列を含む。]
[0250] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３７５および配列番号３７６によって同定される配列を含む。]
[0251] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３７３および配列番号３７４によって同定される配列を含む。]
[0252] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号４０１および配列番号４０２によって同定される配列を含む。]
[0253] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３９９および配列番号４００によって同定される配列を含む。]
[0254] もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号４５３および配列番号４５４によって同定される配列を含む。]

权利要求:

請求項1
Ｖｈ（可変重鎖）抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ（可変軽鎖）抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、但し、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４６、４７、および４８によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号５２、５３および５４によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項2
Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そして重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項3
Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２０、２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、配列番号４０によって同定される配列を含まない、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項4
Ｖｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３７および３８からなる配列の群に含まれる配列を含むＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、但し、ＶｈおよびＶｌ鎖が、それぞれ、配列番号４０および配列番号４２によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない、請求項３に記載のＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項5
ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号２７によって同定される配列を含む、請求項４に記載のＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項6
Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２３によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項7
Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３７または配列番号３８によって同定される配列を含む、請求項６に記載のＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項8
Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２４によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項9
Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３７または配列番号３８によって同定される配列を含む、請求項８に記載のＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項10
ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４９、２６５、２７１、２９１、２９５、３０３、３０９、３１３、３２１、３５９、４０１、４０２および４５３からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号１５０、２６６、２７２、２９２、２９６、３０４、３１０、３１４、３２２、３６０および４５４からなる配列の群に含まれる配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項11
抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１４７、２６３、２６９、２８９、２９３、３０１、３０７、３１１、３１９、３５７、３７３および３９９からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号１４８、２６４、２７０、２９０、２９４、３０２、３０８、３１２、３２０、３５８、３７４および４００からなる配列の群に含まれる配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
請求項12
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合部分をコードする核酸。
請求項13
請求項１２に記載の核酸を含むベクター。
請求項14
請求項１２に記載の核酸または請求項１３に記載のベクターを含む宿主細胞。
請求項15
請求項１〜１１のいずれか一項に記載のＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分の産生のための方法であって、抗体またはその結合部分の発現を可能にし、そして培養物から抗体またはその結合部分を回収することを可能にする条件下で、請求項１４に記載の宿主細胞を培養することを含む、方法。
請求項16
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗体またはその抗原結合部分を含む医薬組成物。